BAPTA |
Catalog No.GC17574
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BAPTA는 칼슘의 다양한 세포 기능에서의 역할을 분석하기 위해 사용되는 매우 Ca²⁺ 선택적인 킬레이터이다.
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Cas No.: 85233-19-8
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
BAPTA는 칼슘의 다양한 세포 기능에서의 역할을 분석하기 위해 사용되는 매우 Ca²⁺ 선택적인 킬레이터이다. BAPTA의 Ca²⁺에 대한 친화력은 각각 전자 공여기 또는 전자 인출기의 존재에 따라 향상되거나 감소될 수 있다. BAPTA와 Ca²⁺의 결합은 세포 내에서 pH와 무관하다[3]. 게다가 BAPTA는 순수한 6-fosfrofruktosa-2-kinaza/fruktosa-2,6-bisfosfatas 3 (PFKFB3)의 활성을 직접 억제할 수 있다[4].
체외 실험에서 기계적으로 손상된 신경세포를 10, 20 또는 40μM의 BAPTA로 처리하면 말단 디옥티드 전이 효소 dUTP 니크 엔드 레이블링(TUNEL)-양성 세포가 용량 의존적으로 감소하고 최대 보호 효과는 40μM에서 관찰되었다[5]. HEK293T 세포를 점점 높은 농도의 BAPTA(0.1, 1, 10mM)로 처리하면 내원성 칼슘 활성화 염화물 채널 ANO6(TMEM16F)의 개방 채널 확률이 점점 높아졌다[6]. BAPTA(0-10mM)는 Ca²⁺와 무관하게 인지질 분해효소 C(PLC) 활성을 용량 의존적으로 억제한다[7].
체내 실험에서 완전 횡단성 척수 손상 후 10 mM BAPTA를 암컷 BALB/c 쥐의 손상 부위에 국소적으로 도포하면 대조 그룹보다 체중이 현저하게 높고 수정된 바소 베이티 브레스나한(mBBB) 점수가 높았다[4]. 생태계 내에서 150 mM BAPTA를 보브테일 스키크의 내림프에 이온투포시스로 주입하면 개별 자발적 이음성 방출(SOAE) 피크의 주파수가 하향 이동하고 회복은 1시간 이상이 필요했다[8].
References:
[1] Saoudi Y, Rousseau B, Doussière J, et al. Calcium-independent cytoskeleton disassembly induced by BAPTA. Eur J Biochem. 2004;271(15):3255-3264.
[2] Tsien RY. New calcium indicators and buffers with high selectivity against magnesium and protons: design, synthesis, and properties of prototype structures. Biochemistry. 1980;19(11):2396-2404.
[3] Sneyers F, Speelman-Rooms F, Verhelst SHL, Bootman MD, Bultynck G. Cellular effects of BAPTA: Are they only about Ca2+ chelation?. Biochim Biophys Acta Mol Cell Res. 2024;1871(2):119589.
[4] Sneyers F, Kerkhofs M, Speelman-Rooms F, et al. Intracellular BAPTA directly inhibits PFKFB3, thereby impeding mTORC1-driven Mcl-1 translation and killing MCL-1-addicted cancer cells. Cell Death Dis. 2023;14(9):600.
[5] Kang KR, Kim J, Ryu B, et al. BAPTA, a calcium chelator, neuroprotects injured neurons in vitro and promotes motor recovery after spinal cord transection in vivo. CNS Neurosci Ther. 2021;27(8):919-929.
[6] Kolesnikov DO, Nomerovskaya MA, Grigorieva ER, et al. Calcium chelation independent effects of BAPTA on endogenous ANO6 channels in HEK293T cells. Biochem Biophys Res Commun. 2024;693:149378.
[7] Hardie RC. Inhibition of phospholipase C activity in Drosophila photoreceptors by 1,2-bis(2-aminophenoxy)ethane N,N,N',N'-tetraacetic acid (BAPTA) and di-bromo BAPTA. Cell Calcium. 2005;38(6):547-556.
[8] Manley GA, Kirk DL. BAPTA induces frequency shifts in vivo of spontaneous otoacoustic emissions of the bobtail lizard. Audiol Neurootol. 2005;10(5):248-257.
