Filipin Complex (Synonyms: U-5956) |
Katalog-Nr.GC18406
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Filipin Complex ist ein neutrales Polyen mit antimykotischer Wirkung.
Products are for research use only. Not for human use. We do not sell to patients.
Cas No.: 11078-21-0
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
Filipin Complex ist ein neutrales Polyen mit antimykotischer Wirkung. Als fluoreszierende Substanz eignet sich Filipin complex zur Sterol-Bildgebung in markierten biologischen Strukturen. Die Anregungs- und Emissionswerte von Filipin Complex betrugen 338/480nm[1，4]. Filipin III ist der Hauptbestandteil von Filipin complex. Filipin complex besteht aus 4 Komponenten[3]. Die Wechselwirkung von Filipin complex mit Steroiden hängt sowohl von der funktionellen Gruppe an der 3-Position als auch von der aliphatischen Kette des Steroids ab[7].
Die Zellen wurden vor der IPNV-Infektion(MOI=1; 1 Stunde) 1 Stunde lang mit 1 and 5µg/mL Filipin Complex vorbehandelt. Dann wurden die Zellen weitere 12 Stunden in Gegenwart des Wirkstoffs inkubiert. Die Immunfluoreszenz-Färbung von VP2/VP3 zeigte: Die Behandlung hatte keinen Einfluss auf die Virusinfektion[2]. Filipin Complex kann verschiedene Sterole in wässrigen Lösungen und pilzlichen Zellmembranen binden, besonders 24α-Methylcholesterin, 24α-Ethylcholesterin und Cholesterin. Dadurch entstehen Membrangruben und Zellinhalte treten aus[5]. Filipin Complex hemmt das Zellwachstum und den mitochondrialen terminalen Elektronen-Transport bei Saccharomyces cerevisiae[6].
Dieser Plan dient nur als Richtlinie. Bitte entsprechend den Bedürfnissen ändern.
1.Herstellung der Färbelösung
(1)Herstellung der Stammlösung: den kryogenen Festkörper mindesten 20 Minuten auf Raumtemperatur kommen lassen. Das Röhrchen zentrifugieren, damit sich das Pulver am Boden sammelt. Filipin Complex in einer Reinraumwerkbank in wasserfreiem DMSO oder wasserfreiem Ethanol lösen. So erhält man eine Stammlösung mit einer Konzentration von 1-10mM.
Hinweis: Die Lösung von Filipin Complex ist sehr licht- und luftempfindlich. Bitte die hergestellte Stammlösung auf kleine Potionen aufteilen und mit Inertgas überschichten. Die Stammlösung dunkel bei -20℃ oder -80℃ lagern. Wiederholtes Einfrieren und Auftauen vermeiden.
(2)Herstellung der Arbeitslösung: Die Stammlösung mit einem geeigneten Puffer verdünnen(zum Beispiel, PBS, HBSS oder einem anderen physiologischen Puffer). Die Arbeitlösung erreicht eine Konzentration von 1-250μM.
Hinweis: Bitte die Konzentration der Arbeitslösung entsprechend den tatsächlichen Bedingungen ändern. Die Arbeitslösung unmittelbar vor Gebrauch zubereiten.
2.Zellfärbung
(1)Das Kulturmedium absaugen und dann die Zellen 2 bis 3 Mal mit PBS waschen.
(2)Die Zellen mit 4% Paraformaldehyd bei Raumtemperatur für 15-20 Minuten fixieren.
(3)Nach der Fixierung 2 bis 3 Mal mit PBS waschen, jeweils 5 Minuten.
(4)Die Arbeitslösung von Filipin Complex in die Kulturschale geben. Die Zellen vollständig bedecken und 30 Minuten bis 2 Stunden lang bei Raumtemperatur im Dunkeln inkubieren. Die optimale Inkubationszeit unterscheidet sich je nach Zelltyp. Bitte die Inkubationszeit entsprechend den experimentellen Anforderungen und dem Färbe-Ergebnis ändern.
(5)Nach der Inkubation die Färbelösung absaugen und entsorgen. Die Zellen 2 bis 3 Mal mit PBS waschen.
