BAPTA |
カタログ番号GC17574
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BAPTAは高Ca2+-選択性のキレート剤であり、多様な細胞機能におけるカルシウムの役割の分析に使われる。
Products are for research use only. Not for human use. We do not sell to patients.
Cas No.: 85233-19-8
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
BAPTAは高Ca2+-選択性のキレート剤であり、多様な細胞機能におけるカルシウムの役割の分析に使われる[1-2]。Ca2+に対するBAPTAの親和性は、それぞれ、芳香環上の電子供与性置換基または電子供与性置換基で増強され、または弱化される。BAPTAへのCa2+の結合は細胞内では、pHに依存しない[3]。さらに、BAPTAは精製ヒト6-ホスホフルクト-2-キナーゼ/フルクトース-2,6-ビスホスファターゼ3（PFKFB3）活性を直接阻害できる[4]。
体外で、機械的損傷を受けたニューロンを10、20、または40μMのBAPTAで処理した結果、末端デオキシヌクレオチドトランスフェラーゼdUTPニック末端標識（TUNEL）陽性細胞を用量依存的に減らし、最大の保護作用は40μMで観察された[5]。増加する濃度のBAPTA (0.1, 1と10mM)でHEK293T細胞を処理した結果、内因性カルシウム活性化塩素イオンチャネルANO6（TMEM16F）の開口確率を上昇させた[6]。BAPTA（0～10mM）は、Ca2+と独立して、用量依存的にホスホリパーゼC（PLC）の活性を阻害する[7]。
体内で、完全な脊髄損傷後、10mM BAPTAを雌BALB/cマウスの病変部位に塗布した結果、溶媒処理の対照群と比べ、体重とModified Basso Beattie Bresnahan (mBBB)スコアは、より高かった[4]。150mM BAPTAをボブテイルスキンクの体内リンパにイオン導入した結果、個々の自発耳音響放射（SOAE）のピーク周波数が低下し、回復するまでには1時間以上かかった[8]。
References:
[1] Saoudi Y, Rousseau B, Doussière J, et al. Calcium-independent cytoskeleton disassembly induced by BAPTA. Eur J Biochem. 2004;271(15):3255-3264.
[2] Tsien RY. New calcium indicators and buffers with high selectivity against magnesium and protons: design, synthesis, and properties of prototype structures. Biochemistry. 1980;19(11):2396-2404.
[3] Sneyers F, Speelman-Rooms F, Verhelst SHL, Bootman MD, Bultynck G. Cellular effects of BAPTA: Are they only about Ca2+ chelation?. Biochim Biophys Acta Mol Cell Res. 2024;1871(2):119589.
[4] Sneyers F, Kerkhofs M, Speelman-Rooms F, et al. Intracellular BAPTA directly inhibits PFKFB3, thereby impeding mTORC1-driven Mcl-1 translation and killing MCL-1-addicted cancer cells. Cell Death Dis. 2023;14(9):600.
[5] Kang KR, Kim J, Ryu B, et al. BAPTA, a calcium chelator, neuroprotects injured neurons in vitro and promotes motor recovery after spinal cord transection in vivo. CNS Neurosci Ther. 2021;27(8):919-929.
[6] Kolesnikov DO, Nomerovskaya MA, Grigorieva ER, et al. Calcium chelation independent effects of BAPTA on endogenous ANO6 channels in HEK293T cells. Biochem Biophys Res Commun. 2024;693:149378.
[7] Hardie RC. Inhibition of phospholipase C activity in Drosophila photoreceptors by 1,2-bis(2-aminophenoxy)ethane N,N,N',N'-tetraacetic acid (BAPTA) and di-bromo BAPTA. Cell Calcium. 2005;38(6):547-556.
[8] Manley GA, Kirk DL. BAPTA induces frequency shifts in vivo of spontaneous otoacoustic emissions of the bobtail lizard. Audiol Neurootol. 2005;10(5):248-257.
