APF |
Catalog No.GC42825
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APF es un novedoso indicador ROS que fluoresce selectiva y dependiente de la dosis al unirse a ciertas especies reactivas de ogénito en la solución y en las células con una longitud de onda máxima de excitación/emisión de 490/515 nm.
Products are for research use only. Not for human use. We do not sell to patients.
Cas No.: 359010-70-1
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
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APF es un novedoso indicador ROS que fluoresce selectiva y dependiente de la dosis al unirse a ciertas especies reactivas de ogénito en la solución y en las células con una longitud de onda máxima de excitación/emisión de 490/515 nm.APF tiene mayor especificidad y estabilidad que HDCFDA.APF es permeable a la membrana celular,no fluorescente,y reacciona con especies reactivas de oxígeno,como el radical hidroxilo,el anión peroxinitroso o el anión hipoclorito,para producir una fluorescencia verde intensa,que puede detectarse mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.Tras reaccionar con radicales hidroxilo,anión peroxinitrito oanión hipoclorito,APF produce una fluorescencia verde fuerte,que puede detectarse mediante microscopio de fluorescencia,imágenes de alto rendimiento,cimografía de fluorescencia o cimografía de flujo.Al mismo tiempo,también puede acoplarse a una variedad d emoléculas para lograr una detección específica de marcaje,que se utiliza ampliamente en los campos de biomarcadores,imagen celular y microscopía de fluorescencia[1].
References:
[1]. Cohn C A, Pedigo C E, Hylton S N, et al. Evaluating the use of 3'-(p-Aminophenyl) fluorescein for determining the formation of highly reactive oxygen species in particle suspensions[J]. Geochemical Transactions, 2009, 10: 1-9.
El siguiente programa es solo para referencia,el uso real del programa debe mejorarse según tu situación real.
Ⅰ.Preparación de la solución de stock
El polvo ciopreservado de 1 mg se recalentó a la temperatura ambiente durante al menos 20 minutos,tras lo cual se añadieron 472μL de DMF anhidro para formar una solución de almancenamiento de 5 mM.Tras una disolución y mezcla suficientes,dispensa según la cantidad de cada uso y guarda a -20℃ de la luz,evitando congelaciones y descongelaciones repetidas.
Nota: APF es soluble en DMSO,pero algunos datos muestran que DMSO es un apagador de los radicales hidroxilo,lo que interfiere con la detección y reduce la sensibilidad.Por lo tanto,no se recomienta DMSO como disolvente.
Ⅱ.Pruebas del sistema de la solución
Antes del experimento foemal,toma un tubo de solución de almacenamiento de APF y colócalo a la temperatura ambiente,para que pueda disuelverse completamente.Después,diluir la solución con un tampón adecuado (por ejemplo,tampón HHBS o tampón PBS) hasta la concentración deseada de la solución de trabajo.Se recomienda que la concentración inicial sea de 1-10μM,y que la concentración real se optimice según tu propio sistema experimental o referencias.
Ⅲ.Ensayo del Sistema Celular
1.Prepara la supensión de celdas o celdas vivas en portaobjetos.
2.Diluir la solución de DMF en un tampón adecuado,el rango recomendado de concentración inicial es de 1-10μM.
3.Incubar las células con APF diluido durante 20-60 minutos a 37°C.Las células adherentes pueden incubarse sin gigentión de trissina.
4.Lava las células 2-3 veces,elimina el exceso de solución de sonda y retiéntelo por un tampón o medio nuevo.
5.Seleccionar el instrumento de florescencia adecuado y detectar en Ex/Em: 490/515nm.
Nota:
1. La( albúmina sérica bovina(BSA) y el rojo de fenol afectarán al valor de fluorescencia y deben usarse con precaución.
2.La fluorescencia producida por APF es mucho más débil que la de otras sondas reactivas de oxígenos (por ejemplo,DCFH),lo cual eatá determinado por las características d ela propia sonda.
References:
[1]. Flemmig J, Zschaler J, Remmler J, et al. The fluorescein-derived dye aminophenyl fluorescein is a suitable tool to detect hypobromous acid (HOBr)-producing activity in eosinophils[J]. Journal of Biological Chemistry, 2012, 287(33): 27913-27923.
[2]. Cohn C A, Pedigo C E, Hylton S N, et al. Evaluating the use of 3'-(p-Aminophenyl) fluorescein for determining the formation of highly reactive oxygen species in particle suspensions[J]. Geochemical Transactions, 2009, 10: 1-9.
| Cas No. | 359010-70-1 | SDF | |
| Canonical SMILES | Nc1ccc(cc1)Oc1ccc2c(c1)Oc1cc(O)ccc1C12OC(=O)c2ccccc12 | ||
| Formula | C26H17NO5 | M.Wt | 423.4 |
| Solubility | DMF: 20 mg/ml,DMSO: 10 mg/ml,Ethanol: 10 mg/ml,Ethanol:PBS (pH 7.2)(1:3): .5 mg/ml | Storage | Store at -20°C; protect from light |
| General tips | Please select the appropriate solvent to prepare the stock solution according to the
solubility of the product in different solvents; once the solution is prepared, please store it in
separate packages to avoid product failure caused by repeated freezing and thawing.Storage method
and period of the stock solution: When stored at -80°C, please use it within 6 months; when stored
at -20°C, please use it within 1 month. To increase solubility, heat the tube to 37°C and then oscillate in an ultrasonic bath for some time. |
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| Shipping Condition | Evaluation sample solution: shipped with blue ice. All other sizes available: with RT, or with Blue Ice upon request. | ||
| Prepare stock solution | |||
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1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 2.3618 mL | 11.8092 mL | 23.6183 mL |
| 5 mM | 472.4 μL | 2.3618 mL | 4.7237 mL |
| 10 mM | 236.2 μL | 1.1809 mL | 2.3618 mL |
Step 1: Enter information below (Recommended: An additional animal making an allowance for loss during the experiment)
g
μL
Step 2: Enter the in vivo formulation (This is only the calculator, not formulation. Please contact us first if there is no in vivo formulation at the solubility Section.)
Calculation results:
Working concentration: mg/ml;
Method for preparing DMSO master liquid: mg drug pre-dissolved in μL DMSO ( Master liquid concentration mg/mL, Please contact us first if the concentration exceeds the DMSO solubility of the batch of drug. )
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next addμL PEG300, mix and clarify, next addμL Tween 80, mix and clarify, next add μL saline, mix and clarify.
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next add μL Corn oil, mix and clarify.
Note: 1. Please make sure the liquid is clear before adding the next solvent.
2. Be sure to add the solvent(s) in order. You must ensure that the solution obtained, in the previous addition, is a clear solution before proceeding to add the next solvent. Physical methods such as vortex, ultrasound or hot water bath can be used to aid dissolving.
3. All of the above co-solvents are available for purchase on the GlpBio website.
Quality Control & SDS
- View current batch:
- Purity: >98.00% Appearance: A solid
- COA (Certificate of Analysis)
- SDS (Safety Data Sheet)
- Datasheet
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