ABTS diammonium salt (AzBTS-(NH4)2) |
カタログ番号GC33439
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ABTS diammonium salt (AzBTS-(NH4)2)はホースラディッシュペルオキシダーゼ(HRP)の基質であり、酵素結合免疫吸着測定の微量技術の開発に広く使われている。
Products are for research use only. Not for human use. We do not sell to patients.
Cas No.: 30931-67-0
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
ABTS diammonium salt (AzBTS-(NH4)2)はホースラディッシュペルオキシダーゼ(HRP)の基質であり、酵素結合免疫吸着測定の微量技術の開発に広く使われている[1]。ABTSは青緑色の特徴を持っているため、HRPに対して感受性が高く、安定している[1]。ABTSは改良のTEAC（Trolox等量抗酸化能力）法の基本として機能し、銅タンパク質（例：ヘモシアニン、セルロプラスミン、またはジアミンオキシダーゼ）と一部の複合体（例：セリン2–銅）を含む、特定のラジカルスカベンジャーの抗酸化能力の測定に使われる[2]。ABTSdiammonium saltに基づいたアッセイは、固体サンプル（活性包装材料と導電性ポリマー）の抗酸化能力の測定に広く使われている[3]。
ABTS diammonium saltに基づいたアッセイと高表現型の高速液体クロマトグラフィー-ダイオードアレイ検出器-質量分光法(HPLC-DAD-MS)の併用を、異なるプーアル茶の中のラジカルスカベンジャーの識別と量化に使われた[4]。ABTSは通常基質として使われ、McIlvaine緩衝液(pH 2.2-7.5)、50mmol/Lの酢酸ナトリウム緩衝液(pH 3.0-6.0)と100mmol/Lの酒石酸ナトリウム緩衝液(pH 2.0-5.5)で調製し、浄化rPsaDyPの最適pHを測定した[5]。
References:
[1] Matsuda H, Tanaka H, Blas B L, et al. Evaluation of ELISA with ABTS, 2-2'-azino-di-(3-ethylbenzthiazoline sulfonic acid), as the substrate of peroxidase and its application to the diagnosis of schistosomiasis[J]. The Japanese Journal of Experimental Medicine, 1984, 54(3): 131-138.
[2] Konan K V, Le Tien C, Mateescu M A. Electrolysis-induced fast activation of the ABTS reagent for an antioxidant capacity assay[J]. Analytical Methods, 2016, 8(28): 5638-5644.
[3] Hsu C F, Peng H, Basle C, et al. ABTS•+ scavenging activity of polypyrrole, polyaniline and poly (3, 4‐ethylenedioxythiophene)[J]. Polymer international, 2011, 60(1): 69-77.
[4] Qian Z M, Guan J, Yang F Q, et al. Identification and quantification of free radical scavengers in Pu-erh tea by HPLC-DAD-MS coupled online with 2, 2′-azinobis (3-ethylbenzthiazolinesulfonic acid) diammonium salt assay[J]. Journal of Agricultural and Food Chemistry, 2008, 56(23): 11187-11191.
[5] Lauber C, Schwarz T, Nguyen Q K, et al. Identification, heterologous expression and characterization of a dye-decolorizing peroxidase of Pleurotus sapidus[J]. AMB express, 2017, 7: 1-15.
実験室のスケールでリグノセルロース系バイオマスの糖化効率をテストするため、小さい量のバイオマスと低濃度の酵素だけを使う手動糖化プロトコールを建てた。
1.酵素混合物の調製：
(1)プロトコールの酵素混合物はセルラーゼとβ-グルコシダーゼ(BG)で構成されている。使用前は、酵素を安定塩から除去する必要がある。P-6DGゲルの脱塩カラムはセルラーゼとBG酵素の両方から安定塩を除去する。
(2)その他のステップを実施する前に、真菌の成長を阻止するNaN3-溶液を廃棄する。
(3)20ml、pH 4.8の酢酸緩衝液をカラムに注ぎ、重力で分離を実行する。
(4)1mlのセルラーゼまたはBG酵素と2ml、pH 4.8の酢酸緩衝液を15mlの遠心分離チューブに置いた。
(5)混合物をカラムに注ぎ、流す。カラムから流れだした3mlの液体を廃棄する。
(6)4ml、pH 4.8の酢酸緩衝液をカラムに注ぎ、流れ出した4mlの溶出液を15mlの遠心分離管に採取した。これが脱塩化された酵素である。
(7)100ml milliQ水をカラムに注ぎ、よってコラムを綺麗にする。その後、カラムは後続する脱塩化プロセスに使われることができる。
(8)基底でカラムを閉じ、0.02% NaN3溶液を添加した。蓋でカラムのトップを閉じ、室温で保存する。
(9)セルラーゼとBGの脱塩プロセスの後、pHが4.8の酢酸緩衝液で脱塩のBG材料を350倍希釈する。
(10)5:3の比率で、脱塩のセルラーゼと脱塩の希釈BGを併用した。
(11) 溶液の体積が元の10倍に達するまで、酢酸緩衝液（pH 4.8）を混合物に添加する。糖化アッセイにはこの酵素混合液を使う。この酵素混合物は、調製の二ヶ月以内に使うべきである。
2.グルコースオキシダーゼ（GOD）-ペルオキシダーゼ（POD）溶液と検量線の準備：
(1)レシピの指示に従い、100mlのGOD-POD溶液を調製する。GOD-POD溶液には、50mg ABTS、44.81mgのグルコースオキシダーゼと173μlの4%ペルオキシダーゼで構成されている。酢酸緩衝液（pH 4.5）を添加した後、溶液は100mlの最終体積に達した。
(2)一連の、濃度範囲が20μMから200μMのグルコース希釈液を調製する。
3.酵素活性の測定：
(1)4.5mgの濾紙を3つの安全ロックのチューブに置いた。また、濾紙のない安全ロックチューブという対照をも用意すべき。
(2)450µlの酢酸緩衝液(pH 4.8)と50μlの酵素混合液を各安全ロックチューブ（濾紙の有無を問わず）に添加する。
