2-NBDG
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Catalog No.GC10289
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2-NBDG는 2-deoxy-glucose 라는 형광표지로 세포의 당 대사를 평가하는 데 사용된다 (Ex/Em:475/550 nm).
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Cas No.: 186689-07-6
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
- Acs Central Sci (2025).
- Int J Biol Sci 21.13 (2025):5725.PMID:41079919
- Cell Death & Disease 11.11 (2020):991.PMID:33203874
- Frontiers in Immunology 12 (2021):660312.PMID:34248941
- Phytomedicine 114 (2023):154740.PMID:36965373
- Ecotox Environ Safe 243 (2022):113996.PMID:36030680
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- Front Pharmacol 13 (2022):875014.PMID:35694255
- Nutrients: (2026): 3192.
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- Acta Biochimica et Biophysica Sinica 57.7 (2025):1125.PMID:40170617
- Acta Bioch Bioph Sin 57.7 (2025).PMID:40170617
- Acta Bioch Bioph Sin 57.12 (2025):2094.PMID:41311215
- Endocrinol Diab Meta 7.3 (2024).PMID:38556697
- Endocrin Diab Metab 7.3 (2024):e00482.PMID:38556697
- Journal of Neuroscience Methods 339 (2020):108709.
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- iScience 24.10 (2021).
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- J Cardiovasc Dev Dis (2023):10(6) 246.
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- Tradit Med Res 9.7 (2024):37.
- A thesis of McGill University (2024).
- bioRxiv (2024):2024-06.
2-NBDG는 2-deoxy-glucose 라는 형광표지로 세포의 당 대사를 평가하는 데 사용된다 (Ex/Em:475/550 nm).
포도당은 세포 활동과 조직 내의 안정 상태를 유지하고 필요한 에네르기 원천이다.포도당 대사는 많은 질병의 중요한 표적이 되며 병리적 상태의 변화에 따라 변화하므로 포도당 대사의 평가는 질병의 진행에 대한 중요한 지표가 될 수 있다.
2-NBDG는 인체 HepG2 간암 세포, L6 쥐 골격근 세포, MCF-7 유방암 상피 세포, 성상 세포와 같은 다양한 체외 세포에서 사용될 수 있으며 질병 모델, 간질 쥐, 고혈당, 당뇨병, 쥐 종양 이종 이식 모델에서도 사용될 수 있다.
2-NBDG는 포도당 운반체를 통해 세포에 들어가 헥실로키나제 (hexokinase)에 의해 인산화된 후 세포에 포획된다.유식세포술은 세포가 산생하는 형광을 검출하여 살아있는 세포가 2-NBDG를 섭취하는것을 검출할수 있으며 fluorescence microplate assay로 세포내에 운반된 2-NBDG의 농도를 측정할수 있다.형광영상현미경이나 CCD 카메라로 검출할수도 있다.
2-NBDG는 형광으로 표지된 포도당 추적자로 포도당과 동일한 포도당 수송체 (과잉)에 의해 세포 내로 수송된다.일단 2-NBDG 가 세포에 의해 흡수되면, C-6위치에서 인산화되어 세포 내에 잘 남아있는 2-NBDG-6-phosphate 가 된다.다른 포도당 추적자(예,2-DG나 FDG)에 비해 2-NBDG는 단일 세포 수준에서 높은 시간 및 공간 해상도로 2-NBDG의 현장 측정을 가능하게 한다.(형광현미경과 유세포 검사에 적용)
세포 내 2-NBDG 포도당 섭취 실험의 원리:2-NBDG 가 세포에 의해 섭취된 후 C-6에서 인산화되어 2-NBDG-6-phosphate가 생성되고 세포 내에 보존된다. 형광의 강도는 세포의 포도당 섭취 활성에 정비례한다.
References:
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[5]. Tsytsarev V, Maslov K I, Yao J, et al. In vivo imaging of epileptic activity using 2-NBDG, a fluorescent deoxyglucose analog[J]. Journal of neuroscience methods, 2012, 203(1): 136-140.
2-NBDG 흡수 검사법은 MEFs [1]에 절차
1.C57BL/6 WT 쥐의 배아 섬유아세포(MEFs)를 분리합니다 (13.5일).
2.10cm 페트리 접시에 DMEM 성장 매디엄으로 MEF 세포를 배양하여 80-90%의 접합도에 도달합니다. 습도를 유지한 세포배양 인큐베이터에서 (37°C, 5% CO2). 참고: 3번째 패시지 이후의 MEFs를 사용하지 마십시오. MEFs는 일반적으로 4번째에서 5번째 패시지에서 노화됩니다.
3.배양액을 제거하고 10ml 1x PBS로 세포를 한 번 씻습니다.
4.37°C에서 0.05% 트립신-EDTA 4ml을 사용하여 세포를 3분 동안 트립신화합니다.
참고: A3 단계에서 A9 단계까지는 실온 또는 미리 데워진 1x PBS를 사용합니다. A9 단계 이후에는 냉각된 1x PBS를 사용합니다.
5.세포를 15ml 포리에스테른 센트리퓨징 튜브로 이전합니다.
6.원심분리에 의해 200 x g의 세포를 5분간을 통하여 세포를 수확합니다.
