MQAE (Synonyms: MQAE) |
Catalog No.GC30035
One-Click Copy Product Info
|
MQAE funciona como un sensor fluorescente de enfriamiento de iones de cloruro no ratiométrico (Cl−) que se emplea para medir la concentración de Cl− intracelular ([Cl−]i), con la excitación/emisión de longitud máxima (350/460nm).
Products are for research use only. Not for human use. We do not sell to patients.
Cas No.: 162558-52-3
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
MQAE funciona como un sensor fluorescente de enfriamiento de iones de cloruro no ratiométrico (Cl−) que se emplea para medir la concentración de Cl− intracelular ([Cl−]i), con la excitación/emisión de longitud máxima (350/460nm)[1]. MQAE es adecuado para microscopía de fluorescencia de superficie, microscopía confocal, microscopía de dos fotones, citometría de flujo y otros experimentos de análisis bioquímico[1-2]. La intensidad de fluorescencia disminuye cuando la concentración de MQAE disminuye y aumenta cuando la concentración de MQAE aumenta independientemente de cualquier cambio en [Cl−]i[2]. La distribución intracelular de MQAE no es uniforme y no se ve afectada por los cambios en el volumen celular causados por el estrés osmótico[3]. MQAE puede unirse a estructuras subcelulares desconocidas, y estos MQAE unidos parecen permitir la medición de [Cl−]i en células ciliadas por las vías respiratorias incluso en presencia de cambios en el volumen celular[1,4]. MQAE se puede utilizar para crear una sonda fluorescente para la detección de iones de cloruro mitocondrial[5]. La fluorescencia de la sonda basada en MQAE es insensible al pH en el rango fisiológico de pH y está apagada por iones cloruro, con una constante de extinción de Stern-Volmer de 201M-1 a pH 7.0[5].
References:
[1] Ikeuchi Y, Kogiso H, Hosogi S, et al. Measurement of [Cl?]i unaffected by the cell volume change using MQAE-based two-photon microscopy in airway ciliary cells of mice[J]. The journal of physiological sciences, 2018, 68: 191-199.
[2] Andersson C, Roomans G M. Determination of chloride efflux by X‐ray microanalysis versus MQAE‐fluorescence[J]. Microscopy research and technique, 2002, 59(6): 531-535.
[3] Koncz C, Daugirdas J T. Use of MQAE for measurement of intracellular [Cl?] in cultured aortic smooth muscle cells[J]. American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology, 1994, 267(6): H2114-H2123.
[4] Miyazaki H, Shiozaki A, Niisato N, et al. Physiological significance of hypotonicity-induced regulatory volume decrease: reduction in intracellular Cl? concentration acting as an intracellular signaling[J]. American Journal of Physiology-Renal Physiology, 2007, 292(5): F1411-F1417.
[5] Park S H, Shin I, Kim Y H, et al. Mitochondrial Cl–-selective fluorescent probe for biological applications[J]. Analytical Chemistry, 2020, 92(18): 12116-12119.
Este protocolo solo proporciona una guía y debe modificarse de acuerdo con sus necesidades específicas.
1. Prepare la solución de tinción MQAE:
La solución de trabajo 5-10mM MQAE se prepara en tampón Krebs-hepes (20mM HEPES, 128mM NaCl, 2.5mM KCl, 2.7mM CaCl2, 1mM MgCl2, 16mM glucose; pH 7.4). Después de la configuración, use una membrana de filtro de 0.22μm para filtrar y esterilizar. Por favor, ajuste la concentración de la solución de trabajo MQAE de acuerdo con la situación real y utilícela ahora.
2. Tinción de células de suspensión ( protocolo de placa de 6 pozos)
(1) Para células de suspensión:
Centrifuge la suspensión celular a 1000×g durante 3-5 minutos y aspira cuidadosamente el sobrenadante. Lave las células dos veces con el tampón Krebs-Hepes (5 min por lavado) con centrifugación a 1000×g entre lavados.
(2) Para células adherentes:
Enjuague las células adherentes dos veces con el tampón Krebs-Hepes. Separe las células usando tripsinización, seguida de centrifugación a 1000×g durante 3-5 minutos.
(3) Incubación de tinte:
Vuelva a suspender el gránulo celular en 1mL de solución de trabajo de tinte. Incubar a temperatura ambiente durante 30-60 minutos en la oscuridad (el tiempo de incubación óptimo puede variar según el tipo de célula).