| キナーゼ実験 [1]: | |
準備方法 | 様々な濃度のBAPTA（範囲は1µMから1mM）の存在下で、ADPの生産を測定したのに基づき、細胞フリーの生物化学分析法を使い、組み換え、精製のヒト6-ホスホフルクト-2-キナーゼ/フルクトース-2,6-ビスホスファターゼ3（PFKFB3）のキナーゼ活性を測定した。 |
反応条件 | 1µM-1mM |
アプリケーション | BAPTAは、PFKFB3活性を直接阻害した。 |
| 細胞実験[2]: | |
細胞株 | ニューロン |
準備方法 | 物理的に損傷するニューロンについて、DPBSに沈んだ分化されたニューロンとともに、100mgのガラスビーズを混合した。プレートを3回ゆっくり振盪し、ビーズを細胞の上に転がらせた。DPBSとガラスビーズを吸引除去した。実験の前に、10μM, 20μMと40μMの最終濃度で、DMEM/F12で希釈することでBAPTAを調製した。調製された各BAPTA (BAPTA群)またはDPBS (溶媒対照群)を細胞でゆっくり処理した。その後、プレートを37℃、30分間培養し、BAPTAに損傷細胞を保護させた。このプロセス中に、模擬手術群を変化せず、特定の基質を処理しなかった。TrypLEと処理し、37℃でプレートを5分間培養することで、細胞を剥離した。最後に、細胞をDMEM/F12で採取した。 |
反応条件 | 10, 20と40μM；30分間 |
アプリケーション | BAPTA処理群で、5.3%の細胞はプレートから分離され、対して溶媒対照群では14.5%であった。SEM下で、溶媒対照群の中のニューロンはアポトーシス特性を示した。末端デオキシヌクレオチド転移酵素dUTPニック末端標識（TUNEL）陽性の細胞の数は、用量依存的に著しく減少し、40μMで、BAPTAの効率は最大に達した。 |
| 動物実験 [2]: | |
動物モデル | 雌のBALB/cマウス |
準備方法 | Zoletil (tiletamineとzolazepamの1:1複合薬)とxylazine (3:1 ratio, 1mL/kg)を使い、6週齢の雌のBALB/cマウスを麻酔した。T9レベルで、脊椎椎弓切除術を行った。処理については、DPBSに希釈された20μLの10mM BAPTAとDPBSを調製した。BAPTAまたはDPBSをピペットで完全切断スポットに滴下し、それぞれBAPTA群と溶媒対照群に配置した。筋肉と筋膜を縫合し、皮膚を閉じた。術後、脊髄損傷（SCI）後の最初の14日間で、追加の水と砕いたの食物を提供した。1日に3回、マウスの膀胱を手動で圧迫した。模擬手術群の動物には、脊髄損傷を除いて、同じ手術処置を行った。 |
投与形態 | 20μL、10mM；塗布 |
アプリケーション | BAPTA群におけるModified Basso Beattie Bresnahan (mBBB)スコアは、SCI後の3日目から、溶媒対照群のスコアよりも著しく高かった。BAPTA群の体重は、SCI後の23日目から、溶媒対照群のより著しく高かった。 |
References: | |
| Cas No. | 85233-19-8 | SDF | |
| Chemical Name | 2,2',2'',2'''-(((ethane-1,2-diylbis(oxy))bis(2,1-phenylene))bis(azanetriyl))tetraacetic acid | ||
| Canonical SMILES | OC(CN(CC(O)=O)C1=CC=CC=C1OCCOC2=CC=CC=C2N(CC(O)=O)CC(O)=O)=O | ||
| Formula | C22H24N2O10 | M.Wt | 476.23 |
| 溶解度 | DMF: 20 mg/ml,DMSO: 20 mg/ml,DMSO:PBS (pH 7.2) (1:1): 0.5 mg/ml | Storage | Store at -20°C |
| General tips | Please select the appropriate solvent to prepare the stock solution according to the
solubility of the product in different solvents; once the solution is prepared, please store it in
separate packages to avoid product failure caused by repeated freezing and thawing.Storage method
and period of the stock solution: When stored at -80°C, please use it within 6 months; when stored
at -20°C, please use it within 1 month. To increase solubility, heat the tube to 37°C and then oscillate in an ultrasonic bath for some time. |
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| Shipping Condition | Evaluation sample solution: shipped with blue ice. All other sizes available: with RT, or with Blue Ice upon request. | ||
| Prepare stock solution | |||
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1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 2.0998 mL | 10.4991 mL | 20.9983 mL |
| 5 mM | 420 μL | 2.0998 mL | 4.1997 mL |
| 10 mM | 210 μL | 1.0499 mL | 2.0998 mL |
Step 1: Enter information below (Recommended: An additional animal making an allowance for loss during the experiment)
g
μL
Step 2: Enter the in vivo formulation (This is only the calculator, not formulation. Please contact us first if there is no in vivo formulation at the solubility Section.)
Calculation results:
Working concentration: mg/ml;
Method for preparing DMSO master liquid: mg drug pre-dissolved in μL DMSO ( Master liquid concentration mg/mL, Please contact us first if the concentration exceeds the DMSO solubility of the batch of drug. )
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next addμL PEG300, mix and clarify, next addμL Tween 80, mix and clarify, next add μL saline, mix and clarify.
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next add μL Corn oil, mix and clarify.
Note: 1. Please make sure the liquid is clear before adding the next solvent.
2. Be sure to add the solvent(s) in order. You must ensure that the solution obtained, in the previous addition, is a clear solution before proceeding to add the next solvent. Physical methods such as vortex, ultrasound or hot water bath can be used to aid dissolving.
3. All of the above co-solvents are available for purchase on the GlpBio website.
Quality Control & SDS
- View current batch:
- Purity: >98.00% Appearance: A solid
- COA (Certificate of Analysis)
- SDS (Safety Data Sheet)
- Datasheet
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