Filipin Complex (Synonyms: U-5956) |
|
رقم الكتالوجGC18406
|
إن Filipin complex هو بولين متعادل، وله نشاط مضاد للفطريات.
Products are for research use only. Not for human use. We do not sell to patients.
Cas No.: 11078-21-0
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
إن Filipin complex هو بولين متعادل، وله نشاط مضاد للفطريات. وباعتباره مركباً فلورياً، يمكن استخدام معقد الفلبين لتصوير الستيرول في الهياكل البيولوجية الموسومة، حيث تبلغ قيم الإثارة/الانبعاث للمعقدات 338/480 nm. يعد Filipin III هو المكون الرئيسي لمعقد الفلبين المكوّن من أربعة أجزاء. يرتبط تفاعل معقد الفلبين مع الستيرويدات بكل من المجموعة الوظيفية في الموضع 3 والسلسلة الأليفاتية للستيرويد. لم تُظهر المعالجة المسبقة للخلايا بتركيز 1 و5 ميكروغرام/مل من معقد الفلبين لمدة ساعة واحدة قبل الإصابة بفيروس IPNV (متعدد الإصابة MOI=1؛ لمدة ساعة واحدة) ثم تحضينها لمدة 12 ساعة إضافية في وجود العقار أي تأثير على العدوى الفيروسية، كما اتضح من خلال صبغ التألق المناعي لـ VP2/VP3. يمكن لمعقد الفلبين الارتباط بستيرولات مختلفة في المحاليل المائية وأغشية الخلايا الفطرية، لا سيما 24α-ميثيل كوليسترول، و24α-إيثيل كوليسترول، والكوليسترول، مما يُحدث تكوين فجوات غشائية وتسرب محتويات الخلية. كما يمكن لمعقد الفلبين تثبيط نمو الخلايا ونقل الإلكترونات النهائي في الميتوكوندريا في فطر الخميرة.
توفر هذه الخطة دليلا ؤشاديا فقط، يرجي التعديل بما يتناسب مع احتياجاتك الخاصة.
1). تحضير محلول التخزين: وازن المادة الصبلة المبردة في درجة حرارة الغرفة لمدة 20 دقيقة على الأقل.
اطرد الأنبوب مركزياً لتكثيف المسحوق في قاع الأنبوب. أذب معقد الفلبين في ثنائي ميثيل سلفوكسيد اللامائي أو الإيثانول اللامائي على طاولة عمل نظيفة لتحضير محلول تخزين بتركيز 1–10mM.
تنبيه: محلول معقد الفلبين شديد الحساسية للضوء والهواء. يوصى بتقسيم محلول التخزين المُحضّر إلى أحجام صغيرة وملئها بغاز خامل. يُخزن محلول التخزين في الظلام عند -20 درجة مئوية أو -80 درجة مئوية لتجنب تكرار دورات التجميد والإذابة.
(2) تحضير محلول العمل: خفف محلول التخزين باستخدام منظم مناسب (مثل PBS أو HBSS أو منظمات فسيولوجية أخرى) لتحضير محلول عمل بتركيز يتراوح بين 1–250μM.
ملاحظة: يرجى ضبط تركيز محلول العمل وفقاً للظروف الفعلية وتحضيره طازجاً في حينه.
2. صبغ الخلايا:
(1) تغسل الخلايا باستخدام PBS من مرتين إلى ثلاث مرات بعد سحب وسط الزراعة.
(2) تثبت الخلايا باستخدام 4% بارافورمالدهيد في درجة حرارة الغرفة لمدة 15–20 دقيقة.
(3) بعد التثبيت، يستخدم PBS للغسل من 2-3 مرات، لمدة 5 دقائق في كل مرة.
(4) يضاف محلول العمل لمعقد الفلبين إلى فتحة الزراعة لتغطية الخلايا بالكامل، وتحضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 30 دقيقة إلى ساعتين بعيدا عن الضوء. يختلف وقت التحضين الأمثل باختلاف نوع الخلايا، لذا يرجى ضبطه وفقاً للاحتياجات التجريبية المحددة وتأثير الصبغ.
(5) بعد انتهاء فترة التحضين، يسحب محلول الصبغ العملي ويتم التخلص منه، وتغسل الخلايا بـ PBS من 2–3 مرات.
