Bafilomycin A1 (Synonyms: NSC 381866) |
| Catalog No.GC17597 |
Bafilomycin A1, un antibiotique macrolide isolé de l'espèce Streptomyces, est un inhibiteur de l'H ATPase vacuolaire (V-ATPase).
Products are for research use only. Not for human use. We do not sell to patients.
Cas No.: 88899-55-2
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
Bafilomycin A1, un antibiotique macrolide isolé de l'espèce Streptomyces, est un inhibiteur de l'H ATPase vacuolaire (V-ATPase). Bafilomycin A1 a été utilisé pour étudier l'autophagie en tant qu'inhibiteur de la fusion des autophagosomes-lysosomes et en tant qu'inhibiteur de la dégradation lysosomale. Il se lie à la sous-unité c du secteur V0 du complexe V-ATPase et inhibe la translocation des H+, ce qui entraîne une accumulation de H+ dans le cytoplasme des cellules traitées. Bafilomycin A1 inhibe la croissance cellulaire et conduit à l'apoptose et à la différenciation. Ces effets anticancéreux de Bafilomycin A1 sont considérés comme étant attribuables à l'acidose intracellulaire causée par l'inhibition de la V-ATPase.
Une étude in vitro de Bafilomycin A1 a indiqué que Bafilomycin A1 inhibe préférentiellement la croissance in vitro des cellules de leucémie lymphoblastique aiguë (LLA) à cellules B pédiatriques. Diverses lignées cellulaires de leucémie, y compris 697, Nalm-6, RS4;11, NB4, HL-60, K562 et BV173 représentant la LLA-B (697, Nalm-6, RS4;11), la leucémie myéloïde aiguë (NB4, HL-60) et la leucémie myéloïde chronique (K562, BV173), ont été utilisées pour étudier l'effet de Bafilomycin A1. Les cellules ont été cultivées en présence de concentrations croissantes de Bafilomycin A1 (0 nM, 0,5 nM, 1 nM). La prolifération cellulaire a été mesurée par un test MTT. Les résultats ont montré que Bafilomycin A1 est fréquemment utilisé comme inhibiteur pour bloquer la fusion des autophagosomes-lysosomes, ou pour inhiber l'activité lysosomale à des doses élevées (0,1–1 μM). Cependant, une faible concentration de Bafilomycin A1 (1 nM) peut inactiver efficacement et spécifiquement l'autophagie et activer l'apoptose à de multiples cibles dans les cellules de LLA-B pédiatrique.
Une étude in vivo a démontré que Bafilomycin A1 peut prolonger la survie des souris atteintes de LLA-B avancée traitées par Bafilomycin A1 par rapport aux souris témoins. Le nombre de globules rouges, la concentration d'hémoglobine et le nombre de plaquettes dans le groupe modèle de LLA-B étaient extrêmement réduits, cependant ils étaient normalisés dans le groupe traité par Bafilomycin A1. Les souris du groupe modèle de LLA-B présentaient une hépatosplénomégalie sévère par rapport au groupe témoin. Cependant, la taille et le poids des foies et des rates dans le groupe traité par Bafilomycin A1 étaient normalisés par rapport à ceux du groupe modèle de la maladie. Les résultats ont montré que Bafilomycin A1 inhibe de manière spectaculaire l'engraftment des cellules de LLA-B pédiatrique en ciblant les cellules leucémiques in vivo.
References:
[1]. Yamamoto A, et al. Bafilomycin A1 prevents maturation of autophagic vacuoles by inhibiting fusion between autophagosomes and lysosomes in rat hepatoma cell line, H-4-II-E cells. Cell Struct Funct. 1998;23(1):33–42.
[2] Bowman EJ, et al. The bafilomycin/concanamycin binding site in subunit c of the V-ATPases from Neurospora crassa and Saccharomyces cerevisiae. J Biol Chem. 2004;279(32):33131–33138.
[3]. Yuan N, et al. Bafilomycin A1 targets both autophagy and apoptosis pathways in pediatric B-cell acute lymphoblastic leukemia. Haematologica. 2015 Mar;100(3):345-56.
