5-Ph-IAA |
カタログ番号GC61525
One-Click Copy Product Info
|
5-Ph-IAAはAID2システムの配位子である。5-Ph-IAAはOsTIR1(F74G)変異体に特異的に結合し、三量体を形成する。5-Ph-IAAは、mini-AID（mAID）タグが付加された標的タンパク質のユビキチン化を誘導し、26Sプロテアソームによる分解を引き起こす。
Products are for research use only. Not for human use. We do not sell to patients.
Cas No.: 168649-23-8
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
5-Ph-IAAはAID2システムの配位子である。5-Ph-IAAはOsTIR1(F74G)変異体に特異的に結合し、三量体を形成する。5-Ph-IAAは、mini-AID（mAID）タグが付加された標的タンパク質のユビキチン化を誘導し、26Sプロテアソームによる分解を引き起こす。5-Ph-IAAは、生細胞におけるタンパク質機能の動的解析、単一細胞レベルでのタンパク質アイソフォーム解析、および大腸がんやその他の腫瘍に関する研究に利用することができる。
In vitroでは、rab1 および rab5 ノックアウト MDCK 細胞を1μMの5-Ph-IAA で2時間処理すると、細胞内の RAB1B および RAB5A タンパク質が分解され、細胞はそれぞれ RAB1 欠損状態および RAB5 欠損状態となった。HCT116 細胞（OsTIR1(F74G) および mAID-EGFP-NLS を発現）を1 μMの 5-Ph-IAA で 4時間処理すると、細胞内の mAID-EGFP-NLS レポータータンパク質が分解された。OsTIR1F74A および mScarlet-mAID-CENP-H を発現する DT40 細胞を 5 μM の 5-Ph-IAA で 6 時間処理すると、細胞内の mScarlet-mAID-CENP-H タンパク質が分解され、細胞増殖が阻害された。OsTIR1F74A および mAID タグ付き標的タンパク質を発現する HeLa、HT1080、U2OS、RPE1 細胞および ES 細胞を5μMの5-Ph-IAA で2～4時間処理すると、対応する mAID タグ付き標的タンパク質が分解され、コロニー形成が阻害された。
In vivoでは、成体の pMK411 トランスジェニックマウスに5mg/kgの 5-Ph-IAA を1回腹腔内投与すると、6時間以内に心臓内の AID-EGFP レポータータンパク質が分解された。Cep192AID/AID;OsTir1Tir/Tir マウスに5mg/kgの 5-Ph-IAA を1回腹腔内投与すると、小腸、脾臓、および胃内の CEP192-mAID が分解された。Cep192wt/wt;OsTir1Tir/Tir マウスに5mg/kgの 5-Ph-IAA を24時間ごとに14日間連続して腹腔内投与しても、行動異常、体重の変化、血液および血清中の毒性指標の変化、あるいは組織病理学的損傷は認められなかった。HCT116 (WTAID2、UHRF1AID2、DNMT1AID2、UHRF1mAID2/DNMT1mAID2) 細胞によって形成された異種移植腫瘍を有する Rj:NMRI-Foxn1 ヌードマウスに3mg/kgの 5-Ph-IAA を毎日腹腔内投与したところ、腫瘍内の UHRF1 および/または DNMT1 タンパク質が分解され、腫瘍重量が減少、Ki67 陽性シグナルが低下し、SA-β-gal 陽性シグナルが増加した。
| 細胞実験 [1]: | |
|
細胞株 |
DT40細胞（ニワトリBリンパ腫細胞株）、HeLa細胞（ヒト上皮不死化細胞株）、HT1080細胞（ヒト線維肉腫細胞株）、U2OS細胞（ヒト骨肉腫細胞株）、RPE1細胞（ヒト網膜色素上皮細胞株）、E14tg2a細胞（マウス胚性幹細胞株） |
|
調製方法 |
OsTIR1F74A および mScarlet-mAID-CENP-H（またはmAID-ルシフェラーゼ、mAID-CENP-A、mAID-CENP-T）を発現するDT40細胞を、指定された濃度の5-Ph-IAAで最大6時間処理した後、イムノブロッティング、ルシフェラーゼアッセイ、蛍光顕微鏡観察、および細胞増殖・生存率アッセイを行った。OsTIR1F74AおよびmScarlet-mAID-CENP-Hを発現するHeLa、HT1080、U2OS、RPE1、およびE14tg2a細胞を、5μMの5-Ph-IAAで2～4時間処理した後、イムノブロッティング、蛍光顕微鏡観察、およびコロニー形成アッセイを行った。 |
|
反応条件 |
5μM；2～6時間 |
|
応用 |
5-Ph-IAAは、OsTIR1F74Aを発現するDT40細胞においてmScarlet-mAID-CENP-Hを分解し、細胞増殖を阻害した。5-Ph-IAAは、OsTIR1F74Aを発現するHeLa、HT1080、U2OS、RPE1およびマウスES細胞において、2～4時間以内にmScarlet-mAID-CENP-Hを分解し、これらの細胞におけるコロニー形成を抑制した。 |
| 動物実験 [2]: | |
|
動物モデル |
Rj:NMRI-Foxn1 nu/nu ヌードマウス（生後6週齢） |
|
調製方法 |
