Hippuryl-Arg-OH |
Catalog No.GA22584
One-Click Copy Product Info
|
Hippuryl-Arg-OH est un substrat fluorescent utilisé dans des essais d'activité enzymatique pour l'identification et le clivage de liaisons peptidiques qui contiennent de l'arginine.
Products are for research use only. Not for human use. We do not sell to patients.
Cas No.: 744-46-7
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
_1-3.$$$39978408@51.jpg');)
_1-9.$$$38538795@65.jpg');)
_1-9.$$$39112701@51.jpg');)
_1-7.$$$37316672@70.jpg');)
_366-372.$$$36198801@70.jpg');)
.$$$38565142@65.jpg');)
_1867-1883.$$$33248023@67.jpg');)
_eads6055.$$$39977546@45.jpg');)
_eadm9805.$$$40080571@45.jpg');)
_eadj3020.$$$39666821@45.jpg');)
_1-20.$$$39757301@28.jpg');)
_1-24.$$$38898113@28.jpg');)
_273-287.$$$36806353@46.jpg');)
_1-16.$$$37156877@44.jpg');)
_1-19.$$$37460805@44.jpg');)
_1291-1307.$$$34518654@46.jpg');)
Hippuryl-Arg-OH est un substrat fluorescent utilisé dans des essais d'activité enzymatique pour l'identification et le clivage de liaisons peptidiques qui contiennent de l'arginine. Hippuryl-Arg-OH peut être employé pour des études d'activité enzymatique, par exemple la carboxypeptidase B et l' aminopeptidase, et pour des études liées dans le domaine du développement de médicaments [1-4].
References:
[1] Liu YH, Konermann L. Enzyme conformational dynamics during catalysis and in the 'resting state' monitored by hydrogen/deuterium exchange mass spectrometry. FEBS Lett. 2006 Oct 2;580(22):5137-42.
[2] Fricker LD, Devi L. Comparison of a spectrophotometric, a fluorometric, and a novel radiometric assay for carboxypeptidase E (EC 3.4.17.10) and other carboxypeptidase B-like enzymes. Anal Biochem. 1990 Jan;184(1):21-7.
[3] Song L, Fricker LD. Purification and characterization of carboxypeptidase D, a novel carboxypeptidase E-like enzyme, from bovine pituitary. J Biol Chem. 1995 Oct 20;270(42):25007-13.
[4] Casarini DE, Alves KB, Araújo MS, et al. Endopeptidase and carboxypeptidase activities in human urine which hydrolyze bradykinin. Braz J Med Biol Res. 1992;25(3):219-29.
Détermination de l'activité TAFIa dans le plasma par la méthode Hippuryl-Arg-OH[1]
Ce protocol est adapté de données d'étude et frouni à titre de référence uniquement. Des ajustements peuvent être nécessaires selon les exigences expérimentales spécifiques.
1. Préparation des réactifs: Préparer une solution de travail 20mM du substrat Hippuryl-Arg. Préparer des solutions de travail de Thrombine à 5U/mL et de Thrombomoduline à 7.5U/mL, puis les mélanger pour former un complexe thrombine-thrombomoduline. Préparer une solution de CaCl₂ à 60mM. Préparer un tampon d'activation (HEPES 20mM , NaCl 0.15M, CaCl₂ 5mM, pH=7.4). Préparer une solution de HCl 1M pour arrêter la réaction. Préparer une solution de NaOH 1M. Préparer un tampon phosphate 1M. Préparer une solution de chlorure de cyanuryle à 3% dans du 1,4-dioxane.
2. Activation du TAFI : Prélever 15μL d'échantillon de plasma et le mélanger avec 12μL du complexe thrombine-thrombomoduline, 8.5μL de la solution de CaCl₂ 60mM et 24μL de tempon d'activation. Incuber le mélange à température ambiante durant 10 minutes pour activer le TAFI présent dans le plasma en TAFIa. Ensuite, ajouter 20μL d'Hirudine pour arrêter la réaction d'activation.