| 키나제 실험 [1]: | |
제조 방법 | 1µM에서 1mM까지 다양한 농도의 BAPTA가 존재할 때 ADP 생성량을 측정하는 기초로 하는 무세포 생화학 분석법을 사용해서 재조합된 순수한 인간 6-fosfrofruktosa-2-kinaza/fruktosa-2,6-bisfosfatas 3 (PFKFB3) 효소의 키나아제 활성을 측정하였습니다. |
반응 조건 | 1µM-1mM |
응용 분야 | BAPTA는 PFKFB3 활성을 직접적으로 억제하였습니다. |
| 세포 실험 [2]: | |
세포 라인 | 신경세포 |
제조 방법 | 신경세포를 물리적으로 손상시키기 위해 100mg의 유리구슬을 DPBS로 침전된 분화된 신경세포와 혼합하였습니다. 판를 세 번 가볍게 흔들어 구슬이 세포 위로 굴러가도록 하였습니다. DPBS와 유리구슬은 흡인을 통해 제거하였습니다. 실험 전에 BAPTA는 DMEM/F12에서 희석해서 최종 농도 10μM, 20μM, 40μM로 준비하였습니다. 준비된 BAPTA(BAPTA 그룹)나 DPBS(대조군)를 세포에 가볍게 처리하였습니다. 그 다음에 판를 37°C에서 30분간 키웠기 때문에 BAPTA가 손상된 세포를 보호할 수 있었습니다. 이 과정에서 가짜 그룹은 손상되지 않았고 특정 물질은 처리되지 않았습니다. TrypLE로 처리하고 판를 37°C에서 5분간 키워 세포를 분리하였습니다. 마지막으로 세포를 DMEM/F12에 모았습니다. |
반응 조건 | 10, 20 및 40μM; 30 분 동안 |
응용 분야 | BAPTA 처리 그룹에서는 5.3%의 세포가 판에서 분리되었고 대조 용매 그룹에서는 14.5%였습니다. SEM하에서 대조 그룹의 신경세포는 사멸 특징을 보였습니다. 말단 디옥티드 전이 효소 dUTP 니크 엔드 레이블링(TUNEL)-양성 세포의 수는 용량 의존적으로 현저하게 감소했고 40μM에서 BAPTA는 최대 효과를 발휘했습니다. |
| 동물 실험 [3]: | |
동물 모형 | BALB/c 암컷 쥐 |
제조 방법 | 6주령의 BALB/c 암컷 쥐는 Zoletil(tiletamine과 zolazepam의 1:1 복합체)과 xylazine(3:1 비율, 1mL/kg)을 사용해서 마취되었습니다. T9 수준에서 척추 척추 절제술이 수행되었습니다. 치료를 위해 10 mM BAPTA를 DPBS로 희석한 20μL과 DPBS가 준비되었습니다. BAPTA나 DPBS는 흡입기를 사용해서 완전 절단 부위에 떨어뜨리고 각각 BAPTA 그룹과 대조 그룹으로 배열되었습니다. 근육과 심막은 봉합되었고 피부는 닫혔습니다. 수술 후 척수 손상(SCI) 후 첫 14일 동안 추가 물과 부서진 음식이 제공되었습니다. 쥐의 방광은 하루에 세 번 수동으로 비우였습니다. 가짜 그룹의 동물들은 척수가 손상되지 않은 것을 제외하고 동일한 수술 절차를 받았습니다. |
제형 | 20μL, 10mM; 국소 응용 프로그램 |
응용 분야 | SCI 후 3일째부터 BAPTA 그룹의 수정된 바소 비티 브레스나한(mBBB) 점수가 대조 그룹보다 현저하게 높았습니다. SCI 후 23일째부터 BAPTA 그룹의 체중이 대조 그룹보다 현저하게 높았습니다. |
References: | |
| Cas No. | 85233-19-8 | SDF | |
| Chemical Name | 2,2',2'',2'''-(((ethane-1,2-diylbis(oxy))bis(2,1-phenylene))bis(azanetriyl))tetraacetic acid | ||
| Canonical SMILES | OC(CN(CC(O)=O)C1=CC=CC=C1OCCOC2=CC=CC=C2N(CC(O)=O)CC(O)=O)=O | ||
| Formula | C22H24N2O10 | M.Wt | 476.23 |
| Solubility | DMF: 20 mg/ml,DMSO: 20 mg/ml,DMSO:PBS (pH 7.2) (1:1): 0.5 mg/ml | Storage | Store at -20°C |
| General tips | Please select the appropriate solvent to prepare the stock solution according to the
solubility of the product in different solvents; once the solution is prepared, please store it in
separate packages to avoid product failure caused by repeated freezing and thawing.Storage method
and period of the stock solution: When stored at -80°C, please use it within 6 months; when stored
at -20°C, please use it within 1 month. To increase solubility, heat the tube to 37°C and then oscillate in an ultrasonic bath for some time. |
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| Shipping Condition | Evaluation sample solution: shipped with blue ice. All other sizes available: with RT, or with Blue Ice upon request. | ||
| Prepare stock solution | |||
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1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 2.0998 mL | 10.4991 mL | 20.9983 mL |
| 5 mM | 420 μL | 2.0998 mL | 4.1997 mL |
| 10 mM | 210 μL | 1.0499 mL | 2.0998 mL |
Step 1: Enter information below (Recommended: An additional animal making an allowance for loss during the experiment)
g
μL
Step 2: Enter the in vivo formulation (This is only the calculator, not formulation. Please contact us first if there is no in vivo formulation at the solubility Section.)
Calculation results:
Working concentration: mg/ml;
Method for preparing DMSO master liquid: mg drug pre-dissolved in μL DMSO ( Master liquid concentration mg/mL, Please contact us first if the concentration exceeds the DMSO solubility of the batch of drug. )
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next addμL PEG300, mix and clarify, next addμL Tween 80, mix and clarify, next add μL saline, mix and clarify.
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next add μL Corn oil, mix and clarify.
Note: 1. Please make sure the liquid is clear before adding the next solvent.
2. Be sure to add the solvent(s) in order. You must ensure that the solution obtained, in the previous addition, is a clear solution before proceeding to add the next solvent. Physical methods such as vortex, ultrasound or hot water bath can be used to aid dissolving.
3. All of the above co-solvents are available for purchase on the GlpBio website.
Quality Control & SDS
- View current batch:
- Purity: >98.00% Appearance: A solid
- COA (Certificate of Analysis)
- SDS (Safety Data Sheet)
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