SPD304は腫瘍壊死因子α（TNF-α）の選択的な阻害剤であり、IC50値は22μMである[1]。SPD304は、TNF三量体の解離を促進し、よってTNFと関連受容体の相互作用を遮断する[2]。S期で細胞周期停止を誘発するために、SPD304はTNF-α/NF-κB/CUL4B経路の遮断に広く使われている[3]。
In vitro（体外）実験で、30µMのSPD304で24時間処理したところ、HEK293T細胞死が著しく誘発された[4]。25µM SPD304で24時間処理したところ、TNFα活性が著しく阻害され、L929細胞の生存率が低下した[5]。GH3細胞を8µM SPD304で48時間処理したところ、MAPK経路タンパク質のTNFα誘発性の上方制御が阻害され、細胞の増殖、遊走と浸潤が阻害された[6]。1µM SPD304で24時間前インキュベートしたところ、ヒト真皮線維芽細胞（HDF）でIL-8とIL-6のレベルが著しく阻害された[7]。
In vivo（体内）実験で、SPD304（5µg；5% DMSOを10µlの人工脳脊髄液に溶解）を5分間脳室内注射したところ、心不全のラットで、TACE（TNF-α変換酵素）による血圧、心拍数、腎臓交感神経活動の増加が阻害された[8]。
References:
[1] He M M, Smith A S, Oslob J D, et al. Small-molecule inhibition of TNF-α[J]. Science, 2005, 310(5750): 1022-1025.
[2] Alexiou P, Papakyriakou A, Ntougkos E, et al. Rationally designed less toxic SPD‐304 analogs and preliminary evaluation of their TNF inhibitory effects[J]. Archiv der Pharmazie, 2014, 347(11): 798-805.
[3] Zhang C, Chen B, Jiang K, et al. Activation of TNF‐α/NF‐κB axis enhances CRL 4 BDCAF 11 E3 ligase activity and regulates cell cycle progression in human osteosarcoma cells[J]. Molecular oncology, 2018, 12(4): 476-494.
[4] Shen Q, Zhang C, Liu H, et al. De novo design of helical peptides to inhibit tumor necrosis factor-α by disrupting its trimer formation[J]. MedChemComm, 2016, 7(4): 725-729.
[5] Mascret A, Mouhsine H, Attia G, et al. New contributions to the drug profile of TNFα inhibitor SPD304: Affinity, selectivity and ADMET considerations[J]. European Journal of Pharmacology, 2021, 907: 174285.
[6] Wu X, Gong L, Li B, et al. TNF‐α can promote membrane invasion by activating the MAPK/MMP9 signaling pathway through autocrine in bone‐invasive pituitary adenoma[J]. CNS Neuroscience & Therapeutics, 2024, 30(5): e14749.
[7] Javaid N, Patra M C, Cho D E, et al. An orally active, small-molecule TNF inhibitor that disrupts the homotrimerization interface improves inflammatory arthritis in mice[J]. Science Signaling, 2022, 15(759): eabi8713.
[8] Yu Y, Cao Y, Bell B, et al. Brain TACE (tumor necrosis factor-α–converting enzyme) contributes to sympathetic excitation in heart failure rats[J]. Hypertension, 2019, 74(1): 63-72.