Methotrexate |
カタログ番号GC10405
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メトトレキサート（Methotrexate）はジヒドロ葉酸還元酵素(DHFR)の活性を効率良く阻害できる抗葉酸代謝拮抗剤であり、IC50値は約7nMである。
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Cas No.: 59-05-2
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
メトトレキサート（Methotrexate）はジヒドロ葉酸還元酵素(DHFR)の活性を効率良く阻害できる抗葉酸代謝拮抗剤であり、IC50値は約7nMである[1]。葉酸塩は、プリンとピリミジン塩基の生成に必須である為、メトトレキサートはDNAの複製と細胞の増殖に必要なプリンとピリミジンの生物生成を干渉する[2]。メトトレキサートはアデノシンデアミナーゼ欠損症(ADA)をも阻害して、細胞外アデニンジヌクレオチドのレベルを増やせた[3]。メトトレキサートは抗癌、抗リウマチ、抗炎症、免疫調節作用を持っている[4]。
試験管内実験では、メトトレキサート(5 μg/ml)は様々な細胞株に対して、IC50s値は6.05±0.81 nMから>1,000 nMへ、範囲は広い。メトトレキサートがSaos-2 とMCF-7における耐性で、一番強いAGSとHCT-116細胞はメトトレキサートにとても敏感であり、IC50値はそれぞれ6.05±0.81nMと13.56±3.76nMである。 NCI-H23とA549は、メトトレキサートに似たような細胞感受性を示している[5]。メトトレキサート(3ng/ml-1μg/ml)でU-2OS細胞の薬剤耐性を測定し、耐性が細胞なDHFRのレベルの増加に関与していることが分かった。[6]
生体内実験では、関節炎DBA/1Jマウスにメトトレキサート（2-50 mg/kg；皮下注射）を投与すると、用量依存的に疾患の活動性と平均足容積が減少し、平均体重率が上昇した[7]。メトトレキサート(2 mg/kg；腹腔内注射)をラットに投与したことで、抗関節炎の効果を示し、血液毒性の発生を阻止した[8]。
References:
[1]Gurdag S, Khandare J, Stapels S, et al. Activity of dendrimer−methotrexate conjugates on methotrexate-sensitive and-resistant cell lines[J]. Bioconjugate chemistry, 2006, 17(2): 275-283.
[2] Rajagopalan P T R , Zhang Z , Mccourt L ,et al.Interaction of dihydrofolate reductase with methotrexate: Ensemble and single-molecule kinetics[J].Proceedings of the National Academy of Sciences, 2002, 99(21):13481-13486.
[3] Sramek M, Neradil J, Veselska R. Much more than you expected: the non-DHFR-mediated effects of methotrexate[J]. Biochimica et Biophysica Acta (BBA)-General Subjects, 2017, 1861(3): 499-503.
[4] Bedoui Y, Guillot X, Sélambarom J, et al. Methotrexate an old drug with new tricks[J]. International journal of molecular sciences, 2019, 20(20): 5023.
[5] Yoon S A , Choi J R , Kim J O ,et al. Influence of Reduced Folate Carrier and Dihydrofolate Reductase Genes on Methotrexate-Induced Cytotoxicity[J].Cancer Research & Treatment, 2010, 42(3):163-171.
[6]Serra M , Reverter B G , Maurici D ,et al.Analysis of dihydrofolate reductase and reduced folate carrier gene status in relation to methotrexate resistance in osteosarcoma cells.[J].Annals of oncology, 2004.
[7] Singh, Rakesh K.van Haandel, LeonKiptoo, et al . Methotrexate disposition, anti-folate activity and efficacy in the collagen-induced arthritis mouse model[J].European Journal of Pharmacology: An International Journal, 2019, 853.
