BAPTA |
Catalog No.GC17574
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BAPTA est un chélateur hautement sélectif de Ca2+ utilisé pour analyser les rôles du calcium dans diverses fonctions cellulaires.
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Cas No.: 85233-19-8
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
BAPTA est un chélateur hautement sélectif de Ca2+ utilisé pour analyser les rôles du calcium dans diverses fonctions cellulaires[1-2]. L'affinité de BAPTA pour Ca2+ peut être renforcée ou affaiblie respectivement par des substituants donneurs ou attracteurs d'électrons sur les cycles aromatiques. La liaison du Ca2+ à BAPTA est indépendante de pH dans les cellules[3]. De plus, BAPTA peut directement inhiber l'activité de la 6-phosphofructo-2-kinase/fructose-2,6-bisphosphatase 3 (PFKFB3)humaine purifiée[4].
In vitro, le traitement des neurones mécaniquement lésés avec BAPTA à 10, 20 ou 40μM a entraîné une réduction dose-dépendante des cellules marquées par la technique TUNEL (Terminal deoxynucleotidyl transferase dUTP nick end labeling), avec une protection maximale observée à 40μM[5]. Le traitement des cellules HEK293T avec des concentrations croissantes de BAPTA (0.1, 1 et 10mM) a progressivement augmenté la probabilité d'ouverture du canal chlorure activé par le calcium endogène ANO6 (TMEM16F)[6]. BAPTA (0-10mM) inhibe l'activité de la phospholipase C (PLC) de manière dose-dépendante et indépendante du Ca2+[7].
In vivo, après une lésion complète de sectionnement de la moelle épinière, l'application topique de 10 mM de BAPTA sur le site lésionnel chez des souris BALB/c femelles a entraîné un poids corporel et des scores mBBB (Modified Basso Beattie Bresnahan) significativement plus élevés que chez les témoins traités par véhicule[4]. L'iontophorèse de 150 mM de BAPTA dans l'endolymphe au scinque à queue courte in vivo a provoqué un déplacement vers le bas de la fréquence des pics d'émissions otoacoustiques spontanées (SOAE) individuelles, nécessitant plus d'une heure pour récupérer[8].
References:
[1] Saoudi Y, Rousseau B, Doussière J, et al. Calcium-independent cytoskeleton disassembly induced by BAPTA. Eur J Biochem. 2004;271(15):3255-3264.
[2] Tsien RY. New calcium indicators and buffers with high selectivity against magnesium and protons: design, synthesis, and properties of prototype structures. Biochemistry. 1980;19(11):2396-2404.
[3] Sneyers F, Speelman-Rooms F, Verhelst SHL, Bootman MD, Bultynck G. Cellular effects of BAPTA: Are they only about Ca2+ chelation?. Biochim Biophys Acta Mol Cell Res. 2024;1871(2):119589.
[4] Sneyers F, Kerkhofs M, Speelman-Rooms F, et al. Intracellular BAPTA directly inhibits PFKFB3, thereby impeding mTORC1-driven Mcl-1 translation and killing MCL-1-addicted cancer cells. Cell Death Dis. 2023;14(9):600.
[5] Kang KR, Kim J, Ryu B, et al. BAPTA, a calcium chelator, neuroprotects injured neurons in vitro and promotes motor recovery after spinal cord transection in vivo. CNS Neurosci Ther. 2021;27(8):919-929.
[6] Kolesnikov DO, Nomerovskaya MA, Grigorieva ER, et al. Calcium chelation independent effects of BAPTA on endogenous ANO6 channels in HEK293T cells. Biochem Biophys Res Commun. 2024;693:149378.
[7] Hardie RC. Inhibition of phospholipase C activity in Drosophila photoreceptors by 1,2-bis(2-aminophenoxy)ethane N,N,N',N'-tetraacetic acid (BAPTA) and di-bromo BAPTA. Cell Calcium. 2005;38(6):547-556.
[8] Manley GA, Kirk DL. BAPTA induces frequency shifts in vivo of spontaneous otoacoustic emissions of the bobtail lizard. Audiol Neurootol. 2005;10(5):248-257.
