CL264 es un ligando potente y altamente específico del receptor tipo toll 7 (TLR7). Las células inmunitarias utilizan los receptores tipo toll (TLRs) para detectar patrones moleculares asociados a patógenos (PAMPs), lo que representa el punto de partida de la respuesta inmune innata s[1].
Usando concentraciones de 0,5 a 10 µg/mL, la estimulación con CL264 resultó en una secreción dependiente de la dosis de TNF-α después de 6 horas. Las células CAL-1 fueron estimuladas con CL264 (5 µg/mL) por hasta 12 horas. Las células CAL-1 fueron sembradas en placas de 96 pocillos. Después de un reposo nocturno, las células fueron estimuladas con CL264 o 9.2s RNA o la combinación de ambos. Después de la incubación, según lo indicado, el sobrenadante celular fue analizado para TNF-α, IL-6 e IFN-β mediante ELISA. CL264 condujo a una liberación robusta y dependiente del tiempo de TNF-α, alcanzando niveles absolutos de 1347 pg/mL de TNF-α en el sobrenadante[1]. Las células mononucleares de sangre periférica (PBMCs) estimuladas con CL264, IL-6, IL-8 e IL-12 fueron significativamente estimuladas[2].
El agonista TLR7 CL264, 40 μg/inyección los días 0, 3 y 6 después del injerto tumoral, estimuló el crecimiento tumoral, y este efecto pro-tumorogénico se perdió completamente en ausencia de MDSCs, tanto en ratones WT como en ratones TLR7 KO. El efecto exacerbador del crecimiento tumoral por la estimulación de TLR7 es mediado por el aumento del número de MDSCs dentro del microambiente tumoral. La secreción de CCL2 y GM-CSF por células tumorales fue confirmada in vitro, y se encontró aumentada en los sobrenadantes de células estimuladas con CL264. Estos resultados sugieren que CL264 puede estimular el reclutamiento de MDSCs mediante la inducción de CCL2 y GM-CSF.[3].
References:
[1].Hilbert T, Steinhagen F, et al. Synergistic Stimulation with Different TLR7 Ligands Modulates Gene Expression Patterns in the Human Plasmacytoid Dendritic Cell Line CAL-1. Mediators Inflamm. 2015;2015:948540.
[2].Dajon M, Iribarren K, et al. Toll like receptor 7 expressed by malignant cells promotes tumor progression and metastasis through the recruitment of myeloid derived suppressor cells. Oncoimmunology. 2018 Oct 11;8(1):e1505174.