[8] Banji D , Banji O F , Reddy K , et al. Evaluation of the concomitant use of methotrexate and curcumin on Freund's complete adjuvant-induced arthritis and hematological indices in rats[J]. Indian Journal of Pharmacology, 2011, 43(5):546-550.
| 細胞実験[1]: | |
細胞株 | MCF-7, AGS, A549, NCI-H23, HCT-116とSaos-2細胞株 |
準備方法 | メトトレキサートの細胞毒性は対照の為に、八つの異なる濃度（0.03, 0.1, 0.3, 1, 3, 10, 30と100µg/mL）で繰り返しテストされた。細胞は十分な細胞接着の為に、24時間培養し、全てのマイクロプレートは、メトトレキサートの投与の72時間後に、培養された。 |
反応条件 | 0.03, 0.1, 0.3, 1, 3, 10, 30と100µg/mL；72時間 |
アプリケーション | 細胞株内のIC50s値は6.05±0.81nMから>1,000nMで、範囲がとても広かった。Saos-2とMCF-7細胞はメトトレキサートに対してもっとも耐性があった。それと対照的に、AGSとHCT-116細胞株はメトトレキサートにとても敏感であり、IC50値はそれぞれ6.05±0.81nMと13.56±3.76nMである。NCI-H23とA549細胞はメトトレキサートに対し、似たような感受性を示した。 |
| 動物実験 [2]: | |
動物モデル | 雄のDBA/1Jマウス |
準備方法 | メトトレキサート処理グループは更には四つのサブグループに分けられ、14日目からメトトレキサートを毎週一回、計六回でそれぞれ2, 10, 20, 50mg/kgの用量で皮下投与した。疾患活動スコア、足の体積測定値、そして動物の体重のデータが収集された。 |
投与形態 | 2, 10, 20, or 50mg/kg; s.c.（皮下投与） |
アプリケーション | メトトレキサート処理は、疾患活性をいろいろで、用量依存的に減らした。メトトレキサートで処理したマウスで、足の体積測定値は著しく減らされ、マウスの平均体重は大幅に増えた。 |
References: | |
| Cas No. | 59-05-2 | SDF | |
| Chemical Name | (2S)-2-[[4-[(2,4-diaminopteridin-6-yl)methyl-methylamino]benzoyl]amino]pentanedioic acid | ||
| Canonical SMILES | CN(CC1=CN=C2C(=N1)C(=NC(=N2)N)N)C3=CC=C(C=C3)C(=O)NC(CCC(=O)O)C(=O)O | ||
| Formula | C20H22N8O5 | M.Wt | 454.44 |
| 溶解度 | ≥ 21.55 mg/mL in DMSO | Storage | 4°C, protect from light |
| General tips | Please select the appropriate solvent to prepare the stock solution according to the
solubility of the product in different solvents; once the solution is prepared, please store it in
separate packages to avoid product failure caused by repeated freezing and thawing.Storage method
and period of the stock solution: When stored at -80°C, please use it within 6 months; when stored
at -20°C, please use it within 1 month. To increase solubility, heat the tube to 37°C and then oscillate in an ultrasonic bath for some time. |
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| Shipping Condition | Evaluation sample solution: shipped with blue ice. All other sizes available: with RT, or with Blue Ice upon request. | ||
| Prepare stock solution | |||
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1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 2.2005 mL | 11.0026 mL | 22.0051 mL |
| 5 mM | 440.1 μL | 2.2005 mL | 4.401 mL |
| 10 mM | 220.1 μL | 1.1003 mL | 2.2005 mL |
Step 1: Enter information below (Recommended: An additional animal making an allowance for loss during the experiment)
g
μL
Step 2: Enter the in vivo formulation (This is only the calculator, not formulation. Please contact us first if there is no in vivo formulation at the solubility Section.)
Calculation results:
Working concentration: mg/ml;
Method for preparing DMSO master liquid: mg drug pre-dissolved in μL DMSO ( Master liquid concentration mg/mL, Please contact us first if the concentration exceeds the DMSO solubility of the batch of drug. )
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next addμL PEG300, mix and clarify, next addμL Tween 80, mix and clarify, next add μL saline, mix and clarify.
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next add μL Corn oil, mix and clarify.
Note: 1. Please make sure the liquid is clear before adding the next solvent.
2. Be sure to add the solvent(s) in order. You must ensure that the solution obtained, in the previous addition, is a clear solution before proceeding to add the next solvent. Physical methods such as vortex, ultrasound or hot water bath can be used to aid dissolving.
3. All of the above co-solvents are available for purchase on the GlpBio website.
Quality Control & SDS
- View current batch:
- Purity: >98.00% Appearance: A solid
- COA (Certificate of Analysis)
- SDS (Safety Data Sheet)
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