BAPTA |
Catalog No.GC17574
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BAPTA es un quelante altamente selectivo de Ca2+utilizado para diseccionar las funciones del calcio en diversas funciones celulares
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Cas No.: 85233-19-8
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
BAPTA es un quelante altamente selectivo de Ca2+utilizado para diseccionar las funciones del calcio en diversas funciones celulares[1-2]. La afinidad de BAPTA por Ca2+ puede fortalecerse o debilitarse mediante sustituyentes donantes o retiradas de electrones en los anillos aromáticos, respectivamente. La unión de Ca2+ a BAPTA es independiente del pH dentro de las células[3]. Además, BAPTA puede inhibir directamente la actividad humana purificada de 6-phosphofructo-2-kinase/fructose-2,6-bisphosphatase 3 (PFKFB3)[4].
In vitro, el tratamiento de neuronas lesionadas mecánicamente con BAPTA a 10, 20 o 40μM resultó en una reducción dependiente de la dosis en las células positivas de marcado final de corte de deoxynucleotidyl transferasa dUTP terminal (TUNEL), con protección máxima observada a 40μM[5]. El tratamiento HEK293T con concentraciones crecientes de BAPTA (0.1, 1 y 10mM) elevó progresivamente la probabilidad de canal abierto del canal de cloruro activado por calcio endógeno ANO6 (TMEM16F)[6]. BAPTA (0-10mM) inhibela actividad de la fosfolipasa C (PLC) de una manera dependiente de la dosis independientemente de Ca2+[7].
In vivo, después de una lesión completa de la médula espinal de transección, la aplicación tópica de BAPTA 10mM al sitio de la lesión en ratones BALB/c hembras resultó en un peso corporal significativamente mayor y puntuaciones de Modified Basso Beattie Bresnahan (mBBB) que en los controles tratados con vehículos[4]. Iontophoresis de 150mM de BAPTA en la endolinfa de la piel de cola de caballo in vivo causó un cambio descendente en la frecuencia de los picos individuales de emisión otoacústica espontánea (SOAE), con una recuperación que requiere más de una hora[8].
References:
[1] Saoudi Y, Rousseau B, Doussière J, et al. Calcium-independent cytoskeleton disassembly induced by BAPTA. Eur J Biochem. 2004;271(15):3255-3264.
[2] Tsien RY. New calcium indicators and buffers with high selectivity against magnesium and protons: design, synthesis, and properties of prototype structures. Biochemistry. 1980;19(11):2396-2404.
[3] Sneyers F, Speelman-Rooms F, Verhelst SHL, Bootman MD, Bultynck G. Cellular effects of BAPTA: Are they only about Ca2+ chelation?. Biochim Biophys Acta Mol Cell Res. 2024;1871(2):119589.
[4] Sneyers F, Kerkhofs M, Speelman-Rooms F, et al. Intracellular BAPTA directly inhibits PFKFB3, thereby impeding mTORC1-driven Mcl-1 translation and killing MCL-1-addicted cancer cells. Cell Death Dis. 2023;14(9):600.
[5] Kang KR, Kim J, Ryu B, et al. BAPTA, a calcium chelator, neuroprotects injured neurons in vitro and promotes motor recovery after spinal cord transection in vivo. CNS Neurosci Ther. 2021;27(8):919-929.
[6] Kolesnikov DO, Nomerovskaya MA, Grigorieva ER, et al. Calcium chelation independent effects of BAPTA on endogenous ANO6 channels in HEK293T cells. Biochem Biophys Res Commun. 2024;693:149378.
[7] Hardie RC. Inhibition of phospholipase C activity in Drosophila photoreceptors by 1,2-bis(2-aminophenoxy)ethane N,N,N',N'-tetraacetic acid (BAPTA) and di-bromo BAPTA. Cell Calcium. 2005;38(6):547-556.
[8] Manley GA, Kirk DL. BAPTA induces frequency shifts in vivo of spontaneous otoacoustic emissions of the bobtail lizard. Audiol Neurootol. 2005;10(5):248-257.
