Acridinium NHS ester |
Catalog No.GC42711
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Acridinium NHS ester(AE NHS)는 생물 분자의 일차 아민에서 단백질과 핵산을 표지하는 물질이고 과산화수소(H₂O₂)가 존재할 때 화학 발광을 생성한다.
Products are for research use only. Not for human use. We do not sell to patients.
Cas No.: 177332-37-5
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
Acridinium NHS ester(AE NHS)는 생물 분자의 일차 아민에서 단백질과 핵산을 표지하는 물질이고 과산화수소(H₂O₂)가 존재할 때 화학 발광을 생성한다.
Acridinium NHS ester는 체외 DNA 라벨 (예: 2.95 mmol/L, 30분, 37°C)[3]과 체외 단백질 라벨(예: 10μM)[4]에 사용된다. 게다가 Acridinium NHS ester로 표지된 항체는 microRNA 검출[5]과 SARS-CoV-2 바이러스 유전자 검출[6]에도 사용된다.
References:
[1] Arnold, L J Jr et al. “Assay formats involving acridinium-ester-labeled DNA probes.” *Clinical chemistry* vol. 35,8 (1989): 1588-94.
[2] Natrajan, Anand, David Wen, and David Sharpe. "Synthesis and properties of chemiluminescent acridinium ester labels with fluorous tags." *Organic & Biomolecular Chemistry* 12.23 (2014): 3887-3901.
[3] He, Yi et al. “DNA sensor by using electrochemiluminescence of acridinium ester initiated by tripropylamine.” *Analytical and bioanalytical chemistry* vol. 399,10 (2011): 3451-8. doi:10.1007/s00216-010-4157-y
[4] Lai, Yongquan et al. “Using acridinium ester as the sonochemiluminescent probe for labeling of protein.” *The Analyst* vol. 134,1 (2009): 131-7. doi:10.1039/b813330a
[5] Kappel, Andreas et al. “MicroRNA in vitro diagnostics using immunoassay analyzers.” *Clinical chemistry* vol. 61,4 (2015): 600-7. doi:10.1373/clinchem.2014.232165
[6]Pham, Jimmykim et al. “Performance Characteristics of a High-Throughput Automated Transcription-Mediated Amplification Test for SARS-CoV-2 Detection.” *Journal of clinical microbiology* vol. 58,10 e01669-20. 22 Sep. 2020, doi:10.1128/JCM.01669-20
Acridinium NHS ester로 단백질을 표지하는 프로토콜[1]
1.Acridinium NHS ester의 초음파 분해.
1.1 Acridinium NHS ester 테스트 저장 용액: 무수 DMF를 사용하고 Acridinium NHS ester를 녹이고 농도가 1-5 mg/ml인 저장액을 제조합니다. 포장 후 저장액은 -20℃ 또는 -80℃에서 빛을 피하고 보관합니다.
1.2 테스트 용액의 준비: 테스트 저장액을 DMF와 H₂O의 부피비가 2:3인 혼합액으로 희석하고 10μM(0.01 mM)의 Acridinium NHS ester를 포함하는 8 mL 테스트 용액을 제조합니다.
1.3 Irradiate acridinium 에스테르 용액을 초음파로 15초간 조사한 후 16 mL의 1 mol/L 수산화나트륨을 용액에 이전하고 초음파를 조사합니다.
1.4 초음파 조사는 1분간 지속하고 반응이 완전히 이루어지도록 합니다.
2.음향 유도 화학 발광(SCL)의 측정.
2.1 모든 SCL 측정은 다음과 같은 조건에서 수행됩니다: 초음파 출력 아웃파워 및 주파수는 각각 300W와 20kHz이고 광전자증폭관의 작동 전압은 850V입니다.
2.2 모든 SCL 실험은 광학적으로 평면 창이 장착된 유리 셀에서 수행됩니다.
2.3 초음파 처리된 용액은 공기로 포화되어야 하며, 초음파 처리된 용액의 부피는 8 mL입니다.
2.4 440 nm 투과율을 가진 필터를 사용하고 용매로부터 생성된 배경 SL(자발 형광)의 강도를 줄입니다.
2.5 초음파로 인한 용액 온도 변화는 SCL강도에 미미한 영향만 미치므로 일정한 온도 장치를 사용할 필요가 없습니다.
3.표지 항체의 준비합니다.
