CY7-SE (Synonyms: Cy7 NHS Ester, N-hydroxysuccinimidyl Ester Cy7) |
Catalog No.GC30261
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CY7-SE (Cyanine7 Succinimidyl Ester)는 CY7에서 유래한 형광 염료이다. CY7-SE는 단백질과 항체 등 생물 분자의 아미노기 (-NH₂)와 직접 공가결합 반응을 일으킬 수 있고 추가 결합제가 필요하지 않는다 (Ex=747nm, Em=774nm).
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Cas No.: 477908-53-5
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
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CY7-SE (Cyanine7 Succinimidyl Ester)는 CY7에서 유래한 형광 염료이다. CY7-SE는 단백질과 항체 등 생물 분자의 아미노기 (-NH₂)와 직접 공가결합 반응을 일으킬 수 있고 추가 결합제가 필요하지 않는다 (Ex=747nm, Em=774nm). CY7은 기본적인 지용성 시아닌 염료이다. CY7이 근적외선 영역에서 흡수되기 때문에 CY7은 매우 낮은 배경을 가지고 있지만 가장 강하고 안정적인 장파장 염료이다. CY7은 방사성 원소의 대체품으로서 소동물의 체내 영상을 위한 특별히 적합한다. 그러나 CY7의 분자 구조는 양전하를 띠는 메소머 이온 구조를 포함하고 생물 분자와의 공가결합을 가능하게 하기 위해 카르복실기나 기타 화학 수정이 필요한다[1].반면 CY7-SE는 활성 에스터 기 (-NHS)를 도입하여 CY7에서 유도된 것으로, 이는 CY7-SE가 아미노기를 함유하는 생물 대분자, 항체,펩타이드, 리포좀을 직접 레이블링할 수 있도록 한다[2]. 예를 들어 CY7-SE로 표시된 난소암 관련 항체 OC183B2는 실시간 근적외선 형광 영상을 통해 난소암 세포를 명확하게 시각화할 수 있다[3]. 게다가 CY7-SE로 표시된D-mannosamine (Cy7-DM)은 종양 관련 대식세포 (TAMs) 표면의 만코 수용체에 결합할 수 있고 근적외선 형광 영상을 통해 종양 조직 내 TAMs의 집합을 관찰할 수 있다[4].
Reference:
[1] LI Y, ZHOU Y, YUE X, et al. Cyanine Conjugate-Based Biomedical Imaging Probes [J]. Adv Healthc Mater, 2020, 9(22): e2001327.
[2] ZHANG H, YAN C, LI H, et al. Rational Design of Near-Infrared Cyanine-Based Fluorescent Probes for Rapid In Vivo Sensing Cysteine [J]. ACS Appl Bio Mater, 2021, 4(3): 2001-2008.
[3] ZHANG C, LING X, GUO Y, et al. Evaluation of COC183B2 antibody targeting ovarian cancer by near-infrared fluorescence imaging [J]. Chin J Cancer Res, 2019, 31(4): 673-685.
[4] JIANG C, CAI H, PENG X, et al. Targeted Imaging of Tumor-Associated Macrophages by Cyanine 7-Labeled Mannose in Xenograft Tumors [J]. Mol Imaging, 2017, 16(1536012116689499.
라벨을 붙이는 단백질[1] :
다른 단백질(예:혈청 알부민 또는 젤라틴)을 함유한 항체나 아미노기를 가진 완충기는 표시에 영향을 미칠 수 있고 표시에 정제해야 합니다.
1.항GST 항체(3mg/mL, 0.5mL)를 실온에서 0.15M NaCl 용액 1L에 4시간 동안 투석합니다.
2.4°C에서 신선한 0.15M NaCl 용액 1L에서 밤새 투석시킵니다.
3.다음날에 0.1M NaHCO₃ (pH 8.3) 1L에서 4시간 동안 투석합니다.
4. 0.22-㎛ 주사기 필터를 사용해서 항체 용액을 여과합니다.
5. 0.1M NaHCO₃로 항체의 소량을 희석하고 280nm에서 자외선 흡광도를 측정해서 항체의 총량을 계산합니다.
6. DMSO에 10mg/mL 농도의 Cy7-SE 용액을 준비합니다. CyDye NHS와 항체의 원하는 비율(예: 20:1)을 달성하기 위해 필요한 부피를 계산한 후 이를 항체 용액에 천천히 추가합니다. 실온에서 어두운 곳에서 45분 동안 부드럽게 뒤섞합니다.
7. 미결합된 Cy7-SE를 제거하기 위해 1L의 0.15M NaCl 용액을 사용하고 실온에서 어두운 곳에서 4시간 동안 투석시킵니다.
