Filipin Complex (Synonyms: U-5956) |
Catalog No.GC18406
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Filipin Complex est un polyène neutre doté d'une activité antifongique.
Products are for research use only. Not for human use. We do not sell to patients.
Cas No.: 11078-21-0
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
Filipin Complex est un polyène neutre doté d'une activité antifongique. En tant que composé fluorescent, Filipin complex permet d'imagerie des stérols au sein de structures biologiques significatives; ses longueurs d'onde excitation / d'émission sont 338/480nm[1，4]. Filipin III constitue le composant principal du complexe de filipine, qui comprend quatre fractions[3] . L'interaction entre le complexe de filipine et les stéroïdes dépend à la fois du groupement fonctionnel en position 3, de la chaîne aliphatique du stéroïde[7].
Un prétraitement des cellules pendant 1h avec 1 et 5µg/mL de Filipin Complex avant l'infection par IPNV (MOI=1; 1h), suivi d'une incuabtion supplémentaire de 12h en présence du produit, n'a pas montré d'effet sur l'infection virale, d'après les résultats du marquage immunofluorescent de VP2-VP3[2] . Filipin Complex connecte de divers stérols en solution aqueuse ainsi qu'aux membranes des cellules fongiques, notamment 24α-méthyl cholestérol, 24α-éthyl cholestérol, et le cholestérol. Il provoque alors l'apparition de fosses membranaires et une fuite du contenu de cellule[5] . Filipin Complex inhibe par ailleurs la croissance des celluels, le rapport d'électrons terminal mitochondrial chez Saccharomyces cerevisiae[6] .
Ce protocole est fourni uniquement à titre indicatif; adaptez-le selon vos besoins expérimentaux spécifiques.
1.Préparation de la solution de coloration
(1)Préparation de la solution stock Laisser l'échantillon solide cryoconservé s'équilibrer à température ambiante pendant au moins 20min. Centrifuger le tube pour rassembler la poudre au fond du tube. Dissoudre Filipin Complex dans DMSO anhydre ou de l'éthanol anhydre, sous hotte de laboratoire propre, pour obtenir une solution stock à 1-10mM.
Attention : la solution de Filipin Complex est très sensible à la lumière et à l'air. Il est conseillé de répartir la solution stock préparée en petits aliquots et de les recouvrir d'un gaz inerte. Conserver les aliquots à l'abri de la lumière à -20°C ou -80°C, pour éviter des cycles répétés de congélation-décongélation.
(2)Préparation de la solution de travail : Diluer la solution-stock dans un tampon adapté (PBS, HBSS ou autre tampon physiologique) pour obtenir une solution de travail à 1-250μM.
Remarque : Ajuster la concentration de la solution de travail en fonction de vos conditions expérimentales et la préparer au moment de l'emploi.
2.Coloration cellulaire
(1)Après retrait du milieu de culture, laver les cellules 2-3 fois avec PBS.
(2)Fixer les cellules avec du paraformaldéhyde à 4% à température ambiante pendant 15-20 min.
(3)Après fixation, rincer 2-3 fois avec PBS, 5min à chaque lavage.
(4)Ajouter la solution de travail de Filipin Complex dans le puits de culture, de manière à recouvrir complètement les cellules. Incuber à température ambiante pendant 30 min à 2h, à l'abri de la lumière. Le temps d'incubation optimale varie selon les types cellulaires; adaptez-le selon vos besoins expérimentaux et le rendu de coloration observé.
(5)A la fin de l'incubation, aspirer et éliminer la solution de coloration, puis laver les cellules 2-3 fois avec PBS.
(6)Si vous devez monter les coupes, il est recommandé d'utiliser un milieu de montage fluorescent à base aqueuse.
4.Détection au microscope
Les longueurs d'onde maximales d'excitation/ d'émission de Filipin Complex sont 380/430nm.
Précautions :
1.Filipin Complex présente une très grande affinité pour le cholestérol, mais il est sujet à un photoblanchiment rapide. Il est conseillé de réaliser l'observation immédiatement après la coloration.
2.Sous excitation UV, Filipin Complex n'émet qu'une fluorescence naturelle modérée, son intensité est inférieure à celle d'autres sondes fluorescentes. Ce point est à prendre en compte pour les observations en microscopie confocale.
3.Tous les colorants fluorescents sont sujets au phénomène de désactivation de fluorescence. Evitez au maximum l'exposition à la lumière pour ralentir ce phénomène.
4.Pour votre sécurité et votre santé, portez une blouse de laboratoire et des gants jetables lors de l'opération.
| Cas No. | 11078-21-0 | SDF | |
| Synonymes | U-5956 | ||
| Canonical SMILES | N/A | ||
| Formula | C35H58O11 (for Filipin III) | M.Wt | 654.8 |
| Solubility | DMSO : ≥ 100 mg/mL; Ethanol : 10 mg/mL (ultrasonic and warming and heat to 60°C) | Storage | Store at -20°C,protect from light |
| Shipping Condition | Evaluation sample solution: shipped with blue ice. All other sizes available: with RT, or with Blue Ice upon request. | ||
| Prepare stock solution | |||
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1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 1.5272 mL | 7.6359 mL | 15.2718 mL |
| 5 mM | 305.4 μL | 1.5272 mL | 3.0544 mL |
| 10 mM | 152.7 μL | 763.6 μL | 1.5272 mL |
Step 1: Enter information below (Recommended: An additional animal making an allowance for loss during the experiment)
g
μL
Step 2: Enter the in vivo formulation (This is only the calculator, not formulation. Please contact us first if there is no in vivo formulation at the solubility Section.)
Calculation results:
Working concentration: mg/ml;
Method for preparing DMSO master liquid: mg drug pre-dissolved in μL DMSO ( Master liquid concentration mg/mL, Please contact us first if the concentration exceeds the DMSO solubility of the batch of drug. )
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next addμL PEG300, mix and clarify, next addμL Tween 80, mix and clarify, next add μL saline, mix and clarify.
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next add μL Corn oil, mix and clarify.
Note: 1. Please make sure the liquid is clear before adding the next solvent.
2. Be sure to add the solvent(s) in order. You must ensure that the solution obtained, in the previous addition, is a clear solution before proceeding to add the next solvent. Physical methods such as vortex, ultrasound or hot water bath can be used to aid dissolving.
3. All of the above co-solvents are available for purchase on the GlpBio website.
Quality Control & SDS
- View current batch:
- Purity: >98.00% Appearance: A solid
- COA (Certificate of Analysis)
- SDS (Safety Data Sheet)
- Datasheet
Average Rating: 5 (Based on Reviews and 5 reference(s) in Google Scholar.)