7.5ml 1x PBS로 젖힌 세포를 한 번 씻어줍니다.
8.혈구기세기실을 사용하여 세포를 계수합니다.
9.37°C 물욕에서 100 μM 2-NBDG을 포함한 1ml PBS와 함께 1 x 106 MEF 세포를 2시간 동안 배양합니다. 동일한 수의 MEF를 음성대조용으로 2-NBDG를 포함하지 않은 1ml PBS와 함께 물욕에서 배양합니다.
10.원심분리에 의해 200 x g의 세포를 5분간을 통하여 세포를 젖힌 후 냉각된 1x PBS로 세포를 씻은 후 다시 원심분리에 의해 200 x g의 세포를 5분간을 통하여 세포를 젖힙니다.
11.얼음물에 2% FBS를 포함한 0.5ml 1x PBS에서 세포를 소생시킵니다.
참고: 이 후 단계에서는 세포를 항상 얼음위에 셀을 보관합니다.
12.35µm 뉴론 메쉬를 통해 세포를 걸러 (5ml 둥근 바닥의 포리에스테른 튜브의 세포-스트레이너 캡) 5ml 튜브에서 일관된 단일 세포유니폼 서스펜션을 얻습니다.
13.샘플을 얼음 위에두고 흐름 사이토메트리 분석할 때까지 보관합니다.
14.흐름 사이토메트리 분석을 실시합니다. 각 반응에 대해 10,000개의 단일 세포 이벤트를 획득합니다.
15.형광 강도를 분석합니다.
유방암 세포의 2-NBDG 흡수 절차[1]
MEFs의 흡수 검사법과 같은 절차를 사용하되 37°C 물욕에서 1 x 106 MCF7 세포를 30분만 (MEFs의 두 시간 대신) 100 μM 2-NBDG를 포함한 1ml PBS와 함께 배양합니다.
2-NBDG의 10 mM 저장 용액: 5mg 2-NBDG를 1.46ml PBS에 녹입니다. 어둡고 -20°C에서 보관합니다.
이 프로토콜은 지침을 제공할 뿐이며 당신의 구체적인 필요에 따라 수정되어야 합니다.
참조 문헌:
[1]. Dong, S., Baranwal, S., Garcia, A., Serrano-Gomez, S. J., Eastlack, S., Iwakuma, T., Mercante, D., Mauvais-Jarvis, F. and Alahari, S. K. (2017). Nischarin inhibition alters energy metabolism by activating AMP-activated protein kinase. J Biol Chem 292(41): 16833-16846.
| Cas No. | 186689-07-6 | SDF | |
| Synonyms | NBDGlucose | ||
| Chemical Name | (3R,4R,5S,6R)-6-(hydroxymethyl)-3-((7-nitrobenzo[c][1,2,5]oxadiazol-4-yl)amino)tetrahydro-2H-pyran-2,4,5-triol | ||
| Canonical SMILES | OC[C@](O1)([H])[C@](O)([H])[C@@](O)([H])[C@](NC2=CC=C(N(=O)=O)C3=NON=C23)([H])C1([H])O | ||
| Formula | C12H14N4O8 | M.Wt | 342.26 |
| Solubility | ≥ 17.1mg/mL in Water with ultrasonic | Storage | -20°C, protect from light |
| General tips | Please select the appropriate solvent to prepare the stock solution according to the
solubility of the product in different solvents; once the solution is prepared, please store it in
separate packages to avoid product failure caused by repeated freezing and thawing.Storage method
and period of the stock solution: When stored at -80°C, please use it within 6 months; when stored
at -20°C, please use it within 1 month. To increase solubility, heat the tube to 37°C and then oscillate in an ultrasonic bath for some time. |
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| Shipping Condition | Evaluation sample solution: shipped with blue ice. All other sizes available: with RT, or with Blue Ice upon request. | ||
| Prepare stock solution | |||
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1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 2.9218 mL | 14.6088 mL | 29.2176 mL |
| 5 mM | 584.4 μL | 2.9218 mL | 5.8435 mL |
| 10 mM | 292.2 μL | 1.4609 mL | 2.9218 mL |
Step 1: Enter information below (Recommended: An additional animal making an allowance for loss during the experiment)
g
μL
Step 2: Enter the in vivo formulation (This is only the calculator, not formulation. Please contact us first if there is no in vivo formulation at the solubility Section.)
Calculation results:
Working concentration: mg/ml;
Method for preparing DMSO master liquid: mg drug pre-dissolved in μL DMSO ( Master liquid concentration mg/mL, Please contact us first if the concentration exceeds the DMSO solubility of the batch of drug. )
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next addμL PEG300, mix and clarify, next addμL Tween 80, mix and clarify, next add μL saline, mix and clarify.
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next add μL Corn oil, mix and clarify.
Note: 1. Please make sure the liquid is clear before adding the next solvent.
2. Be sure to add the solvent(s) in order. You must ensure that the solution obtained, in the previous addition, is a clear solution before proceeding to add the next solvent. Physical methods such as vortex, ultrasound or hot water bath can be used to aid dissolving.
3. All of the above co-solvents are available for purchase on the GlpBio website.
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Purity = 99.90%
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iScience.2021 Sep 25;24(10):103170.
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