ABC99 |
Catalog No.GC42669
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ABC99 es un inhibidor irreversible y selectivo a base de N-hydroxyhydantoin (NHH), irreversible y selectivo de la enzima desacilante de Wnt NOTUM
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Cas No.: 2331255-53-7
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
ABC99 es un inhibidor irreversible y selectivo a base de N-hydroxyhydantoin (NHH), irreversible y selectivo de la enzima desacilante de Wnt NOTUM[1]. NOTUM es una hidrolasa de serina secretada que modula negativamente la señalización Wnt/β-catenin al eliminar la fracción esencial del palmitoleato de las proteínas Wnt[2]. ABC99 se suele utilizar en modelos de osteoporosis, cáncer colorrectal y enfermedades neurodegenerativas donde la señalización Wnt es insuficiente[3][4].
In vitro, ABC99 (2µg/mL; 7–14 días) suprimió la diferenciación odontoblástica de las células madre humanas de la papila apical (hSCAPs), redujo la actividad de ALP, bloqueó la formación de nódulos mineralizados y disminuyó los niveles de mRNA de DSPP, DMP1 y ALP [5]. ABC99 (50nM y 500nM; 14 días) revirtió significativamente la inhibición de la diferenciación osteogénica de hPDLSCs por NOTUM humano recombinante, restauró la actividad de ALP y la formación de nódulos de calcio, y aumentó los niveles de proteína/mRNA de Osterix, OCN y Runx2[6].
In vivo, ABC99 (10mg/kg/día; p.o.; 4 semanas) previnió casi completamente la metástasis hepática y la metástasis de los ganglios linfáticos, redujo el peso primario del tumor e inhibió significativamente la proliferación de células Ki67⁺ en ratones con cáncer colorrectal ortotópico[7].
References:
[1] Suciu RM, Cognetta AB 3rd, Potter ZE, Cravatt BF. Selective Irreversible Inhibitors of the Wnt-Deacylating Enzyme NOTUM Developed by Activity-Based Protein Profiling. ACS Med Chem Lett. 2018;9(6):563-568.
[2] Bayle ED, Svensson F, Atkinson BN, et al. Carboxylesterase Notum Is a Druggable Target to Modulate Wnt Signaling. J Med Chem. 2021;64(8):4289-4311.
[3] Zhao Y, Jolly S, Benvegnu S, Jones EY, Fish PV. Small-molecule inhibitors of carboxylesterase Notum. Future Med Chem. 2021;13(11):1001-1015.
[4] Larrick JW, Mendelsohn AR. Roads to the Fountain of Youth? Rejuvenating Intestinal Stem Cells. Rejuvenation Res. 2019;22(4):342-347.
[5] Zhao Q, Ren H, Wang N, Yuan X, Zhao Y, Wen Q. NOTUM plays a bidirectionally modulatory role in the odontoblastic differentiation of human stem cells from the apical papilla through the WNT/β-catenin signaling pathway. Arch Oral Biol. 2024;160:105896.
[6] Yang P, Li C, Kou Y, et al. Notum suppresses the osteogenic differentiation of periodontal ligament stem cells through the Wnt/Beta catenin signaling pathway. Arch Oral Biol. 2021;130:105211.
[7] Tian Y, Wang X, Cramer Z, et al. APC and P53 mutations synergise to create a therapeutic vulnerability to NOTUM inhibition in advanced colorectal cancer. Gut. 2023;72(12):2294-2306.
