Lapatinib (Synonyms: GW572016; GW2016)

Líneas celulares

Método de preparación

Las células se sembraron en microplacas de 96 pocillos de paredes blancas a una densidad de 3×10³ de células por pozo en medios de crecimiento de 100 μL y se incubaron durante 24 horas a 37 °C, 5% de CO2 para permitir que las células se unan. Posteriormente, los medios de crecimiento se retiraron y se reemplazaron con medios frescos que contenían medicamentos diluidos en serie de interés o medios en blanco (para controles no tratados), y se incubaron durante 96 horas. Probamos cada medicamento solo y en combinación con cinco concentraciones diluidas en serie, y la viabilidad celular se midió utilizando CellTiter-Glo 2.0. Para cada par de medicamentos, cada concentración se probó en combinación en al menos 3 experimentos independientes utilizando un diseño de matriz 6×6. El porcentaje de viabilidad para cada combinación se calculó dividiendo las señales tratadas con medicamentos por las señales no tratadas y multiplicándolas por 100. El paclitaxel (1000, 167, 28, 4,6, 0,77, 0nM) se probó en combinación con Lapatinib (50000, 10000, 2000, 400, 80, 0nM) y poziotinib (12500, 4167, 1389, 463, 154, 0nM). La sinergia para cada combinación de fármaco se evaluó utilizando el paquete de buscador de sinergias en R, con el porcentaje de células viables en relación con las células de control no tratadas como base para la evaluación.

Condiciones de reacción

Áreas de aplicación

Modelos animales

Método de preparación

Setenta y seis ratones se dividieron en tres grupos: tratamiento con tri-o-cresil fosfato (TOCP) (n=33); TOCP más tratamiento con Lapatinib (LPT) (n=33); tratamiento con vehículo (n=10). A los ratones del grupo tratado con TOCP se les administró una dosis única de TOCP a 900 mg/kg por gavage, mientras que los ratones del grupo tratado con TOCP más Lapatinib se trataron dos veces con Lapatinib disuelto en sulfobutil-β-ciclodextrina al 10% a una dosis de 25 mg/kg (p.o.), 4 horas antes y 4 días después del tratamiento con TOCP. A los ratones del grupo de control se les dieron los vehículos correspondientes. Los ratones fueron examinados diariamente para detectar signos de intoxicación por TOCP durante 21 días.

En los días 2, 7, 14 y 21 después de los tratamientos, los ratones 3, 6, 6 y 6 en los puntos de muestreo correspondientes fueron sacrificados por decapitación cervical. Seis ratones del grupo de control fueron sacrificados el día 21. La médula espinal y los nervios ciáticos se diseccionaron rápidamente y congelaron en nitrógeno líquido antes de almacenarlos a -80 °C para su uso futuro. Para la tinción inmunofluorescente, otros 4 ratones de cada grupo de tratamiento en los días 7, 14 y 21 y 4 ratones del grupo de control en el día 21 fueron anestesiados por inyección intraperitoneal de pentobarbital de sodio (60 mg/kg de peso corporal). Luego, los ratones fueron perfundidos a través de la aorta ascendente con NaCl al 0,9 % a temperatura ambiente, seguido de una solución tampón de fosfato (PBS) helada de 0,1 M (pH 7,4) que contenía paraformaldehído al 4% (p/v) utilizando una bomba peristáltica. La médula espinal perfundida y los tejidos del nervio ciático se postfijaron en paraformaldehído al 4% durante la noche a 4 °C, después de lo cual fueron crioprotegidos mediante almacenamiento en 0,1M PBS que contenía 30 % de sacarosa a 4 °C durante 2 días.

Forma de dosificación

Áreas de aplicación

References:
[1] McCorkle JR, Gorski JW, Liu J, et al. Lapatinib and poziotinib overcome ABCB1-mediated paclitaxel resistance in ovarian cancer. PLoS One. 2021 Aug 4;16(8):e0254205.
[2] Xu HY, Sun YJ, Sun YY, et al. Lapatinib alleviates TOCP-induced axonal damage in the spinal cord of mouse. Neuropharmacology. 2021 May 15;189:108535.