3.1 표지 저장액: DMSO에 Acridinium NHS ester 저장액을 제조합니다. 예를 들어, 0.5-2 mM.
노트 : 실제 상황에 따라 저장액과 작업액의 농도를 조정합니다. 사용되지 않은 저장액은 포장 후 -20℃ 또는 -80℃에서 빛을 피하고 보관하는 것이 좋습니다.
3.2 30 mg의 항체 용액(이 경우 항 인간 인슐린 기니피그 다클론 항체)을 50 mL 라벨 버퍼에 넣고 작은 갈색 플라스틱 시험관으로 옮긴 다음 0.5 mM Acridinium NHS ester 용액 5 mL(이전에 무수DMF로 희석하고 20℃에서 보관)을 추가합니다.
3.3 실온에서 혼합물을 1.5시간 동안 저어줍니다.
3.4 0.1 mol/L NaH₂PO₃로 과령의 acridinium ester label (4℃; 10시간)를 통해 투석하고 제거합니다.
3.5 혼합물을 투석 주머니로 옮긴 다음 투석 주머니를 100 mL 투석액 완충제로 가득 찬 유리 비커에 넣습니다.
3.6 정제 과정은 4℃에서 10시간 동안 진행되고 세 번 반복해서 AE-공액 다클론 항체에서 공액되지 않은 Acridinium NHS ester를 완전히 제거합니다.
3.7 50 mL의 AE-공액물을 수집해서 pH 7.4의 버퍼(0.1M 인산염 버퍼, 0.15M NaCl)로 500 mL로 희석하고 추가 사용을 위해 사용합니다.
References:
[1]Lai, Yongquan et al. “Using acridinium ester as the sonochemiluminescent probe for labeling of protein.” The Analyst vol. 134,1 (2009): 131-7. doi:10.1039/b813330a
| Cas No. | 177332-37-5 | SDF | |
| Canonical SMILES | C[N+]1=C2C(C=CC=C2)=C(C(OC3=CC=C(CCC(ON4C(CCC4=O)=O)=O)C=C3)=O)C5=C1C=CC=C5.FC(F)(S(=O)([O-])=O)F | ||
| Formula | C28H23N2O6•CF3SO3 | M.Wt | 632.6 |
| Solubility | Soluble in DMSO | Storage | Store at -20°C |
| General tips | Please select the appropriate solvent to prepare the stock solution according to the
solubility of the product in different solvents; once the solution is prepared, please store it in
separate packages to avoid product failure caused by repeated freezing and thawing.Storage method
and period of the stock solution: When stored at -80°C, please use it within 6 months; when stored
at -20°C, please use it within 1 month. To increase solubility, heat the tube to 37°C and then oscillate in an ultrasonic bath for some time. |
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| Shipping Condition | Evaluation sample solution: shipped with blue ice. All other sizes available: with RT, or with Blue Ice upon request. | ||
| Prepare stock solution | |||
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1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 1.5808 mL | 7.9039 mL | 15.8078 mL |
| 5 mM | 316.2 μL | 1.5808 mL | 3.1616 mL |
| 10 mM | 158.1 μL | 790.4 μL | 1.5808 mL |
Step 1: Enter information below (Recommended: An additional animal making an allowance for loss during the experiment)
g
μL
Step 2: Enter the in vivo formulation (This is only the calculator, not formulation. Please contact us first if there is no in vivo formulation at the solubility Section.)
Calculation results:
Working concentration: mg/ml;
Method for preparing DMSO master liquid: mg drug pre-dissolved in μL DMSO ( Master liquid concentration mg/mL, Please contact us first if the concentration exceeds the DMSO solubility of the batch of drug. )
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next addμL PEG300, mix and clarify, next addμL Tween 80, mix and clarify, next add μL saline, mix and clarify.
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next add μL Corn oil, mix and clarify.
Note: 1. Please make sure the liquid is clear before adding the next solvent.
2. Be sure to add the solvent(s) in order. You must ensure that the solution obtained, in the previous addition, is a clear solution before proceeding to add the next solvent. Physical methods such as vortex, ultrasound or hot water bath can be used to aid dissolving.
3. All of the above co-solvents are available for purchase on the GlpBio website.
Quality Control & SDS
- View current batch:
- Purity: >97.00% Appearance: A solid
- COA (Certificate of Analysis)
- SDS (Safety Data Sheet)
- Datasheet
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