| Experimentos celulares [1]: | |
Líneas celulares | Células madre humanas de la papila apical (hSCAPs) |
Método de preparación | Las células madre humanas de la papila apical (hSCAP) se recuperaron y se cultivaron en una incubadora de cultivo celular en condiciones de 37°C con 5% de CO2 (v/v). El medio de cultivo se actualizaba cada 3 días. El medio de proliferación normal (PM) contenía α-MEM, 10% de suero bovino fetal y 1% de penicilina. Cuando las células alcanzaron el 80% de confluencia, el medio odontoblástico (OM) contenía α-MEM, 10% de suero bovino fetal, 50 mg/L de ácido L-ascórbico, 5 mmol/L de β-fosfoglicerato de sodio y 10nmol/L dexametasona, se utilizó para inducir la diferenciación odontoblástica. Para regular a la baja el nivel extracelular de NOTUM, se añadió ABC99, un inhibidor de molécula pequeña de NOTUM, al medio OM a 2ug/ml. Las células se recogieron en los días 3, 7 y 14 de inducción odontoblástica. La tinción con fosfatasa alcalina (ALP), la tinción con alizarina roja (ARS) y la qRT-PCR se realizaron de acuerdo con las instrucciones del fabricante. |
Condiciones de reacción | 2µg/mL; 7-14 días |
Áreas de aplicación | ABC99 suprimió la diferenciación odontoblástica de las células madre humanas de la papila apical (hSCAP), redujo la actividad de ALP, bloqueó la formación de nódulos mineralizados y disminuyó los niveles de ARNm de DSPP, DMP1 y ALP. |
| Experimentos con animales [2]: | |
Modelos animales | Ratones C57BL/6J |
Método de preparación | Los ratones C57BL/6J de 8 semanas de edad, libres de patógenos específicos, se mantuvieron en una habitación con aire acondicionado a una temperatura de 23±1℃, una humedad relativa del 50-70 % y un ciclo de luz/oscuridad de 12 horas. Los organoides tumorales APKS se implantaron ortostáticamente en la mucosa colónica de ratones C57BL/6J bajo guía endoscópica para establecer un modelo de cáncer colorrectal in situ. Los ratones fueron tratados con ABC99 (10 mg/kg/día; p.o.) o control de vehículo (aceite de maíz) después de 4 semanas de injerto y crecimiento tumoral. Los ratones son tratados durante el número indicado de semanas (semana 0-4 semanas después de la implantación) (n=7 ratones). El peso del tumor, el número de macrometástasis en el hígado y el número de metástasis de ganglios linfáticos en ratones fueron calificados. Se realizaron imágenes bioluminiscentes (BLI) y análisis de supervivencia de Kaplan-Meier para monitorear la carga tumoral y comparar la supervivencia. |
Forma de dosificación | 10 mg/kg/día; p.o.; 4 semanas |
Áreas de aplicación | ABC99 previnió casi por completo la metástasis hepática y la metástasis de los ganglios linfáticos, redujo el peso del tumor primario en ratones con cáncer colorrectal ortotópico. |
References: | |
| Cas No. | 2331255-53-7 | SDF | |
| Chemical Name | 7-(4-chlorobenzyl)-1,3-dioxohexahydroimidazo[1,5-a]pyrazin-2(3H)-yl-2,3-dihydro-4H-benzo[b][1,4]oxazine-4-carboxylate | ||
| Canonical SMILES | ClC1=CC=C(CN2CC(C(N(OC(N3C(C=CC=C4)=C4OCC3)=O)C5=O)=O)N5CC2)C=C1 | ||
| Formula | C22H21ClN4O5 | M.Wt | 456.9 |
| Solubility | 1mg/mL in Chloroform, 1mg/mL in acetonitrile, 1mg/mL in methyl acetate | Storage | Store at -20°C |
| General tips | Please select the appropriate solvent to prepare the stock solution according to the
solubility of the product in different solvents; once the solution is prepared, please store it in
separate packages to avoid product failure caused by repeated freezing and thawing.Storage method
and period of the stock solution: When stored at -80°C, please use it within 6 months; when stored
at -20°C, please use it within 1 month. To increase solubility, heat the tube to 37°C and then oscillate in an ultrasonic bath for some time. |
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| Shipping Condition | Evaluation sample solution: shipped with blue ice. All other sizes available: with RT, or with Blue Ice upon request. | ||
| Prepare stock solution | |||
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1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 2.1887 mL | 10.9433 mL | 21.8866 mL |
| 5 mM | 437.7 μL | 2.1887 mL | 4.3773 mL |
| 10 mM | 218.9 μL | 1.0943 mL | 2.1887 mL |
Step 1: Enter information below (Recommended: An additional animal making an allowance for loss during the experiment)
g
μL
Step 2: Enter the in vivo formulation (This is only the calculator, not formulation. Please contact us first if there is no in vivo formulation at the solubility Section.)
Calculation results:
Working concentration: mg/ml;
Method for preparing DMSO master liquid: mg drug pre-dissolved in μL DMSO ( Master liquid concentration mg/mL, Please contact us first if the concentration exceeds the DMSO solubility of the batch of drug. )
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next addμL PEG300, mix and clarify, next addμL Tween 80, mix and clarify, next add μL saline, mix and clarify.
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next add μL Corn oil, mix and clarify.
Note: 1. Please make sure the liquid is clear before adding the next solvent.
2. Be sure to add the solvent(s) in order. You must ensure that the solution obtained, in the previous addition, is a clear solution before proceeding to add the next solvent. Physical methods such as vortex, ultrasound or hot water bath can be used to aid dissolving.
3. All of the above co-solvents are available for purchase on the GlpBio website.
Quality Control & SDS
- View current batch:
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