DiO (Synonyms: DiOC18(3); 3,3'-Dioctadecyloxacarbocyanine perchlorate) |
| カタログ番号GC19515 |
DiO (3,3′-Dioctadecyloxacarbocyanine perchlorate)は、細胞、オルガネラ、リポソーム、ウイルス、リポタンパク質を標識するためにDIとして広く使用されている親油性の長鎖カルボシアニン蛍光色素である。
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Cas No.: 34215-57-1
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
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DiO (3,3′-Dioctadecyloxacarbocyanine perchlorate)は、細胞、オルガネラ、リポソーム、ウイルス、リポタンパク質を標識するためにDIとして広く使用されている親油性の長鎖カルボシアニン蛍光色素である。DiO (3,3′-Dioctadecyloxacarbocyanine perchlorate)は緑色の蛍光脂肪性トレーサーであり、水に弱く蛍光があるが、膜の光不安定性に組み込まれると蛍光で同等である。DiO (3,3′-Dioctadecyloxacarbocyanine perchlorate)は生細胞の蛍光マーカーとして、またはゼブラフィッシュ胚を標識するための親油性色素として使用される[1]。
長鎖カルボシアニンには膜やそのほかの疎水性構造を標識するためのDIO，DII，DIDとDialkylaminostyrene色素DIAが含まれている。ジオ蛍光色素は生細胞のマルチカラーイメージングとフローサイトメトリー法、を促進する顕著な蛍光を示している。[2]DIOは標準のFITCフィルターで使用できる。
References:
[1]. Anat Samuel, et al. Six3 regulates optic nerve development via multiple mechanisms. 2016 Jan 29;6:20267. doi: 10.1038/srep20267.
[2]. Bhowmik BB, et al. Photophysical studies of 3,3' dioctadecyloxacarbocyanine dye in model biological membranes and different solvents. Chem Phys Lipids. 2001 Feb;109(2):175-83.
このプロトコルはガイドのみを提供し、特定のニーズに応じて変更する必要がある。
1.dio細胞膜染色溶液（1）DMSOまたはETOHストレージソリューションの準備：DMSOまたはETOHを1〜5mmの濃度の保管ソリューションとして使用する。注：未使用のストック溶液を暗闇の中で-20°Cのアリコートに保管し、繰り返し凍結と解凍を避けてください。
（2）作業溶液の調製：0.5〜5μMの濃度の作業溶液を準備するために、適切なバッファー（血清フリー培地、HBSS、PBSなど）でストック溶液を希釈する。注：作業溶液の最終濃度は、異なる細胞と実験の経験に従って調製される。最適な条件は、推奨濃度の10倍以上から見つけることができる。
2。懸濁細胞染色
（1）懸濁細胞を1000gで4°Cで3〜5分間遠心にし、上清を破棄します。 PBSでそれぞれ5分間2回洗浄する。
（2） 1mlのDIO作業溶液を加え、室温で5〜30分間孵化する。。最適な孵化時間は、細胞によって異なる。
（3）染色細胞試験管を1000〜1500 rpmで5分間遠心分離する。
（4） 400gで4°Cで3〜4分間遠心分離し、上清を廃棄します。上清を注ぎ、PBSを加えて毎回5分間洗浄する。
（5）血清を含まない細胞培養培地またはPBSで細胞を再懸濁する。蛍光顕微鏡またはフローサイトメトリーによって観察される。
3。接着細胞の染色
（1）滅菌カバースリップ上の培養接着細胞。
（2）媒体からカバースリップを取り外し、余分な培地を吸い出し、カバースリップを湿った環境に置く。
（3）カバースリップの片隅から100ルの染料作業溶液を加え、穏やかに振って、染料をすべての細胞に均等に覆く。（4）室温で5〜30分間インキュベートし、細胞ごとに最適な孵化時間が異なる。（5）。染料の動作溶液を捨て、培地でカバースリップを2〜3回洗浄する。4。顕微鏡検査：DIOの励起/放射光はそれぞれ484/501NMである。
注記：
（1）蛍光色素には消光剤があります。光を避けて蛍光消光を遅くするようにしてください。
（2）安全と健康のために、操作のために白衣と使い捨て手袋を着用してください。
| Cas No. | 34215-57-1 | SDF | |
| 同義語 | DiOC18(3); 3,3'-Dioctadecyloxacarbocyanine perchlorate | ||
| Canonical SMILES | O=Cl(=O)([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCCN1C(C=CC=C2)=C2O/C1=C/C=C/C(OC3=C4C=CC=C3)=[N+]4CCCCCCCCCCCCCCCCCC | ||
| Formula | C₅₃H₈₅ClN₂O₆ | M.Wt | 881.7 |
| 溶解度 | DMF : 10 mg/mL (11.34 mM; Need ultrasonic); DMSO : 5 mg/mL (5.67 mM; ultrasonic and warming and heat to 60°C) | Storage | Store at 4°C, protect from light |
| General tips | Please select the appropriate solvent to prepare the stock solution according to the
solubility of the product in different solvents; once the solution is prepared, please store it in
separate packages to avoid product failure caused by repeated freezing and thawing.Storage method
and period of the stock solution: When stored at -80°C, please use it within 6 months; when stored
at -20°C, please use it within 1 month. To increase solubility, heat the tube to 37°C and then oscillate in an ultrasonic bath for some time. |
||
| Shipping Condition | Evaluation sample solution: shipped with blue ice. All other sizes available: with RT, or with Blue Ice upon request. | ||
| Prepare stock solution | |||
|
1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 1.1342 mL | 5.6709 mL | 11.3417 mL |
| 5 mM | 226.8 μL | 1.1342 mL | 2.2683 mL |
| 10 mM | 113.4 μL | 567.1 μL | 1.1342 mL |
Step 1: Enter information below (Recommended: An additional animal making an allowance for loss during the experiment)
g
μL
Step 2: Enter the in vivo formulation (This is only the calculator, not formulation. Please contact us first if there is no in vivo formulation at the solubility Section.)
Calculation results:
Working concentration: mg/ml;
Method for preparing DMSO master liquid: mg drug pre-dissolved in μL DMSO ( Master liquid concentration mg/mL, Please contact us first if the concentration exceeds the DMSO solubility of the batch of drug. )
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next addμL PEG300, mix and clarify, next addμL Tween 80, mix and clarify, next add μL ddH2O, mix and clarify.
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next add μL Corn oil, mix and clarify.
Note: 1. Please make sure the liquid is clear before adding the next solvent.
2. Be sure to add the solvent(s) in order. You must ensure that the solution obtained, in the previous addition, is a clear solution before proceeding to add the next solvent. Physical methods such as vortex, ultrasound or hot water bath can be used to aid dissolving.
3. All of the above co-solvents are available for purchase on the GlpBio website.
Quality Control & SDS
- View current batch:
- Purity: >98.00%
- COA (Certificate Of Analysis)
- SDS (Safety Data Sheet)
- Datasheet
Average Rating: 5 (Based on Reviews and 11 reference(s) in Google Scholar.)
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