3. صبغ قطاعات الأنسجة (القطاعات المجمدة):
(1) توضع القطاعات في مكان جيد التهوية وتجفف في درجة حرارة الغرفة لمدة 20–30 دقيقة.
(2) تُغمر الشرائح في 4% بارافورمالدهيد وتُثبت في درجة حرارة الغرفة لمدة 30 دقيقة.
(3) يُسحب محلول التثبيت بحرص ويتم التخلص منه، وتُنظف القطاعات باستخدام PBS من 2–3 مرات، لمدة 5 دقائق في كل مرة.
(4) يقطر محلول عمل معقد الفلبين على القطاعات لتغطيتها تماما، وتحضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 30 دقيقة إلى ساعتين بعيدا عن الضوء. يعدل نظام الصبغ وفقاً للحالة الفعلية.
(5) بعد انتهاء فترة التحضين، يسحب محلول الصبغ العملي ويتم التخلص منه، وتغسل الأنسجة بـ PBS من 2–3 مرات.
(6) إذا كان من الضروري تغطية القطاعات وإحكام إغلاقها، يوصى باستخدام وسط تثبيت فلوري مائي.
4. الكشف المجهري:
يبلغ الطول الموجي الأقصى للإثارة/الانبعاث لمعقد الفلبين 380/430nm.
احتياطات:
1. يتمتع معقد الفلبين بألفة عالية جدا للارتباط بالكوليسترول، لكنه يتسم بخاصية التبييض الضوئي السريع. يوصى بالملاحظة الفورية بعد الصبغ.
2. ينتج معقد الفلبين فقط تألقاً طبيعياً معتدلا تحت الإثارة بالأشعة فوق البنفسجية، وتكون شدة التألق أضعف مقارنةً بالمسبارات الفلورية الأخرى. ينبغي مراعاة ذلك عند استخدام المجهر البؤري للملاحظة.
3. تواجه جميع الصبغات الفلورية مشكلات التخامد، لذا يُرجى محاولة تجنب التعرض للضوء قدر الإمكان لإبطاء تخامد التألق.
4. حفاظاً على سلامتك وصحتك، يرجى ارتداء معطف المختبر والتفازات التي تستخدم لمرة واحدة أثناء العمل.
| Cas No. | 11078-21-0 | SDF | |
| المرادفات | U-5956 | ||
| Canonical SMILES | N/A | ||
| Formula | C35H58O11 (for Filipin III) | M.Wt | 654.8 |
| الذوبان | DMSO : ≥ 100 mg/mL; Ethanol : 10 mg/mL (ultrasonic and warming and heat to 60°C) | Storage | Store at -20°C,protect from light |
| Shipping Condition | Evaluation sample solution: shipped with blue ice. All other sizes available: with RT, or with Blue Ice upon request. | ||
| Prepare stock solution | |||
|
1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 1.5272 mL | 7.6359 mL | 15.2718 mL |
| 5 mM | 305.4 μL | 1.5272 mL | 3.0544 mL |
| 10 mM | 152.7 μL | 763.6 μL | 1.5272 mL |
Step 1: Enter information below (Recommended: An additional animal making an allowance for loss during the experiment)
Step 2: Enter the in vivo formulation (This is only the calculator, not formulation. Please contact us first if there is no in vivo formulation at the solubility Section.)
Calculation results:
Working concentration: mg/ml;
Method for preparing DMSO master liquid: mg drug pre-dissolved in μL DMSO ( Master liquid concentration mg/mL, Please contact us first if the concentration exceeds the DMSO solubility of the batch of drug. )
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next addμL PEG300, mix and clarify, next addμL Tween 80, mix and clarify, next add μL saline, mix and clarify.
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next add μL Corn oil, mix and clarify.
Note: 1. Please make sure the liquid is clear before adding the next solvent.
2. Be sure to add the solvent(s) in order. You must ensure that the solution obtained, in the previous addition, is a clear solution before proceeding to add the next solvent. Physical methods such as vortex, ultrasound or hot water bath can be used to aid dissolving.
3. All of the above co-solvents are available for purchase on the GlpBio website.
Quality Control & SDS
- View current batch:
- Purity: >98.00% Appearance: A solid
- COA (Certificate of Analysis)
- SDS (Safety Data Sheet)
- Datasheet
Average Rating: 5 (Based on Reviews and 5 reference(s) in Google Scholar.)