(4) Procesamiento posterior a la incubación:
Centrifuga a 1000×g durante 5 minutos y retira con cuidado el sobrenadante. Lave las células 2-3 veces con PBS (5 minutos por lavado) con centrifugación entre lavados.
(5) Resuspensión y observación:
Resuspensir las células teñidas en medio de cultivo sin suero o PBS. Proceda al exmen microscópico.
3. Tinción de células adherentes:
(1) Preparación del cultivo celular:
Haga crecer las células adherentes en las cubiertas estériles hasta que se alcance la confluencia deseada.
(2) Tratamiento previo a la tinción:
Retire con cuidado el medio de cultivo y coloque la cubierta en una cámara humidificada.
(3) Incubación de tinte:
Aplique 100μL de solución de trabajo de tinte en un borde de la cubierta e inclíelo suavemente para garantizar una cobertura uniforme de la monocapa celular. Incubar a temperatura ambiente durante 30-60 minutos en la oscuridad.
(4) Lavados posteriores a la tinción:
Aspira la solución de tinte y enjuague la cubierta 2-3 veces con PBS (5 minutos por lavado).
4. Análisis microscópico:
Examine las células teñidas utilizando microscopía de fluorescencia o citometría de flujo. MQAE exhibe una excitación/emisión máxina a 350/460nm.
References:
[1] Koncz C, Daugirdas J T. Use of MQAE for measurement of intracellular [Cl?] in cultured aortic smooth muscle cells[J]. American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology, 1994, 267(6): H2114-H2123.
[2] Miyazaki H, Shiozaki A, Niisato N, et al. Physiological significance of hypotonicity-induced regulatory volume decrease: reduction in intracellular Cl? concentration acting as an intracellular signaling[J]. American Journal of Physiology-Renal Physiology, 2007, 292(5): F1411-F1417.
| Cas No. | 162558-52-3 | SDF | |
| Sinónimos | MQAE | ||
| Canonical SMILES | COC1=CC2=CC=C[N+](CC(OCC)=O)=C2C=C1.[Br-] | ||
| Formula | C14H16BrNO3 | M.Wt | 326.19 |
| Solubility | DMSO : ≥ 35 mg/mL (107.30 mM) | Storage | Store at -20°C, protect from light |
| General tips | Please select the appropriate solvent to prepare the stock solution according to the
solubility of the product in different solvents; once the solution is prepared, please store it in
separate packages to avoid product failure caused by repeated freezing and thawing.Storage method
and period of the stock solution: When stored at -80°C, please use it within 6 months; when stored
at -20°C, please use it within 1 month. To increase solubility, heat the tube to 37°C and then oscillate in an ultrasonic bath for some time. |
||
| Shipping Condition | Evaluation sample solution: shipped with blue ice. All other sizes available: with RT, or with Blue Ice upon request. | ||
| Prepare stock solution | |||
|
1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 3.0657 mL | 15.3285 mL | 30.657 mL |
| 5 mM | 613.1 μL | 3.0657 mL | 6.1314 mL |
| 10 mM | 306.6 μL | 1.5328 mL | 3.0657 mL |
Step 1: Enter information below (Recommended: An additional animal making an allowance for loss during the experiment)
g
μL
Step 2: Enter the in vivo formulation (This is only the calculator, not formulation. Please contact us first if there is no in vivo formulation at the solubility Section.)
Calculation results:
Working concentration: mg/ml;
Method for preparing DMSO master liquid: mg drug pre-dissolved in μL DMSO ( Master liquid concentration mg/mL, Please contact us first if the concentration exceeds the DMSO solubility of the batch of drug. )
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next addμL PEG300, mix and clarify, next addμL Tween 80, mix and clarify, next add μL saline, mix and clarify.
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next add μL Corn oil, mix and clarify.
Note: 1. Please make sure the liquid is clear before adding the next solvent.
2. Be sure to add the solvent(s) in order. You must ensure that the solution obtained, in the previous addition, is a clear solution before proceeding to add the next solvent. Physical methods such as vortex, ultrasound or hot water bath can be used to aid dissolving.
3. All of the above co-solvents are available for purchase on the GlpBio website.
Quality Control & SDS
- View current batch:
- Purity: >99.50% Appearance: A solid
- COA (Certificate of Analysis)
- SDS (Safety Data Sheet)
- Datasheet
Average Rating: 5 (Based on Reviews and 18 reference(s) in Google Scholar.)