Suc-Ala-Ala-Pro-Ile-pNA |
Catalog No.GA23531
One-Click Copy Product Info
|
Suc-Ala-Ala-Pro-Ile-pNA (Suc-AAPI-pNA) est un composé peptidique synthétique utilisé pour la détection et l’étude de l’activité de diverses protéases comme un substrat. Avec l’action de enzymes, Suc-Ala-Ala-Pro-Ile-pNA est hydrolysé, libérant de la p-nitroaniline (pNA) jaune. Le changement d'absorbance à 400-410 nm est mesuré par la colorimétrie pour refléter l'activité enzymatique.
Products are for research use only. Not for human use. We do not sell to patients.
Cas No.: 72682-77-0
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
_1-3.$$$39978408@51.jpg');)
_1-9.$$$38538795@65.jpg');)
_1-9.$$$39112701@51.jpg');)
_1-7.$$$37316672@70.jpg');)
_366-372.$$$36198801@70.jpg');)
.$$$38565142@65.jpg');)
_1867-1883.$$$33248023@67.jpg');)
_eads6055.$$$39977546@45.jpg');)
_eadm9805.$$$40080571@45.jpg');)
_eadj3020.$$$39666821@45.jpg');)
_1-20.$$$39757301@28.jpg');)
_1-24.$$$38898113@28.jpg');)
_273-287.$$$36806353@46.jpg');)
_1-16.$$$37156877@44.jpg');)
_1-19.$$$37460805@44.jpg');)
_1291-1307.$$$34518654@46.jpg');)
Suc-Ala-Ala-Pro-Ile-pNA (Suc-AAPI-pNA) est un composé peptidique synthétique utilisé pour la détection et l’étude de l’activité de diverses protéases comme un substrat. Avec l’action de enzymes, Suc-Ala-Ala-Pro-Ile-pNA est hydrolysé, libérant de la p-nitroaniline (pNA) jaune. Le changement d'absorbance à 400-410 nm est mesuré par la colorimétrie pour refléter l'activité enzymatique.
La structure et les caractéristiques de groupe du Suc-Ala-Ala-Pro-Ile-pNA sont les suivantes :
(1) Groupe succinyle (Suc) augmente la solubilité dans l'eau et la stabilité du substrat.
(2) La Séquence d'acides aminés (Ala-Ala-Pro-Ile) : cette séquence spécifique imite de certains substrats naturels et est utile pour étudier la spécificité des protéases pour différents substrats.
(3) p-Nitroaniline (pNA): c’est une groupe chromophorique normale qui libère un produit jaune avec des caractéristiques d'absorbance lors de l'hydrolyse, qui est facile pour suivir des réactions enzymatiques par spectrométrie.
References:
[1] Chaves-Pozo E, Valero Y, Lozano M T, et al. Fish granzyme A shows a greater role than granzyme B in fish innate cell-mediated cytotoxicity, Front. Immunol. 10 (2019) 2579[J]. 2019.
Ce protocole ne constitue qu'une ligne directrice et doit être modifié en fonction de vos besoins spécifiques.
1.La preparation de solution
(1)Solution stock : Dissoudre Suc-Ala-Ala-Pro-Ile-pNA dans du DMSO jusqu'à une concentration finale de 10 mM.
Note : Après avoir aliquoté la solution de stockage inutilisée, la conserver à -20℃ dans l'obscurité pour éviter les congélations et décongélations répétées.
(2)Solution de travail : Diluer la solution stock avec un tampon expérimental jusqu'à la concentration de travail requise, par exemple : 0,2 mM.
Note : Veuillez ajuster la concentration de travail optimale en fonction de la situation réelle ou vous référer à la littérature pour définir la concentration du gradient vous-mêmes. On doit préparer et utiliser la solution de travail immédiatement.
