Z-Arg-Leu-Arg-Gly-Gly-AMC |
カタログ番号GA23715
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Z-Arg-Leu-Arg-Gly-Gly-AMC（Z-RLRGG-AMC）はSARS-CoVパパイン様プロテアーゼ（PLpro）のペプチド基質であり、RLRGGはユビキチン（Ub）のC末端配列である。Z-Arg-Leu-Arg-Gly-Gly-AMCの最大励起/発光波長はそれぞれ340/450 nmである。
Products are for research use only. Not for human use. We do not sell to patients.
Cas No.: 167698-69-3
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
Z-Arg-Leu-Arg-Gly-Gly-AMC（Z-RLRGG-AMC）はSARS-CoVパパイン様プロテアーゼ（PLpro）のペプチド基質であり、RLRGGはユビキチン（Ub）のC末端配列である。Z-Arg-Leu-Arg-Gly-Gly-AMCの最大励起/発光波長はそれぞれ340/450 nmである。
Z-Arg-Leu-Arg-Gly-AMCは主にプロテアーゼ活性の研究に用いられる。放出された7-アミノ-4-メチルクマリン（AMC）の蛍光強度を測定することにより、プロテアーゼの触媒活性を評価することができる。Z-Arg-Leu-Arg-Gly-Gly-AMCは、蛍光基AMCと結合したペンタペプチド配列で構成されている。「Z」はベンジルオキシカルボニル（Z）保護基を示し、アミノ酸を非特異的反応から保護するために用いられる。
References:
[1] Báez-Santos Y M, Mielech A M, Deng X, et al. Catalytic function and substrate specificity of the papain-like protease domain of nsp3 from the Middle East respiratory syndrome coronavirus[J]. Journal of virology, 2014, 88(21): 12511-12527.
[2] Li L, Ma L, Hu Y, et al. Natural biflavones are potent inhibitors against SARS-CoV-2 papain-like protease[J]. Phytochemistry, 2022, 193: 112984.
[3] Fu Z, Huang B, Tang J, et al. The complex structure of GRL0617 and SARS-CoV-2 PLpro reveals a hot spot for antiviral drug discovery[J]. Nature communications, 2021, 12(1): 488.
[4] Wang C, Chen S, Yeo S, et al. Elevated p62/SQSTM1 determines the fate of autophagy-deficient neural stem cells by increasing superoxide[J]. Journal of Cell Biology, 2016, 212(5): 545-560.
[5] Kadereit D, Waldmann H. Enzymatic protecting group techniques[J]. Chemical Reviews, 2001, 101(11): 3367-3396.
このプランはあくまでガイドラインであり、具体的なニーズに合わせて修正してください。
1. 溶液調製:
(1) ストック溶液: Z-Arg-Leu-Arg-Gly-Gly-AMCをDMSOに溶解し、最終濃度1 mMにする。注意: 使用しないストック溶液は分注し、-20℃の暗所に保管する。凍結融解の繰り返しを避けてください。
(2) ワーキング溶液: ストック溶液をアッセイバッファーで希釈し、所望の作業濃度にする。
注意: 実際の状況に応じて最適な作業濃度を調整するか、文献を参考にして濃度のグラデーションを自分で設定してください。作業溶液は調製後すぐに使用してください。
2. Z-Arg-Leu-Arg-Gly-Gly-AMCを使用したPLpro活性測定の手順 [1]（文献より、参考までに）:
(1) 50 mM HEPES（pH 7.4）、0.01% Triton X-100（v/v）、0.1 mg/mL BSA、2 mM DTTを含むアッセイバッファーを調製する。384ウェルプレートに反応系をセットアップし、各ウェルの最終反応量を50 μLにする。
(2) 各ウェルにPLproを最終濃度100 nMになるように添加する。
(3) 各ウェルにZ-Arg-Leu-Arg-Gly-Gly-AMCストック溶液を5 μL添加し、最終濃度50 μMにする。
(4) 基質の加水分解はマイクロプレートリーダーを使用してモニターする。励起波長は340 nm、発光波長は450 nmとし、蛍光信号を3分ごとに記録する。
注: このプロトコルは、Z-Arg-Leu-Arg-Gly-Gly-AMCを使用したPLpro活性の測定に関するガイダンスである。他の文献および具体的な実験要件に基づいて調整することができる。
参考文献：
[1]Fu Z, Huang B, Tang J, et al. The complex structure of GRL0617 and SARS-CoV-2 PLpro reveals a hot spot for antiviral drug discovery[J]. Nature communications, 2021, 12(1): 488.
| Cas No. | 167698-69-3 | SDF | |
| Formula | C40H56N12O9 | M.Wt | 848.96 |
| 溶解度 | Soluble in DMSO | Storage | Store at -20°C |
| General tips | Please select the appropriate solvent to prepare the stock solution according to the
solubility of the product in different solvents; once the solution is prepared, please store it in
separate packages to avoid product failure caused by repeated freezing and thawing.Storage method
and period of the stock solution: When stored at -80°C, please use it within 6 months; when stored
at -20°C, please use it within 1 month. To increase solubility, heat the tube to 37°C and then oscillate in an ultrasonic bath for some time. |
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| Shipping Condition | Evaluation sample solution: shipped with blue ice. All other sizes available: with RT, or with Blue Ice upon request. | ||
| Prepare stock solution | |||
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1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 1.1779 mL | 5.8896 mL | 11.7791 mL |
| 5 mM | 235.6 μL | 1.1779 mL | 2.3558 mL |
| 10 mM | 117.8 μL | 589 μL | 1.1779 mL |
Step 1: Enter information below (Recommended: An additional animal making an allowance for loss during the experiment)
g
μL
Step 2: Enter the in vivo formulation (This is only the calculator, not formulation. Please contact us first if there is no in vivo formulation at the solubility Section.)
Calculation results:
Working concentration: mg/ml;
Method for preparing DMSO master liquid: mg drug pre-dissolved in μL DMSO ( Master liquid concentration mg/mL, Please contact us first if the concentration exceeds the DMSO solubility of the batch of drug. )
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next addμL PEG300, mix and clarify, next addμL Tween 80, mix and clarify, next add μL saline, mix and clarify.
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next add μL Corn oil, mix and clarify.
Note: 1. Please make sure the liquid is clear before adding the next solvent.
2. Be sure to add the solvent(s) in order. You must ensure that the solution obtained, in the previous addition, is a clear solution before proceeding to add the next solvent. Physical methods such as vortex, ultrasound or hot water bath can be used to aid dissolving.
3. All of the above co-solvents are available for purchase on the GlpBio website.
Quality Control & SDS
- View current batch:
- Purity: >98.00% Appearance: A solid
- COA (Certificate of Analysis)
- SDS (Safety Data Sheet)
- Datasheet
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