8. 어두운 곳에서 4°C에서 신선한 1L의 0.15M NaCl 용액을 사용하고 밤새 투석합니다. 9. 1L의 0.01M PBS/0.01% 아자이드 나트륨 용액을 사용해서 실온에서 어두운 곳에서 4시간 동안 투석시키고 다시 4°C에서 어두운 곳에서 밤새 투석시킵니다. 10. 0.22㎛ 주사기 필터를 사용해서 항체 용액을 여과합니다.
11. 0.01M PBS/0.01% 아자이드 나트륨으로 표기된 항체 용액을 편리한 농도로 희석하고 280nm (단백질) 과 552nm (Cy) 에서 UV-Vis 흡광도를 측정합니다.
12. CY7-SE로 표시된 단백질을PBS 용액(pH=7.2-7.4)에 녹입니다.
13. 쥐 꼬리 정맥에 200μL (0.5mg/mL)을 정맥주사합니다.
14. 체내 형광의 영상 사진을 기록하고 형광 약물의 분포를 분석합니다.
15. 들뜨기 파장은 700–770nm bandpass, 방출 파장은 790nm longpass였습니다.
F/P (fluorophore-to-protein) 비율을 계산하려면 다음 단계를 따릅니다:
Cy7의 750nm에서의 몰 소멸 계수는 240600M⁻¹cm⁻¹입니다; 이 단백질의 280nm에서의 몰소멸 계수는 170,000M⁻¹cm⁻¹입니다. 다른 단백질은 다른 몰소멸 계수를 가지고 있습니다. Cy7 염료 자체의 280nm에서의 흡수는 750nm에서의 흡수의 4%입니다. F/P 값을 다음 공식을 사용해서 계산합니다:
[Cy7] = A750/240600
[antibody] = {A280 - (0.04×A750)}/170000
F/P final= [Cy7]/[antibody]= {0.71×A750}/ {A280 - (0.04×A750)}
Reference:
[1] ZHANG C, CHENG H, DOU S, et al. Near-infrared fluorescent molecular probes with cetuximab in the in vivo fluorescence imaging for epithelial ovarian cancer [J]. J Ovarian Res, 2024, 17(1): 225.
| Cas No. | 477908-53-5 | SDF | |
| Synonyms | Cy7 NHS Ester, N-hydroxysuccinimidyl Ester Cy7 | ||
| Canonical SMILES | CC(/C(N1CCCCCC(ON2C(CCC2=O)=O)=O)=C\C=C\C=C\C=C\C3=[N+](CC)C(C=CC(S(=O)([O-])=O)=C4)=C4C3(C)C)(C)C5=C1C=CC(S(=O)(O)=O)=C5 | ||
| Formula | C39H45N3O10S2 | M.Wt | 779.92 |
| Solubility | DMSO : ≥ 41 mg/mL (52.57 mM) | Storage | Store at -20°C, protect from light |
| General tips | Please select the appropriate solvent to prepare the stock solution according to the
solubility of the product in different solvents; once the solution is prepared, please store it in
separate packages to avoid product failure caused by repeated freezing and thawing.Storage method
and period of the stock solution: When stored at -80°C, please use it within 6 months; when stored
at -20°C, please use it within 1 month. To increase solubility, heat the tube to 37°C and then oscillate in an ultrasonic bath for some time. |
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| Shipping Condition | Evaluation sample solution: shipped with blue ice. All other sizes available: with RT, or with Blue Ice upon request. | ||
| Prepare stock solution | |||
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1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 1.2822 mL | 6.4109 mL | 12.8218 mL |
| 5 mM | 256.4 μL | 1.2822 mL | 2.5644 mL |
| 10 mM | 128.2 μL | 641.1 μL | 1.2822 mL |
Step 1: Enter information below (Recommended: An additional animal making an allowance for loss during the experiment)
g
μL
Step 2: Enter the in vivo formulation (This is only the calculator, not formulation. Please contact us first if there is no in vivo formulation at the solubility Section.)
Calculation results:
Working concentration: mg/ml;
Method for preparing DMSO master liquid: mg drug pre-dissolved in μL DMSO ( Master liquid concentration mg/mL, Please contact us first if the concentration exceeds the DMSO solubility of the batch of drug. )
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next addμL PEG300, mix and clarify, next addμL Tween 80, mix and clarify, next add μL saline, mix and clarify.
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next add μL Corn oil, mix and clarify.
Note: 1. Please make sure the liquid is clear before adding the next solvent.
2. Be sure to add the solvent(s) in order. You must ensure that the solution obtained, in the previous addition, is a clear solution before proceeding to add the next solvent. Physical methods such as vortex, ultrasound or hot water bath can be used to aid dissolving.
3. All of the above co-solvents are available for purchase on the GlpBio website.
Quality Control & SDS
- View current batch:
- Purity: >99.00% Appearance: A solid
- COA (Certificate of Analysis)
- SDS (Safety Data Sheet)
- Datasheet
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