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El NAD+ es una coenzima que transfiere iones de hidrógeno y participa en muchas reacciones enzimáticas. Está compuesto por ribosil nicotinamida 5'-difosfato acoplado a 5'-fosfato de adenosina a través de un enlace de pirofosfato[1]. El NAD+ es la forma oxidada de la nicotinamida adenina dinucleótido (NAD), y la forma reducida de NAD es NADH. El nivel intracelular de NAD+/NADH refleja la actividad metabólica y la salud de la célula[2]. El NAD+ es un transportador clave de reacciones redox, desempeñando un papel insustituible en la glucólisis, gluconeogénesis, el ciclo del ácido tricarboxílico y la cadena respiratoria[3]. El NAD+ también es un sustrato de la enzima nuclear poli (ADP-ribosa) polimerasa-1 (PARP-1)[4].
In vitro, el tratamiento de células T CD4+ naïve con NAD+ (100 µM) durante 72 horas indujo a las células T CD4+ naïve a producir una gran cantidad de citoquinas, promovió la diferenciación celular hacia células T auxiliares (Th1, Th2 y Th17), pero impidió que las células ya diferenciadas produjeran citoquinas[5].
In vivo, la administración intravenosa de NAD+ (10, 60 mg/kg) a ratones ART2−/− y de tipo salvaje (WT) redujo el efecto inhibidor de las células T reguladoras CD4+ CD25+ FoxP3+ (células T reg) en ratones WT de manera dependiente de la dosis, pero no tuvo efecto sobre la función de las células T reg en los ratones ART2−/−. También reguló el tamaño y el fenotipo del grupo de células T reg in vivo[6]. La administración intravenosa de NAD+ (10-20 mg/kg) en ratas sometidas a isquemia/reperfusión (I/R) redujo de manera dependiente de la dosis el infarto de miocardio inducido por I/R, disminuyó los niveles de señalización TUNNEL, Box y caspasa-3 clivada, y aumentó los niveles de Bcl-XL[7].
References:
[1] Pietrowska-Borek M, Dobrogojski J, Sobieszczuk-Nowicka E, et al. New insight into plant signaling: extracellular ATP and uncommon nucleotides[J]. Cells, 2020, 9(2): 345.
[2] Belenky P, Bogan K L, Brenner C. NAD+ metabolism in health and disease[J]. Trends in biochemical sciences, 2007, 32(1): 12-19.
[3] Guo C, Huang Q, Wang Y, et al. Therapeutic application of natural products: NAD+ metabolism as potential target[J]. Phytomedicine, 2023, 114: 154768.
[4] Alano C C, Tran A, Tao R, et al. Differences among cell types in NAD+ compartmentalization: a comparison of neurons, astrocytes, and cardiac myocytes[J]. Journal of neuroscience research, 2007, 85(15): 3378-3385.
[5] Tullius S G, Biefer H R C, Li S, et al. NAD+ protects against EAE by regulating CD4+ T-cell differentiation[J]. Nature communications, 2014, 5(1): 5101.
[6] Hubert S, Rissiek B, Klages K, et al. Extracellular NAD+ shapes the Foxp3+ regulatory T cell compartment through the ART2–P2X7 pathway[J]. Journal of Experimental Medicine, 2010, 207(12): 2561-2568.
[7] Zhang Y, Wang B, Fu X, et al. Exogenous NAD+ administration significantly protects against myocardial ischemia/reperfusion injury in rat model[J]. American journal of translational research, 2016, 8(8): 3342.
Protocolo (Protocol)
| Experimentos celulares [1]: | |
Líneas celulares | Células T CD4+ |
Método de preparación | Se aislaron células T CD4+ de los bazos de ratones, se añadió 100 μM de NAD+ al medio de cultivo de las células tratadas y se realizó un análisis de la función y diferenciación celular 72 horas después del tratamiento. |
Condiciones de reacción | 100 μM; 72 horas |
Áreas de aplicación | El NAD+ convierte células T CD4+ naïve en células Th1, Th2 y Th17. Además, el NAD+ induce una robusta producción de citoquinas en células T CD4+ naïve, pero bloquea la producción de citoquinas en células diferenciadas. |
| Experimentos con animales [2]: | |
Modelos animales | Ratones ART2−/− y de tipo salvaje (WT) |
Método de preparación | Los ratones fueron tratados por vía intravenosa (i.v.) con 10 o 60 mg de NAD+ en 100–200 μl de solución PBS ajustada a pH 7.4. 24 horas después, se analizaron suspensiones celulares preparadas de los ganglios linfáticos, el bazo y la sangre mediante citometría de flujo. |
Forma de dosificación | 10 o 60 mg/kg; i.v. |
Áreas de aplicación | El NAD+ exógeno redujo de manera dependiente de la dosis el efecto supresor de las células T reguladoras CD4+ CD25+ FoxP3+ (células T reg) de ratones WT, mientras que no tuvo efecto sobre la función de las células T reg de ratones ART2−/−. El NAD+ exógeno puede modular el tamaño y el fenotipo del grupo de células T reg in vivo. |
Referencias: [1] Tullius S G, Biefer H R C, Li S, et al. NAD+ protects against EAE by regulating CD4+ T-cell differentiation[J]. Nature Communications, 2014, 5(1): 5101. [2] Hubert S, Rissiek B, Klages K, et al. Extracellular NAD+ shapes the Foxp3+ regulatory T cell compartment through the ART2–P2X7 pathway[J]. Journal of Experimental Medicine, 2010, 207(12): 2561-2568. | |
Documentos del producto (Product Documents)
Propiedades químicas (Chemical Properties)
Utilice las soluciones madre en un plazo de 6 meses si se conservan a -80°C, o de 1 mes si se conservan a -20°C.
Para mejorar la solubilidad, caliente el tubo a 37°C y soníquelo durante un periodo adecuado.
Calculadoras (Calculators)Molaridad / Dilución / Peso molecular / Conversión de unidades / Formulación in vivo / Solubilidad
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