| Expériences cellulaires [1,2]: | |
Lignées cellulaires | Eosinophiles |
Méthode de préparation | Les éosinophiles circulants ont été purifiés à partir de donneurs avec des éosinophiles >35 par μL de sang. Des préparations d'éosinophiles avec une pureté >98% et une viabilité ~98% ont été utilisées. |
Conditions de réaction | Les éosinophiles ont été cultivés à 1 × 10^6/mL dans un milieu complet (RPMI 1640 plus 10% de sérum bovin fœtal) avec IL3 (2 ng/mL) ou IL5 (2 ng/mL), les deux cytokines provenant de BD Biosciences pendant 20 h, puis lavés et cultivés avec un milieu complet (sans IL3 ni IL5) sur des immunoglobulines-G (HA-IgG ou IgG) agrégées par la chaleur ou sans IgG comme décrit précédemment. |
Domaines d'application | Bafilomycin-A1 pourrait être utilisé pour montrer l'impact de la formation d'autophagolysosome sur la cytolyse des éosinophiles. Les éosinophiles primés avec IL3 et IL5 ont été traités avec bafilomycin-A1 avant l'interaction avec IgG, puis la cytolyse a été mesurée en utilisant le rhodamine-110 (R110). Le traitement avec bafilomycin-A1 a augmenté la lyse des éosinophiles primés avec IL3 et IL5 de 50% et 100%, respectivement, ce qui suggère que la formation d'autophagolysosome protège contre la cytolyse pour les éosinophiles primés avec IL3 et IL5. |
| Expériences animales [3]: | |
Modèles animaux | Souris Lck-mTOR + CLP, souris WT + CLP, souris Lck-TSC1 |
Méthode de préparation | Les souris TSC1loxp/loxp et mTORloxp/loxp ont été croisées avec des souris Lck-Cre (expression de Cre sous le contrôle de la tyrosine kinase spécifique des lymphocytes, Lck) pour obtenir la génération F1 Lck-Cre/− et Lck-Cre/− respectivement. Nous avons croisé les souris de la génération F1 dans chaque groupe et obtenu des souris de la génération F2 Lck-Cre: mTORloxp/loxp et Lck-Cre;TSC1loxp/loxp. Les compagnons de portée sans Lck-Cre ont servi de contrôles. Ensuite, les souris ont été anesthésiées, et l'abdomen a été ouvert chirurgicalement et le cæcum a été ligaturé à mi-chemin entre le pôle distal et la base. Le moignon cæcal a été perforé une fois avec une aiguille de calibre 22. Le cæcum a été remis en place et l'abdomen a été refermé. 1 mL de solution saline a été administré par voie sous-cutanée à chaque animal pour la réanimation liquidienne. Les animaux du groupe témoin ont subi la même procédure chirurgicale sans ligature ni perforation. Le Bafilomycin A1 a été administré par voie intrapéritonéale 1 h après l'opération CLP. |
Forme de dosage | 1 mg/kg |
Domaines d'application | Le Bafilomycin A1 pourrait bloquer spécifiquement la fusion des autophagosomes et des lysosomes et atténuer les effets protecteurs de la délétion de mTOR contre l'apoptose des cellules T CD4+. Chez les souris Lck-mTOR + CLP traitées avec le Bafilomycin A1, le taux d'apoptose des cellules T CD4+ était plus élevé par rapport aux souris n'ayant pas reçu de Bafilomycin A1 et plus faible par rapport aux souris du groupe WT + CLP + Bafilomycin A1. |
Références : [1]. Esnault S, et al. IL-3 up-regulates and activates human eosinophil CD32 and αMβ2 integrin causing degranulation. Clin Exp Allergy. 2017 Apr;47(4):488-498. [2]. Esnault S, et al. Autophagy Protects against Eosinophil Cytolysis and Release of DNA. Cells. 2022 Jun 2;11(11):1821. [3]. Wang H, et al. mTOR deletion ameliorates CD4 + T cell apoptosis during sepsis by improving autophagosome-lysosome fusion. Apoptosis. 2022 Jun;27(5-6):401-408. | |
| Cas No. | 88899-55-2 | SDF | |
| Synonymes | NSC 381866 | ||
| Chemical Name | (3Z,5E,7R,8S,9S,11E,13E,15S,16R)-16-[(2S,3R,4S)-4-[(2R,4R,5S,6R)-2,4-dihydroxy-5-methyl-6-propan-2-yloxan-2-yl]-3-hydroxypentan-2-yl]-8-hydroxy-3,15-dimethoxy-5,7,9,11-tetramethyl-1-oxacyclohexadeca-3,5,11,13-tetraen-2-one | ||
| Canonical SMILES | CC1CC(=CC=CC(C(OC(=O)C(=CC(=CC(C1O)C)C)OC)C(C)C(C(C)C2(CC(C(C(O2)C(C)C)C)O)O)O)OC)C | ||
| Formula | C35H58O9 | M.Wt | 622.84 |
| Solubility | 5 mg/ml in DMSO or in menthanol | Storage | Desiccate at -20°C, protect from light |
| General tips | Please select the appropriate solvent to prepare the stock solution according to the
solubility of the product in different solvents; once the solution is prepared, please store it in
separate packages to avoid product failure caused by repeated freezing and thawing.Storage method
and period of the stock solution: When stored at -80°C, please use it within 6 months; when stored
at -20°C, please use it within 1 month. To increase solubility, heat the tube to 37°C and then oscillate in an ultrasonic bath for some time. |
||
| Shipping Condition | Evaluation sample solution: shipped with blue ice. All other sizes available: with RT, or with Blue Ice upon request. | ||
| Prepare stock solution | |||
|
1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 1.6055 mL | 8.0277 mL | 16.0555 mL |
| 5 mM | 0.3211 mL | 1.6055 mL | 3.2111 mL |
| 10 mM | 0.1606 mL | 0.8028 mL | 1.6055 mL |
Step 1: Enter information below (Recommended: An additional animal making an allowance for loss during the experiment)
g
μL
Step 2: Enter the in vivo formulation (This is only the calculator, not formulation. Please contact us first if there is no in vivo formulation at the solubility Section.)