2.La détermination de la sensibilité du Suc-Ala-Ala-Pro-Ile-pNA au clivage par la protéase[1] (d'après la littérature, pour référence uniquement) :
(1)Préparation des matériaux : Substrat : Suc-Ala-Ala-Pro-Ile-pNA, enzyme active, tampon PBS, plaque de microtitration à 96 puits, lecteur de microplaques.
(2)Système de réaction : Ajouter le substrat chromogène Suc-Ala-Ala-Pro-Ile-pNA (5 μl, concentration finale 0,2 mM) et l'enzyme active (quelques microlitres, la quantité dépend de l'activité enzymatique) dans chaque puits, et ajouter du PBS pour que le volume final atteigne 200 μl.
(3)Conditions de réaction : Effectuer la réaction à une température spécifique, par exemple 20°C.
(4)Mesurer l'absorbance par spectrophotométrie à 405 nm à l'aide d'un lecteur de microplaques. Mesurer aux points de temps suivants : 0, 20, 40, 60, 120, 180, 240, 300 et 360 minutes. Contrôle : Préparer un puits vierge pour chaque substrat sans ajouter d'enzyme.
(5)Collecte et analyse des données : Effectuer les réactions en trois exemplaires. Soustraire la mesure à blanc à chaque point dans le temps. Utiliser l'absorbance moyenne des trois réactions pour le tracé et l'analyse.
Notes :
Ce protocole fournit des indications pour déterminer la sensibilité au clivage par la protéase en utilisant Suc-Ala-Ala-Pro-Ile-pNA. Il peut être adapté en fonction d'autres publications et d'exigences expérimentales spécifiques.
| Cas No. | 72682-77-0 | SDF | |
| Formula | C27H38N6O9 | M.Wt | 590.63 |
| Solubility | Soluble in DMSO | Storage | Store at -20°C |
| General tips | Please select the appropriate solvent to prepare the stock solution according to the
solubility of the product in different solvents; once the solution is prepared, please store it in
separate packages to avoid product failure caused by repeated freezing and thawing.Storage method
and period of the stock solution: When stored at -80°C, please use it within 6 months; when stored
at -20°C, please use it within 1 month. To increase solubility, heat the tube to 37°C and then oscillate in an ultrasonic bath for some time. |
||
| Shipping Condition | Evaluation sample solution: shipped with blue ice. All other sizes available: with RT, or with Blue Ice upon request. | ||
| Prepare stock solution | |||
|
1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 1.6931 mL | 8.4655 mL | 16.9311 mL |
| 5 mM | 338.6 μL | 1.6931 mL | 3.3862 mL |
| 10 mM | 169.3 μL | 846.6 μL | 1.6931 mL |
Step 1: Enter information below (Recommended: An additional animal making an allowance for loss during the experiment)
g
μL
Step 2: Enter the in vivo formulation (This is only the calculator, not formulation. Please contact us first if there is no in vivo formulation at the solubility Section.)
Calculation results:
Working concentration: mg/ml;
Method for preparing DMSO master liquid: mg drug pre-dissolved in μL DMSO ( Master liquid concentration mg/mL, Please contact us first if the concentration exceeds the DMSO solubility of the batch of drug. )
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next addμL PEG300, mix and clarify, next addμL Tween 80, mix and clarify, next add μL saline, mix and clarify.
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next add μL Corn oil, mix and clarify.
Note: 1. Please make sure the liquid is clear before adding the next solvent.
2. Be sure to add the solvent(s) in order. You must ensure that the solution obtained, in the previous addition, is a clear solution before proceeding to add the next solvent. Physical methods such as vortex, ultrasound or hot water bath can be used to aid dissolving.
3. All of the above co-solvents are available for purchase on the GlpBio website.
Quality Control & SDS
- View current batch:
- Purity: >98.00% Appearance: A solid
- COA (Certificate of Analysis)
- SDS (Safety Data Sheet)
- Datasheet
Average Rating: 5 (Based on Reviews and 18 reference(s) in Google Scholar.)