| Expérience sur la kinase [1]: | |
Méthode de préparation | L'activité kinase de l'enzyme humaine recombinante purifiée 6-phosphofructo-2-kinase/fructose-2,6-bisphosphatase 3 (PFKFB3) a été mesurée à l'aide d'un test biochimique accelulaire basé sur la quantification de la production d'ADP en présence de différentes concentrations de BAPTA (variant de 1µM à 1mM). |
Conditions de réaction | 1µM - 1mM |
Domaines d'application | BAPTA a directement inbibé l'activité de PFKFB3. |
| Expériences cellulaires [2]: | |
Lignées cellulaires | Neurones |
Méthode de préparation | Pour endommager physiquement les neurones, 100mg de billes de verre ont été mélangés avec des neurones différenciés recouverts de DPBS. Les plaques ont été document agitées trois fois pour permettre aux billes de rouler sur les cellules. DPBS et les billes de verre ont été éliminés par aspiration. Avant l'expérience, BAPTA a été préparé par dilution dans DMEM/F12 à des concentrations finales de 10μM, 20μM et 40μM. Chacune des préparations de BAPTA (groupe témoin véhicule) a été délicatement appliquée sur les cellules. Ensuite, la plaque a été incubée à 37°C pendant 30 minutes pour permettre à BAPTA de protéger les cellules endommagées. Durant ce processus, le groupe sham n' a pas été endommagé et aucune substance spécifique n'a été applilquée. Les cellules ont été détachées par traitement avec TrypLE et incubation de la plaque à 37°C pendant 5 minutes. Finalement, les cellules ont été collectées dans DMEM/F12. |
Conditions de réaction | 10, 20 et 40μM; 30min |
Domaines d'application | Dans le groupe traité à BAPTA, 5.3% des cellules s'étaient détachées de la plaque, contre 14.5% dans le groupe témoin véhicule. En microscopie électronique à balayage (MEB), les neurones du groupe témoin véhicule présentaient des traits apoptotiques. Le nombre de cellules marquées positives par la méthode TUNEL (Terminal deoxynucleotidyl transferase dUTP nick end labeling) était significativement réduit de manière dose-dépendante, et à 40μM, BAPTA s'est montré maximalement efficace. |
| Expériences animales [3]: | |
Modèles animaux | Souris femelles BALB/c |
Méthode de préparation | Des souris femelles BALB/c âgées de six semaines ont été anesthésiées en utilisant du Zoletil (mélange 1:1 de tiletamine et de zolazépam) et de la xylazine (ratio 3:1 , 1mL/kg). Une laminectomie spinale a été réalisée au niveau de la vertèbre T9. Pour le traitement, 20μL de BAPTA à 10mM dilué dans DPBS et de DPBS seul ont été préparés. BAPTA ou DPBS a été appliqué goutte à goutte sur le site de section complète à l'aide d'une pipette, constituant respectivement le groupe BAPTA et le groupe témoin véhicule. Le muscle et le fascia ont été suturés, et la peau a été refermée. Après la chirurgie, de l'eau supplémentaire et de la nourriture broyée ont été fournis pendant les 14 premiers jours suivant la lésion de la moelle épinière (SCI). Les vessies des souris ont été vidangées manuellement trois fois par jour. Les animaux du groupe sham ont été soumis aux mêmes procédures chirurgicales, à l'exception de la lésion de la moelle épinière. |
Forme de dosage | 20μL, 10mM; application topique |
Domaines d'application | Les scores mBBB (Modified Basso Beattie Bresnahan) du groupe BAPTA étaient significativement plus élevés que ceux du groupe témoin véhicule à partir du 3ème jour suivant la lésion médullaire (SCI). Le poids corporel du groupe BAPTA était significativement plus important que celui du groupe témoin véhicule à partir du 23ème jour suivant la lésion médullaire. |
References: | |
| Cas No. | 85233-19-8 | SDF | |
| Chemical Name | 2,2',2'',2'''-(((ethane-1,2-diylbis(oxy))bis(2,1-phenylene))bis(azanetriyl))tetraacetic acid | ||
| Canonical SMILES | OC(CN(CC(O)=O)C1=CC=CC=C1OCCOC2=CC=CC=C2N(CC(O)=O)CC(O)=O)=O | ||
| Formula | C22H24N2O10 | M.Wt | 476.23 |
| Solubility | DMF: 20 mg/ml,DMSO: 20 mg/ml,DMSO:PBS (pH 7.2) (1:1): 0.5 mg/ml | Storage | Store at -20°C |
| General tips | Please select the appropriate solvent to prepare the stock solution according to the
solubility of the product in different solvents; once the solution is prepared, please store it in
separate packages to avoid product failure caused by repeated freezing and thawing.Storage method
and period of the stock solution: When stored at -80°C, please use it within 6 months; when stored
at -20°C, please use it within 1 month. To increase solubility, heat the tube to 37°C and then oscillate in an ultrasonic bath for some time. |
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| Shipping Condition | Evaluation sample solution: shipped with blue ice. All other sizes available: with RT, or with Blue Ice upon request. | ||
| Prepare stock solution | |||
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1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 2.0998 mL | 10.4991 mL | 20.9983 mL |
| 5 mM | 420 μL | 2.0998 mL | 4.1997 mL |
| 10 mM | 210 μL | 1.0499 mL | 2.0998 mL |
Step 1: Enter information below (Recommended: An additional animal making an allowance for loss during the experiment)
g
μL
Step 2: Enter the in vivo formulation (This is only the calculator, not formulation. Please contact us first if there is no in vivo formulation at the solubility Section.)
Calculation results:
Working concentration: mg/ml;
Method for preparing DMSO master liquid: mg drug pre-dissolved in μL DMSO ( Master liquid concentration mg/mL, Please contact us first if the concentration exceeds the DMSO solubility of the batch of drug. )
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next addμL PEG300, mix and clarify, next addμL Tween 80, mix and clarify, next add μL saline, mix and clarify.
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next add μL Corn oil, mix and clarify.
Note: 1. Please make sure the liquid is clear before adding the next solvent.
2. Be sure to add the solvent(s) in order. You must ensure that the solution obtained, in the previous addition, is a clear solution before proceeding to add the next solvent. Physical methods such as vortex, ultrasound or hot water bath can be used to aid dissolving.
3. All of the above co-solvents are available for purchase on the GlpBio website.
Quality Control & SDS
- View current batch:
- Purity: >98.00% Appearance: A solid
- COA (Certificate of Analysis)
- SDS (Safety Data Sheet)
- Datasheet
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