Calculation results:
Working concentration: mg/ml;
Method for preparing DMSO master liquid: mg drug pre-dissolved in μL DMSO ( Master liquid concentration mg/mL, Please contact us first if the concentration exceeds the DMSO solubility of the batch of drug. )
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next addμL PEG300, mix and clarify, next addμL Tween 80, mix and clarify, next add μL ddH2O, mix and clarify.
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next add μL Corn oil, mix and clarify.
Note: 1. Please make sure the liquid is clear before adding the next solvent.
2. Be sure to add the solvent(s) in order. You must ensure that the solution obtained, in the previous addition, is a clear solution before proceeding to add the next solvent. Physical methods such as vortex, ultrasound or hot water bath can be used to aid dissolving.
3. All of the above co-solvents are available for purchase on the GlpBio website.
Quality Control & SDS
- View current batch:
- Purity: >95.00%
- COA (Certificate Of Analysis)
- SDS (Safety Data Sheet)
- Datasheet
-
Related Biological Data
Autophagy is activated in GLY-treated TM3 cells. (A) Cells were incubated with 1 mM GLY for 24 h and then the protein levels of LC3-Ⅱ and ATG5 were determined by immunoblotting (n = 3). (B) Cells were pretreated with BA for 4 h and then treated with GLY for 24 h to detect the protein levels of LC3-Ⅱ (n = 3).
Cells were pretreated with BA for 4 h and then treated with GLY for 24 h to detect the protein levels of LC3-Ⅱ (n = 3).
Science of The Total Environment (2024): 169927. PMID: 38199345 IF: 9.8003 -
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Mitophagy is activated in low-dose GLY-treated TM3 cells.Cells were pretreated with 25 nM BA for 4 h, and then incubated with 10 μM GLY for another 24 h to analyze the protein levels of HSP60, COX IV and LC3.
Cells were pretreated with 25 nM BA for 4 h, and then incubated with 10 μM GLY for another 24 h to analyze the protein levels of HSP60, COX IV and LC3.
Environmental Pollution 314 (2022): 120314. PMID: 36183875 IF: 8.9 -
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The enhanced autophagic activity promoted NLRP3 degradation. (E) The levels of NLRP3 and cleaved Casp1 (p10) in BMDMs after treatment with LPS/ATP/RAPA in presence or absence of BafA1 determined by western blot. n=4.
To further evaluate the effect of autophagy on corneal transplantation, other autophagy inducers 5-Aminoimidazole-4-carboxamide ribonucleotide (AICAR, 6.5 µg/µL, 6µL, MCE) and inhibitor Bafilomycin-A1 (BafA1, 0.25 µg/µL, 6µL, GLPBIO) was subconjunctivally injected into the recipient mice.
American Journal of Transplantation. PMID: 35092164 IF: 8.086 -
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Knockout of TNPO3 does not interfere with endocytosis and acidification of IAV. (C). Baf-A1 was used as a specific inhibitor of vacuolar-type H(+)- ATPase to inhibit acidification and protein degradation in lysosomes of cultured cells. WT cells and TNPO3 KO cells were incubated either with or without Baf-A1.
The cells were treated with Bafilomycin A1 (100 nM) or DMSO at 37 ◦C in an incubator for 2 h and then washed with PBS three times.
Int J Mol Sci 23.8 (2022): 4128. PMID: 35456945 IF: 5.9238 -
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RGS20 promotes NSCLC cell proliferation and activates autophagy in vitro. CCK-8 assay was performed to assess the proliferation of H1299 and Anip973 cells in the RGS20-OE group treated with Baf-A1 (50 nM, 2 h).
Representative western blot results show the protein levels of autophagy related proteins after blockage of autophagy flux by Baf-A1 (50 nM, 2 h) in three groups (CTRL, RGS20-KD, and RGS20-OE) of H1299 and Anip973 cells.
Cancer Cell International 24.1 (2024): 1-13. PMID: 38431606 IF: 5.8 -
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Resveratrol controlled autophagosome-lysosome fusion. (A–C) The protein levels of P62 and Lc3B II/I were detected usingWestern blotting and normalized to GAPDH (n = 3).
Luteinized granulosa cells were treated with 100 nM Baf A1 with or without 200 µM H2O2 and 20 µM resveratrol, and the dose of Baf A1 was based on a previous study
Int J Mol Sci, 2023, 24(13): 10914. PMID: 37446088 IF: 5.5999
Average Rating: 5 (Based on Reviews and 39 reference(s) in Google Scholar.)
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