8pyDTZ |
カタログ番号GC39334
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8pyDTZはピリジルジフェニルテラジン（DTZ）類似物であり、生物発光イメージングに設計され、LumiLucルシフェラーゼシステムに対しては特に最適化されている。
Products are for research use only. Not for human use. We do not sell to patients.
Cas No.: 2351898-91-2
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
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8pyDTZはピリジルジフェニルテラジン（DTZ）類似物であり、生物発光イメージングに設計され、LumiLucルシフェラーゼシステムに対しては特に最適化されている。ピリジル基質8pyDTZの存在下で、LumiLucは非常に明るい黄色い生物発光を生成する。8pyDTZは増強された水溶性と赤方偏移発射を提供しし、体内イメージングの応用に適合させる[1]。DTZに比べて、8pyDTZの水溶性と生物利用度は13倍優れている。8-pyDTZ/LumiLucからの発射は、8-pyDTZ/teLucより5倍明るい[2]。
体外で、8pyDTZ (30µM)は、25℃で、対象となる分析対象物を30分間培養することで、血清サンプルの中のヒト血清アルブミン(HSA)や、唾液サンプルにおけるα-アミラーゼなどの生物マーカーの定量に使われる[3]。
体内で、100μLの生理食塩水の中の8pyDTZ (0.2μmol/マウス)を、ルシフェラーゼ発見のHeLa細胞異種移植マウスモデルに静脈内投与し、よって高い感受性と優れた組織通過能力で腫瘍の成長を追跡する[1]。
References:
[1] Yeh H W, Xiong Y, Wu T C, et al. ATP-Independent Bioluminescent Reporter Variants To Improve in Vivo Imaging. ACS Chem Biol. 2019 May 17;14(5):959-965.
[2] Syed A J, Anderson J C. Applications of bioluminescence in biotechnology and beyond. Chem Soc Rev. 2021 May 7;50(9):5668-5705.
[3] Guo Z, Parakra R D, Xiong Y, et al. Engineering and exploiting synthetic allostery of NanoLuc luciferase. Nat Commun. 2022 Feb 10;13(1):789.
生物発光性能を評価するためのHEK 293T細胞における8pyDTZの使用方法：
1.5% CO2と共に、37℃で、10% FBSのDMEMで、HEK 293T細胞を培養する。
2.細胞のコンフルエンスが70-80%に達する時、遺伝子導入を行う。
3.リポソームに基づいた遺伝子導入法を使い、LumiLucルシフェラーゼ発見プラスミドで一過性に細胞を遺伝子導入する。
4.細胞におけるLumiLucルシフェラーゼの発見は、遺伝子導入の24-48時間後に検出する。
5.10mMの濃度になるまで、8pyDTZをエタノールに溶解する。
6.1mM CDTA, 0.5% Tergitol NP-40, 0.05% Antifoam 204, 150mM KCl, 100mM MES pH 6.0, 1mM DTTと35mMのチオ尿素で構成されたアッセイ緩衝液を使う。
7.20µMの最終濃度になるまで、アッセイ緩衝液で8pyDTZ貯蔵液（10mM）を希釈する。
8.5,000細胞/ウェルの密度で、96ウェルのプレートに遺伝子導入された細胞を播種する。
9.インキュベーターに、細胞を接着させ、2-4時間回復させた。
10.遺伝子導入された細胞を含有する各ウェルに、50µLの8pyDTZ (20µM)含有の溶液を添加する。
11.37℃で、細胞を8pyDTZで10分間培養する。
12.培養の直後に、発光プレートリーダーを使い、生物発光イメージングを行い、暴露時間は2秒である。
13.600-700nmのバンドパスフィルターを使い、遠赤外ピークを捉える。
このプロトコールはあくまでもガイドラインを提供し、ご自分のニーズに合わせてご調整願います。
References:
[1] Yeh H W, Xiong Y, Wu T C, et al. ATP-Independent Bioluminescent Reporter Variants To Improve in Vivo Imaging. ACS Chem Biol. 2019 May 17;14(5):959-965.
| Cas No. | 2351898-91-2 | SDF | |
| Canonical SMILES | O=C1C(CC2=CC=CC=C2)=NC3=C(C4=CC=NC=C4)NC(C5=CC=CC=C5)=CN31 | ||
| Formula | C24H18N4O | M.Wt | 378.43 |
| 溶解度 | DMSO: 12.5 mg/mL (33.03 mM; DMSO can inactivate 8pyDTZ's activity); EtOH+HCl: 2 mg/mL (5.28 mM; ultrasonic and adjust pH to 2 with 1M HCl; DMSO can inactivate 8pyDTZ's activity); Water: < 0.1 mg/mL (insoluble; DMSO can inactivate 8pyDTZ's activity) | Storage | Store at -20°C,unstable in solution, ready to use. |
| General tips | Please select the appropriate solvent to prepare the stock solution according to the
solubility of the product in different solvents; once the solution is prepared, please store it in
separate packages to avoid product failure caused by repeated freezing and thawing.Storage method
and period of the stock solution: When stored at -80°C, please use it within 6 months; when stored
at -20°C, please use it within 1 month. To increase solubility, heat the tube to 37°C and then oscillate in an ultrasonic bath for some time. |
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| Shipping Condition | Evaluation sample solution: shipped with blue ice. All other sizes available: with RT, or with Blue Ice upon request. | ||
| Prepare stock solution | |||
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1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 2.6425 mL | 13.2125 mL | 26.425 mL |
| 5 mM | 528.5 μL | 2.6425 mL | 5.285 mL |
| 10 mM | 264.2 μL | 1.3212 mL | 2.6425 mL |
Step 1: Enter information below (Recommended: An additional animal making an allowance for loss during the experiment)
g
μL
Step 2: Enter the in vivo formulation (This is only the calculator, not formulation. Please contact us first if there is no in vivo formulation at the solubility Section.)
Calculation results:
Working concentration: mg/ml;
Method for preparing DMSO master liquid: mg drug pre-dissolved in μL DMSO ( Master liquid concentration mg/mL, Please contact us first if the concentration exceeds the DMSO solubility of the batch of drug. )
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next addμL PEG300, mix and clarify, next addμL Tween 80, mix and clarify, next add μL saline, mix and clarify.
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next add μL Corn oil, mix and clarify.
Note: 1. Please make sure the liquid is clear before adding the next solvent.
2. Be sure to add the solvent(s) in order. You must ensure that the solution obtained, in the previous addition, is a clear solution before proceeding to add the next solvent. Physical methods such as vortex, ultrasound or hot water bath can be used to aid dissolving.
3. All of the above co-solvents are available for purchase on the GlpBio website.
Quality Control & SDS
- View current batch:
- Purity: >98.00% Appearance: A solid
- COA (Certificate of Analysis)
- SDS (Safety Data Sheet)
- Datasheet
Average Rating: 5 (Based on Reviews and 8 reference(s) in Google Scholar.)