3. Détection de l'activité TAFIa: Au mélange réactionnel de l'étape précédente, ajouter 20μL de la solution de travail du substrat Hippuryl-Arg 20mM et incuber à température ambiante durant 10 minutes. Puis, ajouter 20μL de la solution de HCI 1M pour arrêter la réaction du substrat. Ensuite, ajouter successivement 20μL de la solution de NaOH 1M et 25μL du tampon phosphate 1M dans le système réactionnel. Enfin, ajouter 60μL de la solution de chlorure de cyanuryle à 3%dans le 1,4-dioxane et laisser reposer pour un développement de couleur suffisant.
4. Détection et calcul: Centrifuger le mélange réactionnel ayant développé sa coleur à 14,000g durant 2 minutes. Prélever le surnageant et mesurer son absorbance à une longeur d'onde de 405nm à l'aide d'un spectrophotomètre. Tous les échantillons et les points de la courbe standard doivent être dilués à 50% avec un sérum inactivé par la chaleur et mesurés en double exemplaire.
Précautions:
(1) Pour votre sécurité et votre santé, veuillez porter une blouse de laboratoire et des gants jetables durant l'opération.
References:
[1] Santamaría A, Borrell M, Oliver A, et al. Association of functional thrombin-activatable fibrinolysis inhibitor (TAFI) with conventional cardiovascular risk factors and its correlation with other hemostatic factors in a Spanish population. Am J Hematol. 2004 Aug;76(4):348-52.
| Cas No. | 744-46-7 | SDF | |
| Formula | C15H21N5O4 | M.Wt | 335.36 |
| Solubility | 50 mg/ml in AcOH 80 % | Storage | Store at -20°C; protect from light |
| General tips | Please select the appropriate solvent to prepare the stock solution according to the
solubility of the product in different solvents; once the solution is prepared, please store it in
separate packages to avoid product failure caused by repeated freezing and thawing.Storage method
and period of the stock solution: When stored at -80°C, please use it within 6 months; when stored
at -20°C, please use it within 1 month. To increase solubility, heat the tube to 37°C and then oscillate in an ultrasonic bath for some time. |
||
| Shipping Condition | Evaluation sample solution: shipped with blue ice. All other sizes available: with RT, or with Blue Ice upon request. | ||
| Prepare stock solution | |||
|
1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 2.9819 mL | 14.9094 mL | 29.8187 mL |
| 5 mM | 596.4 μL | 2.9819 mL | 5.9637 mL |
| 10 mM | 298.2 μL | 1.4909 mL | 2.9819 mL |
Step 1: Enter information below (Recommended: An additional animal making an allowance for loss during the experiment)
g
μL
Step 2: Enter the in vivo formulation (This is only the calculator, not formulation. Please contact us first if there is no in vivo formulation at the solubility Section.)
Calculation results:
Working concentration: mg/ml;
Method for preparing DMSO master liquid: mg drug pre-dissolved in μL DMSO ( Master liquid concentration mg/mL, Please contact us first if the concentration exceeds the DMSO solubility of the batch of drug. )
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next addμL PEG300, mix and clarify, next addμL Tween 80, mix and clarify, next add μL saline, mix and clarify.
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next add μL Corn oil, mix and clarify.
Note: 1. Please make sure the liquid is clear before adding the next solvent.
2. Be sure to add the solvent(s) in order. You must ensure that the solution obtained, in the previous addition, is a clear solution before proceeding to add the next solvent. Physical methods such as vortex, ultrasound or hot water bath can be used to aid dissolving.
3. All of the above co-solvents are available for purchase on the GlpBio website.
Quality Control & SDS
- View current batch:
- Purity: >98.00% Appearance: A solid
- COA (Certificate of Analysis)
- SDS (Safety Data Sheet)
- Datasheet
Average Rating: 5 (Based on Reviews and 14 reference(s) in Google Scholar.)