3.Färbung von Gewebeschnitten(Gefrierschnitte)
(1)Die Schnitte an einen belüfteten Ort legen und bei Raumtemperatur 20-30 Minuten lang trocknen.
(2)Die Schnitte in 4% Paraformaldehyd eintauchen und bei Raumtemperatur 30 Minuten lang fixieren.
(3)Die Fixierlösung vorsichtig absaugen und entsorgen. Die Schnitte 2 bis 3 Mal mit PBS waschen, jeweils 5 Minuten.
(4)Die Arbeitslösung von Filipin Complex auf die Schnitte tropfen. Die Schnitte vollständig bedecken und bei Raumtemperatur 30 Minuten bis 2 Stunden lang im Dunkeln inkubieren.
(5)Nach der Inkubation die Färbelösung absaugen und entsorgen. Die Schnitte 2 bis 3 Mal mit PBS waschen.
(6)Falls man die Schnitte eindecken möchte, wird ein Wasser-basiertes fluoreszierendes Eindeckmittel empfohlen.
4.Mikroskopische Analyse: Die maximale Anregungs-/Emissionswellenlänge von Filipin Complex liegt bei 380/430nm.
Vorsichtsmaßnahmen:
(1)Filipin Complex bindet Cholesterin mit einer sehr hohen Affinität. Allerdings tritt schnell Photobleichen auf. Bitte die Proben unmittelbar nach der Färbung beobachten.
(2)Filipin Complex zeigt nur maßige natürliche Fluoreszenz bei UV-Anregung. Seine Fluoreszenz-Intensität ist geringer als bei anderen fluoreszierenden Sonden. Das ist bei Analysen mit einem Konfokalmikroskop zu beachten.
(3)Fluoreszenzfarbstoffe weisen Probleme mit dem Quenching auf. Bitte die Proben möglichst vor Licht Schützen, um das Quenching zu verlangsamen.
(4)Bei der Arbeit bitte Laborkittel und Einweghandschuhe tragen, um Ihre Sicherheit und Gesundheit zu schützen.
| Cas No. | 11078-21-0 | SDF | |
| Überlieferungen | U-5956 | ||
| Canonical SMILES | N/A | ||
| Formula | C35H58O11 (for Filipin III) | M.Wt | 654.8 |
| Löslichkeit | DMSO : ≥ 100 mg/mL; Ethanol : 10 mg/mL (ultrasonic and warming and heat to 60°C) | Storage | Store at -20°C,protect from light |
| Shipping Condition | Evaluation sample solution: shipped with blue ice. All other sizes available: with RT, or with Blue Ice upon request. | ||
| Prepare stock solution | |||
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1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 1.5272 mL | 7.6359 mL | 15.2718 mL |
| 5 mM | 305.4 μL | 1.5272 mL | 3.0544 mL |
| 10 mM | 152.7 μL | 763.6 μL | 1.5272 mL |
Step 1: Enter information below (Recommended: An additional animal making an allowance for loss during the experiment)
g
μL
Step 2: Enter the in vivo formulation (This is only the calculator, not formulation. Please contact us first if there is no in vivo formulation at the solubility Section.)
Calculation results:
Working concentration: mg/ml;
Method for preparing DMSO master liquid: mg drug pre-dissolved in μL DMSO ( Master liquid concentration mg/mL, Please contact us first if the concentration exceeds the DMSO solubility of the batch of drug. )
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next addμL PEG300, mix and clarify, next addμL Tween 80, mix and clarify, next add μL saline, mix and clarify.
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next add μL Corn oil, mix and clarify.
Note: 1. Please make sure the liquid is clear before adding the next solvent.
2. Be sure to add the solvent(s) in order. You must ensure that the solution obtained, in the previous addition, is a clear solution before proceeding to add the next solvent. Physical methods such as vortex, ultrasound or hot water bath can be used to aid dissolving.
3. All of the above co-solvents are available for purchase on the GlpBio website.
Quality Control & SDS
- View current batch:
- Purity: >98.00% Appearance: A solid
- COA (Certificate of Analysis)
- SDS (Safety Data Sheet)
- Datasheet
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