FITC-Dextran (MW 10000) |
Catalog No.GC36048
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FITC-Dextran es una sonda fluorescente para dextrano isotiocianato de fluoresceína (FITC) (Ex=495 nm; Em=525 nm).
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Cas No.: 60842-46-8
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
FITC-Dextran es una sonda fluorescente para dextrano isotiocianato de fluoresceína (FITC) (Ex=495 nm; Em=525 nm). En estudios de permeabilidad celular, FITC-Dextran puede evaluar la permeabilidad de la barrera hematoencefálica (BBB) y la interrupción de la BBB [1,2].
Cuando se analiza el pH lisosomal en células cultivadas utilizando la sonda fluorescente isotiocianato de fluoresceína (FITC)-dextrano junto con una técnica ratiométrica de doble emisión adecuada para citometría de flujo, el dextrano etiquetado con fluorescencia es endocitado y acumulado en el compartimento lisosomal. FITC muestra una variación dependiente del pH en la fluorescencia cuando se analiza en la longitud de onda de emisión máxima y ninguna variación cuando se analiza en el punto isosbéstico, por lo que la proporción puede usarse para determinar el pH lisosomal[2]. El fitc-glucano aumentó la permeabilidad paracelular del epitelio intestinal después de 21 días de incubación[5]. Cuando se examinó su expresión y la captación de FITC-Dextran por diversas preparaciones de DC humanas, en contraste con las Mo-DC inmaduras, la captación de FITC-Dextran por LC no fue inhibida efectivamente por la manosa, un inhibidor de la captación de FITC-Dextran mediada por MMR[7].
Después de 6 horas de ayuno en nuestros ratones C3H/HeOu, las concentraciones plasmáticas de FITC-Dextran de 4 kDa alcanzaron su pico a los 45 minutos después de la administración oral[3]. La fluorescencia de pequeños vasos y penachos neovasculares podría observarse claramente tras la inyección RO de 0,05 ml de 25 mg/ml o 50 mg/ml de FITC-Dextran. No se descubrió daño visible en los tejidos adyacentes al sitio de inyección. El flujo sanguíneo vítreo se redujo gradualmente de P0 a P5 y finalmente desapareció en los ratones OIR P17, como se demostró mediante la perfusión de FITC-Dextran. Las áreas de NV retiniana evaluadas por isolectina B4 eran mayores que las evaluadas por FITC-Dextran, pero las áreas avasculares retinianas eran menores[4]. Cuando se midió la recuperación de fluorescencia después del blanqueo por fotobleaching (FRAP) de dextrano etiquetado con isotiocianato de fluoresceína (FITC) de 10 y 250 kDa (FITC-Dextran) en criptas de colon descendente de rata aisladas, la FRAP de FITC-Dextran de 10 o 250 kDa en los lúmenes de las criptas fue casi completa dentro de 2-3 minutos. En presencia de amilorida (0,1 mM), o en ausencia de Na+, la tasa de captación de FITC-Dextran en los lúmenes de las criptas se redujo en un 70-80 %[6].
References:
[1]: Natarajan R, Northrop N, et,al. Fluorescein Isothiocyanate (FITC)-Dextran Extravasation as a Measure of Blood-Brain Barrier Permeability. Curr Protoc Neurosci. 2017 Apr 10;79:9.58.1-9.58.15. doi: 10.1002/cpns.25. PMID: 28398646; PMCID: PMC5470084.
[2]: Eriksson I, Öllinger K, et,al.Analysis of Lysosomal pH by Flow Cytometry Using FITC-Dextran Loaded Cells. Methods Mol Biol. 2017;1594:179-189. doi: 10.1007/978-1-4939-6934-0_11. PMID: 28456983.
[3]: Woting A, Blaut M. Small Intestinal Permeability and Gut-Transit Time Determined with Low and High Molecular Weight Fluorescein Isothiocyanate-Dextrans in C3H Mice. Nutrients. 2018 May 28;10(6):685. doi: 10.3390/nu10060685. PMID: 29843428; PMCID: PMC6024777.
[4]: Li J, Wu Y, et,al. Retro-orbital injection of FITC-dextran combined with isolectin B4 in assessing the retinal neovascularization defect. BMC Ophthalmol. 2021 May 11;21(1):208. doi: 10.1186/s12886-021-01969-5. PMID: 33975571; PMCID: PMC8112026.
[5]: Sun X, Yang Q, et,al.AMPK improves gut epithelial differentiation and barrier function via regulating Cdx2 expression. Cell Death Differ. 2017 May;24(5):819-831. doi: 10.1038/cdd.2017.14. Epub 2017 Feb 24. PMID: 28234358; PMCID: PMC5423107.
[6]: Thiagarajah JR, Pedley KC, et,al. Evidence of amiloride-sensitive fluid absorption in rat descending colonic crypts from fluorescence recovery of FITC-labelled dextran after photobleaching. J Physiol. 2001 Oct 15;536(Pt 2):541-53. doi: 10.1111/j.1469-7793.2001.0541c.xd. PMID: 11600688; PMCID: PMC2278881.