HCT116（WTAID2、UHRF1AID2、DNMT1AID2、UHRF1mAID2/DNMT1mAID2）細胞を50%マトリゲルに懸濁させ、マウスの脇腹に皮下注入した。腫瘍が約60mm3に達した時点で、マウスに5-Ph-IAA（3mg/kg）または0.9% NaClを8日間連続して毎日腹腔内投与し、その後、腫瘍を切除して、ウエスタンブロット、免疫組織化学（UHRF1、Ki67、F4/80、p21）、全組織SA-β-gal染色および腫瘍重量測定を行った。 |
|
剤形 |
3mg/kg；腹腔内投与；1日1回、8日間 |
|
応用 |
5-Ph-IAAは、異種移植腫瘍においてUHRF1および／またはDNMT1を分解し、腫瘍重量を減少させ、Ki67陽性の増殖シグナルを低下させ、SA-β-gal陽性の老化細胞を増加させ、F4/80陽性のマクロファージ浸潤を増加させ、腫瘍切片においてp21染色を誘導した。 |
| Cas No. | 168649-23-8 | SDF | |
| Canonical SMILES | O=C(O)CC1=CNC2=C1C=C(C3=CC=CC=C3)C=C2 | ||
| Formula | C16H13NO2 | M.Wt | 251.28 |
| 溶解度 | DMSO: 125 mg/mL (497.45 mM) | Storage | Store at -20°C |
| Shipping Condition | Evaluation sample solution: shipped with blue ice. All other sizes available: with RT, or with Blue Ice upon request. | ||
| Prepare stock solution | |||
|
1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 3.9796 mL | 19.8981 mL | 39.7962 mL |
| 5 mM | 795.9 μL | 3.9796 mL | 7.9592 mL |
| 10 mM | 398 μL | 1.9898 mL | 3.9796 mL |
Step 1: Enter information below (Recommended: An additional animal making an allowance for loss during the experiment)
g
μL
Step 2: Enter the in vivo formulation (This is only the calculator, not formulation. Please contact us first if there is no in vivo formulation at the solubility Section.)
Calculation results:
Working concentration: mg/ml;
Method for preparing DMSO master liquid: mg drug pre-dissolved in μL DMSO ( Master liquid concentration mg/mL, Please contact us first if the concentration exceeds the DMSO solubility of the batch of drug. )
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next addμL PEG300, mix and clarify, next addμL Tween 80, mix and clarify, next add μL saline, mix and clarify.
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next add μL Corn oil, mix and clarify.
Note: 1. Please make sure the liquid is clear before adding the next solvent.
2. Be sure to add the solvent(s) in order. You must ensure that the solution obtained, in the previous addition, is a clear solution before proceeding to add the next solvent. Physical methods such as vortex, ultrasound or hot water bath can be used to aid dissolving.
3. All of the above co-solvents are available for purchase on the GlpBio website.
Quality Control & SDS
- View current batch:
- Purity: >99.00% Appearance: A solid
- COA (Certificate of Analysis)
- SDS (Safety Data Sheet)
- Datasheet
Average Rating: 5 (Based on Reviews and 3 reference(s) in Google Scholar.)