| Experimento con quinasas [1]: | |
Método de preparación | Se midió la actividad de la quinasa de la enzima recombinante y purificada 6-fosfofructo-2-quinasa/fructosa-2,6-bisfosfatasa 3 (PFKFB3) utilizando un ensayo bioquímico libre de células basado en la medición de la producción de ADP en presencia de diferentes concentraciones de BAPTA (que van de 1µM a 1mM). |
Condiciones de reacción | 1µM-1mM |
Áreas de aplicación | BAPTA inhibió directamente la actividad de PFKFB3. |
| Experimentos celulares [2]: | |
Líneas celulares | Neuronas |
Método de preparación | Para dañar físicamente las neuronas, se mezclaron 100 mg de perlas de vidrio con neuronas diferenciadas hundidas con DPBS. Las placas se balancearon suavemente tres veces para dejar que las cuentas rodaran sobre las celdas. El DPBS y las cuentas de vidrio se eliminaron por succión. Antes del experimento, BAPTA se preparó diluyendo en DMEM/F12 a concentraciones finales de 10μM, 20μM y 40μM. Cada uno de los BAPTA (grupo BAPTA) o DPBS (grupo de control de vehículos) preparados se trató suavemente en la célula. Luego, la placa se incubó a 37 °C durante 30 minutos para que BAPTA pudiera proteger las células dañadas. Durante este proceso, el grupo de la farsa no se dañó y no se trataron sustancias específicas. Las células se separaron mediante tratamiento con TrypLE e incubando la placa a 37°C durante 5 minutos. Finalmente, las células se recogieron en DMEM/F12. |
Condiciones de reacción | 10, 20 y 40 μM; 30 minutos |
Áreas de aplicación | En el grupo tratado con BAPTA, el 5,3 % de las células se habían desprendido de la placa, frente al 14,5 % en el grupo de control del vehículo. Bajo SEM, las neuronas en el grupo de control del vehículo mostraron rasgos apoptóticos. El número de células terminales de desoxinucleotidil transferasa dUTP nick-labeling end (TUNEL)-positivas disminuyó significativamente de manera dependiente de la dosis, y a 40 μM, BAPTA fue máximo efectivo. |
| Experimentos con animales [2]: | |
Modelos animales | Ratones hembra BALB/c |
Método de preparación | Los ratones hembras BALB/c de seis semanas de edad fueron anestesiados usando Zoletil (compuesto 1:1 de tiletamina y zolazepam) y xilazina (proporción 3:1, 1 ml/kg). La laminectomía espinal se realizó a nivel T9. Para el tratamiento, se prepararon 20 μL de BAPTA 10mM diluido en DPBS y DPBS. El BAPTA o DPBS se trató en gotas en el punto de transección completa con una pipeta y se organizó en el grupo BAPTA y el grupo de control de vehículos, respectivamente. El músculo y la fascia fueron suturados, y la piel fue cerrada. Después de la cirugía, se proporcionó agua adicional y alimentos triturados durante los primeros 14 días después de la lesión de la médula espinal (SCI). A los ratones se les expresaban la vejiga manualmente tres veces al día. Los animales de un grupo simular fueron sometidos a los mismos procedimientos quirúrgicos, excepto que las médulas espinales no se lesionaron. |
Forma de dosificación | 20 μL, 10mM; aplicación tópica |
Áreas de aplicación | Las puntuaciones de Basso Beattie Bresnahan modificado (mBBB) en el grupo BAPTA fueron significativamente más altas que las puntuaciones del control del vehículo del tercer día después de SCI. El peso corporal del grupo BAPTA fue significativamente mayor que el del control del vehículo desde el día 23 después de SCI. |
References: | |
| Cas No. | 85233-19-8 | SDF | |
| Chemical Name | 2,2',2'',2'''-(((ethane-1,2-diylbis(oxy))bis(2,1-phenylene))bis(azanetriyl))tetraacetic acid | ||
| Canonical SMILES | OC(CN(CC(O)=O)C1=CC=CC=C1OCCOC2=CC=CC=C2N(CC(O)=O)CC(O)=O)=O | ||
| Formula | C22H24N2O10 | M.Wt | 476.23 |
| Solubility | DMF: 20 mg/ml,DMSO: 20 mg/ml,DMSO:PBS (pH 7.2) (1:1): 0.5 mg/ml | Storage | Store at -20°C |
| General tips | Please select the appropriate solvent to prepare the stock solution according to the
solubility of the product in different solvents; once the solution is prepared, please store it in
separate packages to avoid product failure caused by repeated freezing and thawing.Storage method
and period of the stock solution: When stored at -80°C, please use it within 6 months; when stored
at -20°C, please use it within 1 month. To increase solubility, heat the tube to 37°C and then oscillate in an ultrasonic bath for some time. |
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| Shipping Condition | Evaluation sample solution: shipped with blue ice. All other sizes available: with RT, or with Blue Ice upon request. | ||
| Prepare stock solution | |||
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1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 2.0998 mL | 10.4991 mL | 20.9983 mL |
| 5 mM | 420 μL | 2.0998 mL | 4.1997 mL |
| 10 mM | 210 μL | 1.0499 mL | 2.0998 mL |
Step 1: Enter information below (Recommended: An additional animal making an allowance for loss during the experiment)
g
μL
Step 2: Enter the in vivo formulation (This is only the calculator, not formulation. Please contact us first if there is no in vivo formulation at the solubility Section.)
Calculation results:
Working concentration: mg/ml;
Method for preparing DMSO master liquid: mg drug pre-dissolved in μL DMSO ( Master liquid concentration mg/mL, Please contact us first if the concentration exceeds the DMSO solubility of the batch of drug. )
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next addμL PEG300, mix and clarify, next addμL Tween 80, mix and clarify, next add μL saline, mix and clarify.
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next add μL Corn oil, mix and clarify.
Note: 1. Please make sure the liquid is clear before adding the next solvent.
2. Be sure to add the solvent(s) in order. You must ensure that the solution obtained, in the previous addition, is a clear solution before proceeding to add the next solvent. Physical methods such as vortex, ultrasound or hot water bath can be used to aid dissolving.
3. All of the above co-solvents are available for purchase on the GlpBio website.
Quality Control & SDS
- View current batch:
- Purity: >98.00% Appearance: A solid
- COA (Certificate of Analysis)
- SDS (Safety Data Sheet)
- Datasheet
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