HBC599 |
Catalog No.GC63549
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HBC599 es un mímico de HBC sin propiedades fluorescente. No libera señal de luz alguna vez cuando se encuentra en disolución, pero se activa y brilla con gran intensidad al formar un complejo junto al apto de Pepper RNA.
Products are for research use only. Not for human use. We do not sell to patients.
Cas No.: 2530162-00-4
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
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HBC599 es un mímico de HBC sin propiedades fluorescente. No libera señal de luz alguna vez cuando se encuentra en disolución, pero se activa y brilla con gran intensidad al formar un complejo junto al apto de Pepper RNA. Para detectar dicho complejo, se utiliza una longitud de onda de excitación de 515nm y una longitud de emisión de 599nm[1].
Tinción con HBC599 para imágenes de RNA de células vivas
Este protocolo está adaptado a partir de datos de investigación y se proporciona solo como referencia. Los ajuste pueden ser necesarios en función de requisitos experimentales específicos.
(1) Preparación y transfección celular: Siembra las células apropiadas (e.g., HeLa, U2OS) en platos de fondo de vidrio o cubretas y cultivo hasta que alcancen una confluencia del 50-70%. Transfecta las células con un plásmido o RNA que expresa el RNA de interés etiquetado con la secuencia de aptámero de Pepper RNA. Incubar durante 12-48 horas para permitir una expresión suficiente de RNA.
(2) Preparación de la solución HBC599: Prepare una solución de stock de 1-5mM de HBC599 usando DMSO anhidro. Aliquote y almacene a -20°C o -80°C protegido de la luz. Diluir la solución de stock de HBC599 en medio de cultivo celular precalentado y libre de suero (e.g., DMEM o Opti-MEM) para lograr una concentración de trabajo final típicamente entre 0.5 y 5µM. Mezclar bien.
(3) Tinción celular: Lave suavemente las células transfectadas 1-2 veces con medio caliente y sin suero o PBS. Retire completamente el tampón de lavado y agregue el medio de tinción HBC599 preparado a las células. Inucbar las células en el medio de tinción a 37°C, 5% de CO₂ durante 15 a 30 minutos. Aspire cuidadosamente la solución de tinción. Lave las células 2-3 veces con medio caliente y sin suero o 1X PBS.
(4) Imágenes de células vivas: Después del lavado final, agregue un pequeño volumen de medio de cultivo fresco precalentado a las células. Proceda a obtener imágenes de las células inmediatamente en un microscopio confocal o epifluorescente. La fluorescencia HBC599 generalmente se excita con un láser de 515nm y se detecta utilizando un filtro de emisión de 599nm.
Precauciones:
(1) El tiempo de incubación puede oscilar entre 30 y 90 minutos con un impacto mínimo en la presición del resultado; elegir 1 hora es más conveniente.
(2) Por su seguridad y salud, por favor use una bata del laboratorio y guantes desechables durante la operación.
| Cas No. | 2530162-00-4 | SDF | |
| Formula | C21H17N3OS | M.Wt | 359.44 |
| Solubility | DMSO : ≥ 25 mg/mL (69.55 mM) | Storage | Store at 2-8°C,protect from light |
| General tips | Please select the appropriate solvent to prepare the stock solution according to the
solubility of the product in different solvents; once the solution is prepared, please store it in
separate packages to avoid product failure caused by repeated freezing and thawing.Storage method
and period of the stock solution: When stored at -80°C, please use it within 6 months; when stored
at -20°C, please use it within 1 month. To increase solubility, heat the tube to 37°C and then oscillate in an ultrasonic bath for some time. |
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| Shipping Condition | Evaluation sample solution: shipped with blue ice. All other sizes available: with RT, or with Blue Ice upon request. | ||
| Prepare stock solution | |||
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1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 2.7821 mL | 13.9105 mL | 27.8211 mL |
| 5 mM | 556.4 μL | 2.7821 mL | 5.5642 mL |
| 10 mM | 278.2 μL | 1.3911 mL | 2.7821 mL |
Step 1: Enter information below (Recommended: An additional animal making an allowance for loss during the experiment)
g
μL
Step 2: Enter the in vivo formulation (This is only the calculator, not formulation. Please contact us first if there is no in vivo formulation at the solubility Section.)
Calculation results:
Working concentration: mg/ml;
Method for preparing DMSO master liquid: mg drug pre-dissolved in μL DMSO ( Master liquid concentration mg/mL, Please contact us first if the concentration exceeds the DMSO solubility of the batch of drug. )
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next addμL PEG300, mix and clarify, next addμL Tween 80, mix and clarify, next add μL saline, mix and clarify.
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next add μL Corn oil, mix and clarify.
Note: 1. Please make sure the liquid is clear before adding the next solvent.
2. Be sure to add the solvent(s) in order. You must ensure that the solution obtained, in the previous addition, is a clear solution before proceeding to add the next solvent. Physical methods such as vortex, ultrasound or hot water bath can be used to aid dissolving.
3. All of the above co-solvents are available for purchase on the GlpBio website.
Quality Control & SDS
- View current batch:
- Purity: >98.00% Appearance: A solid
- COA (Certificate of Analysis)
- SDS (Safety Data Sheet)
- Datasheet
Average Rating: 5 (Based on Reviews and 39 reference(s) in Google Scholar.)