[7]: Kato M, Neil TK,et,al. Expression of multilectin receptors and comparative FITC-dextran uptake by human dendritic cells. Int Immunol. 2000 Nov;12(11):1511-9. doi: 10.1093/intimm/12.11.1511. PMID: 11058570.
| Experimentos celulares [1]: | |
Líneas celulares | Human fibroblast |
Método de preparación | Aspire el medio de cultivo celular de las células y añada 1 ml de medio que contiene FITC-Dextran, e incube durante 3 días a 37 °C con 5% de CO2 en el aire. |
Condiciones de reacción | 1 ml de FITC-Dextran a 0,1 mg/ml durante 3 días a 37 °C |
Áreas de aplicación | Analizar el pH lisosomal en células cultivadas utilizando la sonda fluorescente isotiocianato de fluoresceína (FITC)-dextran junto con una técnica ratiométrica de emisión dual adecuada para citometría de flujo. El dextrano marcado con fluorescencia es endocitado y se acumula en el compartimento lisosomal. El FITC muestra una variación de fluorescencia dependiente del pH cuando se analiza en la longitud de onda de emisión máxima y ninguna variación cuando se analiza en el punto isosbéstico, por lo que la relación puede utilizarse para determinar el pH lisosomal. |
| Experimentos con animales [2]: | |
Modelos animales | Ratones machos C3H/HeOuJ libres de patógenos específicos |
Método de preparación | Se mantuvieron en ayunas durante 6 h a ratones machos de 12 semanas de edad, y se administró FITC-Dextran de 4 kDa o FITC-Dextran de 70 kDa por vía oral en una dosis única. Tres ratones fueron anestesiados después de 30 min, 1, 1,5, 2 y 8 h; otros tres ratones fueron anestesiados después de 15 y 45 min y se recogió sangre del plexo capilar retrobulbar en tubos heparinizados para análisis de FITC-Dextran de 4 kDa. Se obtuvo plasma después de centrifugar a 2000 g durante 5 min. |
Forma de dosificación | 600 mg/kg de FITC-Dextran de 4 kDa; (100 µL, 5 mg/mL en PBS) FITC-Dextran de 70 kDa durante 30 min-8 h |
Áreas de aplicación | Después de 6 h de ayuno en nuestros ratones C3H/HeOu, las concentraciones plasmáticas de FITC-Dextran de 4 kDa alcanzaron su pico a los 45 min después de la administración oral. |
Referencias: [1]: Eriksson I, Öllinger K, Appelqvist H. Analysis of Lysosomal pH by Flow Cytometry Using FITC-Dextran Loaded Cells. Methods Mol Biol. 2017;1594:179-189. doi: 10.1007/978-1-4939-6934-0_11. PMID: 28456983. [2]: Woting A, Blaut M. Small Intestinal Permeability and Gut-Transit Time Determined with Low and High Molecular Weight Fluorescein Isothiocyanate-Dextrans in C3H Mice. Nutrients. 2018 May 28;10(6):685. doi: 10.3390/nu10060685. PMID: 29843428; PMCID: PMC6024777. | |
| Cas No. | 60842-46-8 | SDF | |
| Canonical SMILES | [FITC-Dextran] | ||
| Formula | M.Wt | 10000.00(Average) | |
| Solubility | Water: 50 mg/mL | Storage | 4°C,sealed storage,away from moisture and light |
| Shipping Condition | Evaluation sample solution: shipped with blue ice. All other sizes available: with RT, or with Blue Ice upon request. | ||
| Prepare stock solution | |||
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1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 100 μL | 500 μL | 1 mL |
| 5 mM | 20 μL | 100 μL | 200 μL |
| 10 mM | 10 μL | 50 μL | 100 μL |
Step 1: Enter information below (Recommended: An additional animal making an allowance for loss during the experiment)
g
μL
Step 2: Enter the in vivo formulation (This is only the calculator, not formulation. Please contact us first if there is no in vivo formulation at the solubility Section.)
Calculation results:
Working concentration: mg/ml;
Method for preparing DMSO master liquid: mg drug pre-dissolved in μL DMSO ( Master liquid concentration mg/mL, Please contact us first if the concentration exceeds the DMSO solubility of the batch of drug. )
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next addμL PEG300, mix and clarify, next addμL Tween 80, mix and clarify, next add μL saline, mix and clarify.
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next add μL Corn oil, mix and clarify.
Note: 1. Please make sure the liquid is clear before adding the next solvent.
2. Be sure to add the solvent(s) in order. You must ensure that the solution obtained, in the previous addition, is a clear solution before proceeding to add the next solvent. Physical methods such as vortex, ultrasound or hot water bath can be used to aid dissolving.
3. All of the above co-solvents are available for purchase on the GlpBio website.
Quality Control & SDS
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- Purity: >98.00% Appearance: A solid
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