(3)サンプルを、サーモブロック装置内で12.5 Hzで持続的に振盪し、 50℃に1 時間保持するべき。
(4)いかなる振盪を避け、サンプルと対照を99℃で5分間沸かす必要がある。
(5)サンプルを23,477gで5分間遠心分離する。
(6)pHが4.8の酢酸緩衝液で、上清を20倍希釈する。
(7)GOD-PODで希釈上清からのグルコースの放出を測定し、濾紙単位(FPU)/mlで酵素混合物の活性を示す。
Reference:
[1] Van Acker R, Vanholme R, Piens K, et al. Saccharification protocol for small-scale lignocellulosic biomass samples to test processing of cellulose into glucose[J]. Bio-Protocol, 2016, 6(1): e1701-e1701.
| Cas No. | 30931-67-0 | SDF | |
| Canonical SMILES | CCN1C(C=CC(S(=O)([O-])=O)=C2)=C2S/C1=N/N=C(SC3=C4C=CC(S(=O)([O-])=O)=C3)\N4CC.[NH4+].[NH4+] | ||
| Formula | C18H24N6O6S4 | M.Wt | 548.68 |
| 溶解度 | Water : ≥ 50 mg/mL (91.13 mM) | Storage | Store at 2-8°C |
| General tips | Please select the appropriate solvent to prepare the stock solution according to the
solubility of the product in different solvents; once the solution is prepared, please store it in
separate packages to avoid product failure caused by repeated freezing and thawing.Storage method
and period of the stock solution: When stored at -80°C, please use it within 6 months; when stored
at -20°C, please use it within 1 month. To increase solubility, heat the tube to 37°C and then oscillate in an ultrasonic bath for some time. |
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| Shipping Condition | Evaluation sample solution: shipped with blue ice. All other sizes available: with RT, or with Blue Ice upon request. | ||
| Prepare stock solution | |||
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1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 1.8226 mL | 9.1128 mL | 18.2256 mL |
| 5 mM | 364.5 μL | 1.8226 mL | 3.6451 mL |
| 10 mM | 182.3 μL | 911.3 μL | 1.8226 mL |
Step 1: Enter information below (Recommended: An additional animal making an allowance for loss during the experiment)
g
μL
Step 2: Enter the in vivo formulation (This is only the calculator, not formulation. Please contact us first if there is no in vivo formulation at the solubility Section.)
Calculation results:
Working concentration: mg/ml;
Method for preparing DMSO master liquid: mg drug pre-dissolved in μL DMSO ( Master liquid concentration mg/mL, Please contact us first if the concentration exceeds the DMSO solubility of the batch of drug. )
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next addμL PEG300, mix and clarify, next addμL Tween 80, mix and clarify, next add μL saline, mix and clarify.
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next add μL Corn oil, mix and clarify.
Note: 1. Please make sure the liquid is clear before adding the next solvent.
2. Be sure to add the solvent(s) in order. You must ensure that the solution obtained, in the previous addition, is a clear solution before proceeding to add the next solvent. Physical methods such as vortex, ultrasound or hot water bath can be used to aid dissolving.
3. All of the above co-solvents are available for purchase on the GlpBio website.
Quality Control & SDS
- View current batch:
- Purity: >98.00% Appearance: A solid
- COA (Certificate of Analysis)
- SDS (Safety Data Sheet)
- Datasheet
Average Rating: 5 (Based on Reviews and 8 reference(s) in Google Scholar.)