2-D08は合成フラボノイドと細胞透過性の小ユビキチン様修飾因子（SUMO）阻害剤であり、Axl標的をも阻害し、IC50値は0.49nMである[1]。タンパク質SUMO化は、動的な翻訳後修飾であり、細胞の恒常性と発達で、様々な生物プロセスに関与している。2-D08は、UBC9-SUMOチオエステルから基質へのSUMOの転移を予防することで、SUMO化を阻害する[2]。2-D08は通常、急性骨髄性白血病や脱髄疾患など、様々な生物経路と疾患におけるSUMO化の役割の調査に使われる[3,4]。
体外で、2-D08 (50, 100μM)でC2C12筋芽細胞を24時間インキュベートした結果、著しい形態の変化を誘発し、細胞生存率を著しく阻害し、最高の用量100µMで細胞の生存率を最大20%減らした[5]。2-D08 (10-100μM)でヒト子宮平滑筋肉腫（Ut-LMS）SK-LMS-1とSK-UT-1B細胞株を7日間処理した結果、細胞生存率を用量依存的に低下させ、Ut-LMS細胞のコロニー形成能力を阻害した[6]。2-D08 (50μM)で初代培養オリゴデンドロサイト前駆細胞（OPC）を72時間培養した結果、FYNチロシンキナーゼのリン酸化レベルを著しく増やし、Kir4.1とMBPタンパク質の発見を増強した[4]。
体内で、MOG35-55免疫の48時間後から、2-D08 (1mg/kg；腹腔内注射)を毎日投与した結果、免疫の20日後に、実験的自己免疫性脳脊髄炎（EAE）マウスの急性期で、疾患の重症度を著しく軽減し、体重の増加を促進した。EAEマーモセットで症状が現れてから、2-D08 (1mg/kg；静脈内注射)を30日間毎日投与した結果、脊髄ミエリンの修復を促進し、運動協調性を改善した[4]。RM-1腫瘍を持つC57BL/6Jマウスに、2-D08 (10mg/kg；三日ごと)を2週間、腫瘍内注射した結果、腫瘍の成長を著しく抑制し、腫瘍質量を減らし、腫瘍細胞のアポトーシスを増やした[7]。
References:
[1] FUJINO N, KUBO H, MACIEWICZ R A. Phenotypic screening identifies Axl kinase as a negative regulator of an alveolar epithelial cell phenotype[J]. Laboratory Investigation, 2017, 97(9): 1047-1062.
[2] KIM Y S, KEYSER S G L, SCHNEEKLOTH J S J. Synthesis of 2’, 3’, 4’-trihydroxyflavone (2-D08), an inhibitor of protein sumoylation[J]. Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters, 2014, 24(4): 1094-1097.
[3] ZHOU P, CHEN X, LI M, et al. 2-D08 as a SUMOylation inhibitor induced ROS accumulation mediates apoptosis of acute myeloid leukemia cells possibly through the deSUMOylation of NOX2[J]. Biochemical and Biophysical Research Communications, 2019, 513(4): 1063-1069.
[4] LIU M, JIN S, FU X, et al. Activation of Kir4.1 Channels by 2-D08 Promotes Myelin Repair in Multiple Sclerosis[J]. Advanced Science, 2025: e02032.
[5] LIU H, LEE S M, JOUNG H. 2-D08 treatment regulates C2C12 myoblast proliferation and differentiation via the Erk1/2 and proteasome signaling pathways[J]. Journal of Muscle Research and Cell Motility, 2021, 42(2): 193-202.
[6] JOUNG H, LIU H. 2-D08 mediates notable anticancer effects through multiple cellular pathways in uterine leiomyosarcoma cells[J]. Oncology Reports, 2024, 52(1): 97.
[7] XIAO J, SUN F, WANG Y N, et al. UBC9 deficiency enhances immunostimulatory macrophage activation and subsequent antitumor T cell response in prostate cancer[J]. Journal of Clinical Investigation, 2023, 133(4): e158352.