Azoxymethane

Líneas celulares

Método de preparación

El ensayo para la formación de aductos de ADN in vitro inducidos por AOM se basó en un método publicado.Brevemente,los mivrosomas (0.5-2.0 mg/mL) se incubaron con ADN (1 mg/mL) y MOA (200 µM) en un volumen total de 1.0 mL.El tampón de ensayo consistió en 0,1 M de Tris-HCl (pH 7.4), 1 mM EDTA, 20 mM MgCl2, 0.3 M KCl, y 1.5 mM NADPH.Las incubaciones se llevaron a cabo a 37 °C durante 60 min en un baño de agua agitada.Se agregaron 30 nmol adicionales de NADPH después de los primeros 30 min.La reacción se detuvo mediante la dición de 0,5 ml de acetato de amonio 7,5 M helado.Luego se extrajo el ADN como se describió anteriormente para homogenenizar los tejidos.Las incubaciones de control se realizaron sin NADPH.

Condiciones de reacción

Áreas de aplicación

En una base protecia igual,los microsomas hepáyicos fueron mucho más activos que los microsomas SI y de colon en la bioactivación d eAOM dependiente de NADPH y la formación de aductos N7-mG.Los microsomas del hígado(pero no los del SI o el colon) de los ratones LCN mostraron una actividad significativamente menor en la formación de N7-mG en comparación con la de los ratones WT.

Modelos animales

Método de preparación

El día 0,marque y pese cad ratón.Prepara 1 mg/ml(1 µg/µL) MOA de solución de trabajo emPBS,e inyectar a cada ratón por vía intraperitoneal 10 mg/kg(peso corporal) de OMA (por ejemplo,se inyectará a un ratón de 20g con 200 µL de solución de OMA).Luego,a cada ratón se le proporcionó agua potable con un 2,5% de DSS durante 7 días,seguida de agua normal durante 10 dias.Este ciclo de agua que contiene DSS y agua normal se repetirá tres veces,y luego el tratamiento normal del agua permanece en el último lugar hasta el punto final experimental.

Forma de dosificación

Áreas de aplicación

El modelo de CCR(cáncer colorrectal) asociado a la colitis en los ratones se puede hacer mediante el uso de AOM y DSS.El modelo de cáner colorrectal murino inducido por AOM y DSS tiene una dinámica de peso corporal.la administración de DSS pordria causar una pérdida de peso significativa.

References:
[1] Megaraj V, et al. Role of hepatic and intestinal p450 enzymes in the metabolic activation of the colon carcinogen azoxymethane in mice. Chem Res Toxicol. 2014 Apr 21;27(4):656-62.
[2] Sun W, et al. Protocol for colitis-associated colorectal cancer murine model induced by AOM and DSS. STAR Protoc. 2023 Mar 17;4(1):102105.