HBC599 |
カタログ番号GC63549
One-Click Copy Product Info
|
HBC599は非蛍光性HBC模倣体であり、溶液中では発光しないが、Pepper RNAアプタマーと複合体を形成すると活性化し、鮮やかな蛍光を発する。
Products are for research use only. Not for human use. We do not sell to patients.
Cas No.: 2530162-00-4
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
_1-3.$$$39978408@51.jpg');)
_1-9.$$$38538795@65.jpg');)
_1-9.$$$39112701@51.jpg');)
_1-7.$$$37316672@70.jpg');)
_366-372.$$$36198801@70.jpg');)
.$$$38565142@65.jpg');)
_1867-1883.$$$33248023@67.jpg');)
_eads6055.$$$39977546@45.jpg');)
_eadm9805.$$$40080571@45.jpg');)
_eadj3020.$$$39666821@45.jpg');)
_1-20.$$$39757301@28.jpg');)
_1-24.$$$38898113@28.jpg');)
_273-287.$$$36806353@46.jpg');)
_1-16.$$$37156877@44.jpg');)
_1-19.$$$37460805@44.jpg');)
_1291-1307.$$$34518654@46.jpg');)
HBC599は非蛍光性HBC模倣体であり、溶液中では発光しないが、Pepper RNAアプタマーと複合体を形成すると活性化し、鮮やかな蛍光を発する。この複合体は、励起波長515nm、発光波長599nmを用いて検出することができる。
References:
[1] Chen X, Zhang D, Su N, et al. Visualizing RNA dynamics in live cells with bright and stable fluorescent RNAs. Nat Biotechnol. 2019 Nov;37(11):1287-1293.
生細胞RNAイメージングのためのHBC599を用いた染色
本プロトコルは研究データに基づいて作成されたものであり、あくまで参考情報として提供されています。具体的な実験要件に応じて調整が必要となる場合があります。
(1) 細胞の準備とトランスフェクション：適切な細胞（例：HeLa、U2OS）をガラス底ディッシュまたはカバーグラスに播種し、50～70%のコンフルエントになるまで培養する。Pepper RNAアプタマー配列でタグ付けされた目的のRNAを発現するプラスミドまたはRNAを用いて、細胞にトランスフェクションを行う。十分なRNA発現が得られるよう、12～48時間インキュベートする。
(2) HBC599溶液の調製：無水DMSOを用いて、1～5mMのHBC599ストック溶液を調製する。分注し、光を避けて-20°Cまたは-80°Cで保存する。HBC599ストック溶液を、あらかじめ温めておいた無血清細胞培養培地（DMEMやOpti-MEMなど）で希釈し、最終使用濃度を通常0.5～5µMに調整する。十分に混合する。
(3) 細胞染色：トランスフェクションした細胞を、温めた無血清培地またはPBSで1～2回優しく洗浄する。洗浄バッファーを完全に除去し、調製したHBC599染色培地を細胞に加える。37°C、5% CO₂の条件下で、染色培地中で15～30分間インキュベートする。染色溶液を注意深く吸引除去する。温めた無血清培地または1X PBSで細胞を2～3回洗浄する。
(4) 生細胞イメージング：最終洗浄後、温めた新鮮な培養培地を少量細胞に加える。直ちに共焦点顕微鏡または落射蛍光顕微鏡で細胞のイメージングを行う。HBC599の蛍光は通常、515nmのレーザーで励起され、599nmの蛍光フィルターを用いて検出される。
注意事項：
(1) インキュベーション時間は30分から90分の範囲であれば、結果の精度への影響は最小限である。1時間を選択するのが最も便利である。
(2) 安全と健康のため、操作中は白衣と使い捨て手袋を着用してください。
References:
[1] Rees HC, Gogacz W, Li NS, et al. Structural Basis for Fluorescence Activation by Pepper RNA. ACS Chem Biol. 2022 Jul 15;17(7):1866-1875.
| Cas No. | 2530162-00-4 | SDF | |
| Formula | C21H17N3OS | M.Wt | 359.44 |
| 溶解度 | DMSO : ≥ 25 mg/mL (69.55 mM) | Storage | Store at 2-8°C,protect from light |
| General tips | Please select the appropriate solvent to prepare the stock solution according to the
solubility of the product in different solvents; once the solution is prepared, please store it in
separate packages to avoid product failure caused by repeated freezing and thawing.Storage method
and period of the stock solution: When stored at -80°C, please use it within 6 months; when stored
at -20°C, please use it within 1 month. To increase solubility, heat the tube to 37°C and then oscillate in an ultrasonic bath for some time. |
||
| Shipping Condition | Evaluation sample solution: shipped with blue ice. All other sizes available: with RT, or with Blue Ice upon request. | ||
| Prepare stock solution | |||
|
1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 2.7821 mL | 13.9105 mL | 27.8211 mL |
| 5 mM | 556.4 μL | 2.7821 mL | 5.5642 mL |
| 10 mM | 278.2 μL | 1.3911 mL | 2.7821 mL |
Step 1: Enter information below (Recommended: An additional animal making an allowance for loss during the experiment)
g
μL
Step 2: Enter the in vivo formulation (This is only the calculator, not formulation. Please contact us first if there is no in vivo formulation at the solubility Section.)
Calculation results:
Working concentration: mg/ml;
Method for preparing DMSO master liquid: mg drug pre-dissolved in μL DMSO ( Master liquid concentration mg/mL, Please contact us first if the concentration exceeds the DMSO solubility of the batch of drug. )
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next addμL PEG300, mix and clarify, next addμL Tween 80, mix and clarify, next add μL saline, mix and clarify.
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next add μL Corn oil, mix and clarify.
Note: 1. Please make sure the liquid is clear before adding the next solvent.
2. Be sure to add the solvent(s) in order. You must ensure that the solution obtained, in the previous addition, is a clear solution before proceeding to add the next solvent. Physical methods such as vortex, ultrasound or hot water bath can be used to aid dissolving.
3. All of the above co-solvents are available for purchase on the GlpBio website.
Quality Control & SDS
- View current batch:
- Purity: >98.00% Appearance: A solid
- COA (Certificate of Analysis)
- SDS (Safety Data Sheet)
- Datasheet
Average Rating: 5 (Based on Reviews and 39 reference(s) in Google Scholar.)