Green CMFDA (Synonyms: 5-Chloromethylfluorescein diacetate) |
Catalog No.GC43783
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Green CMFDA는 세포 투과성 형광 프로브 (Ex=485nm; Em=514nm)이고 세포 추적자로 사용될 수 있다.
Products are for research use only. Not for human use. We do not sell to patients.
Cas No.: 136832-63-8
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
Green CMFDA는 세포 투과성 형광 프로브 (Ex=485nm; Em=514nm)이고 세포 추적자로 사용될 수 있다. 생체 세포에 들어가면 Green CMFDA는 살아있는 세포에 공통적으로 존재하는 비특이적 에스테라제에 의해 절단되고 형광 화합물인 플루오레세인을 생성해서 휴면과 관련된 변화를 정확하게 반영하여 공생체를 보유한 공보류를 이용한 실험실 실험에 유용하게 사용될 수 있다[2]. Green CMFDA 염색은 인간 골수 유래 중간엽 줄기세포 (hBM-MSCs)의 생존력을 감소시키고 세포 형태에 변화를 유발해서 대사 활성의 감소와 동반된다[3]. Green CMFDA는 살아있는 공배양 세포를 표지하기 위해 일반적으로 사용되고 있어 실시간 영상 분석 및 흡착 측정을 용이하게 한다[4].
Green CMFDA를 이용한 세포 표지
본 프로토콜은 지침만을 제공하고 특정 필요에 따라 수정하시기 바랍니다.
1.세포 염색을 위한 원액 및 희석 용액 조제
(1) Green CMFDA 가루를 DMSO에 녹여 Green CMFDA 원액 (10mM)을 조제한 후 적절한 부피로 분주하고 -20°C에서 보관합니다.
(2) Green CMFDA 원액을 PBS로 희석해서 최종 농도 1µM을 맞춥니다.
참고: 작업액은 실험 당일 신선하게 조제해야 합니다.
2.세포 준비
실험 규모에 따라 배양한 세포를 6-웰 판 또는 60mm 배양 접시에 접종해서 37°C에서 배양합니다.
3.세포 표지 및 분석
(1) PBS로 세포를 두 번 세척합니다.
(2) PBS에 희석해서 최종 농도 1μM이 된 Green CMFDA를 넣고 37°C에서 30분 동안 빛을 차단한 채로 부드럽게 흔들어주고 배양합니다.
(3) 세포를 1.5ml 튜브에 모은 후 500g에서 10분 동안 원심분리하고 상층액을 버립니다.
(4) 배양액으로 세포를 재부유시킨 후 유세포 분석기 또는 형광 현미경을 사용해서 분석합니다.
4.실험할 때 주의 사항
(1) Green CMFDA가 빛으로부터 충분하게 보호되도록 해야 합니다.
(2) 본 프로토콜과 모든 시약은 오직 과학 연구용으로만 사용됩니다.
| Cas No. | 136832-63-8 | SDF | |
| Synonyms | 5-Chloromethylfluorescein diacetate | ||
| Chemical Name | 3',6'-bis(acetyloxy)-5-(chloromethyl)-spiro[isobenzofuran-1(3H),9'-[9H]xanthen]-3-one | ||
| Canonical SMILES | O=C(O1)C2=C(C=CC(CCl)=C2)C31C4=CC=C(OC(C)=O)C=C4OC5=C3C=CC(OC(C)=O)=C5 | ||
| Formula | C25H17ClO7 | M.Wt | 464.9 |
| Solubility | 0.1 M Na2CO3: 5 mg/mL,DMF: 25 mg/mL,DMSO: 33 mg/mL,Ethanol: 25 mg/mL,PBS (pH 7.2): 20 µ g/ml | Storage | Store at -20°C, protect from light |
| General tips | Please select the appropriate solvent to prepare the stock solution according to the
solubility of the product in different solvents; once the solution is prepared, please store it in
separate packages to avoid product failure caused by repeated freezing and thawing.Storage method
and period of the stock solution: When stored at -80°C, please use it within 6 months; when stored
at -20°C, please use it within 1 month. To increase solubility, heat the tube to 37°C and then oscillate in an ultrasonic bath for some time. |
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| Shipping Condition | Evaluation sample solution: shipped with blue ice. All other sizes available: with RT, or with Blue Ice upon request. | ||
| Prepare stock solution | |||
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1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 2.151 mL | 10.755 mL | 21.51 mL |
| 5 mM | 430.2 μL | 2.151 mL | 4.302 mL |
| 10 mM | 215.1 μL | 1.0755 mL | 2.151 mL |
Step 1: Enter information below (Recommended: An additional animal making an allowance for loss during the experiment)
g
μL
Step 2: Enter the in vivo formulation (This is only the calculator, not formulation. Please contact us first if there is no in vivo formulation at the solubility Section.)
Calculation results:
Working concentration: mg/ml;
Method for preparing DMSO master liquid: mg drug pre-dissolved in μL DMSO ( Master liquid concentration mg/mL, Please contact us first if the concentration exceeds the DMSO solubility of the batch of drug. )
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next addμL PEG300, mix and clarify, next addμL Tween 80, mix and clarify, next add μL saline, mix and clarify.
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next add μL Corn oil, mix and clarify.
Note: 1. Please make sure the liquid is clear before adding the next solvent.
2. Be sure to add the solvent(s) in order. You must ensure that the solution obtained, in the previous addition, is a clear solution before proceeding to add the next solvent. Physical methods such as vortex, ultrasound or hot water bath can be used to aid dissolving.
3. All of the above co-solvents are available for purchase on the GlpBio website.
Quality Control & SDS
- View current batch:
- Purity: >99.50% Appearance: A solid
- COA (Certificate of Analysis)
- SDS (Safety Data Sheet)
- Datasheet
Average Rating: 5 (Based on Reviews and 10 reference(s) in Google Scholar.)