CleanCap Reagent AU |
カタログ番号GN20150
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CleanCap Reagent AUは、転写共役キャッピング用に特別に設計されたものであり、構造はm7G(5')ppp(5')(2'OMeA)pUであり、天然のCap1構造を持つmRNAを生成する。
Products are for research use only. Not for human use. We do not sell to patients.
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
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CleanCap Reagent AUは、転写共役キャッピング用に特別に設計されたものであり、構造はm7G(5')ppp(5')(2'OMeA)pUであり、天然のCap1構造を持つmRNAを生成する[1]。CleanCap Reagent AUは、プラス鎖RNAウイルス（例えばベネズエラ馬脳炎ウイルス（VEEV）、セムリキ森林ウイルス（SFV）、シンドビスウイルス（SIN））（これらのプラス鎖ゲノムは5'-AU...で始まる）のゲノムに基づいた自己複製RNA用に特別に設計されたものである[2, 3]。伝統的な共転写キャッピング法（例えば逆接続防止キャップアナログ、ARCAなど）で調製されたCap0 mRNAと比べ、Cap1構造を持つmRNAは体内（in vivo）で、優れた活性、安定性とより低い免疫原性を示す[4]。CleanCap Reagent AUは、GlpBioの修飾NTPのシリーズ製品と併用できる。
References:
[1] Henderson J M, Ujita A, Hill E, et al. Cap 1 messenger RNA synthesis with co‐transcriptional cleancap® analog by in vitro transcription[J]. Current protocols, 2021, 1(2): e39.
[2] Lu X, Wu Y, Zhao C, et al. Co‐expression of HSV‐1 ICP34. 5 enhances the expression of gene delivered by self‐amplifying RNA and mitigates its immunogenicity[J]. FEBS Open Bio, 2025.
[3] Kairuz D, Samudh N, Ely A, et al. Production, characterization, and assessment of permanently cationic and ionizable lipid nanoparticles for use in the delivery of self-amplifying RNA vaccines[J]. Pharmaceutics, 2023, 15(4): 1173.
[4] Zhang H, Ma J, Ma T, et al. GPT-driven generation and biological activity evaluation of novel mRNA trinucleotide Cap1 analogs for mRNA vaccine or immunotherapy[J]. Journal of Materials Chemistry B, 2025.
このプロトコールはあくまでガイドラインのみを提供し、具体的なニーズに合わせてご調整願います。
CleanCap Reagent AUは転写反応に使われる：
1.無RNase水とNTPを反応チューブに添加する。
2.CleanCap Reagent AUをチューブに添加し、ボルテックスミキサーで混ぜる。短い間に遠心分離し、チューブの底部で液体を集める。
3.10X転写緩衝液を添加する。ボルテックスミキサーで混ぜる。短い間に遠心分離し、チューブの底部で液体を集める。
4.DNAテンプレートを添加する。
5.マウスRNase阻害剤、酵母無機ピロホスファターゼとT7 RNAポリメラーゼを添加する。
6.チューブを10回軽く振るか、または逆様にして、徹底的に混ぜて、続いては短く遠心分離し、チューブの底部で液体を集める。
7.37℃で2-3時間インキュベートする。
注意事項：全ての試薬が無RNaseであることを厳守するべきである。使い捨ての無RNaseチューブとボトルを使うこと。表面とピペットは、RNaseZapで拭いてRNaseを不活性化できる。可能であれば、専用の無RNaseピペットを使うこと。RNase Aプラスミドの調製に既に使われたピペットを使わないこと。
| purity | ＞95.00% | Extinction Coefficient | 33,400 Lmol-1cm-1 at 258 nm |
| Formula | C31H42N12O25P4 (free acid) | M.Wt | 1106.6 g/mole (free acid) |
| Salt Form | Na+ | 濃度 | 102mM |
| Buffer | H2O | Storage | -20°C or below, always avoid freeze-thaw cycles. |
| 同義語 | CleanCap AU for Self-Amplifying mRNA, CleanCap Reagent AU for co-transcriptional capping of mRNA, m7G(5')ppp(5')(2'OMeA)pU | Backbone | 5'-5'-Triphosphate |
| Base Analog | Adenosine, Uridine | Sugar Type | RNA |
| Nucleotide Category | Cap analogs | ||
| 応用 | CRISPR, In vitro Transcription, Recombinases, TALENS, Transposases, Vaccine Development, Zinc Finger Nucleases | ||
Quality Control & SDS
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Appearance: Clear colorless solution
- COA (Certificate Of Analysis)
- SDS (Safety Data Sheet)
- Datasheet
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