FlAsH-EDT2 (Synonyms: Fluorescein Arsenical Helix Binder, Lumio Green) |
カタログ番号GC43674
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FlAsH-EDT2は蛍光性ビアリセニル色素であり、テトラシステインモチーフタグのタンパク質の標識に使われる。FlAsH-EDT2は、細胞膜を通過でき、細胞内と細胞表層タンパク質の両方を含む生細胞で、タンパク質の標識に適している。
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Cas No.: 212118-77-9
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
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FlAsH-EDT2は蛍光性ビアリセニル色素であり、テトラシステインモチーフタグのタンパク質の標識に使われる。FlAsH-EDT2は、細胞膜を通過でき、細胞内と細胞表層タンパク質の両方を含む生細胞で、タンパク質の標識に適している。
References:
[1] Hoffmann C, Gaietta G, Zürn A, et al. Fluorescent labeling of tetracysteine-tagged proteins in intact cells. Nat Protoc. 2010 Sep;5(10):1666-77.
FlAsH-EDT2でテトラシステインタグのタンパク質を標識する方法[1]
このプロトコールはあくまでもガイドラインを提供し、ご自分のニーズに合わせてご調整願います。
細胞の標識：
1.2mlのHBSS/グルコース溶液で細胞を二回洗浄する。
2.各サンプルに対して、1mlのHBSS/グルコース溶液をFalconチューブに移す。
3.50-100µlのHBSS/グルコース溶液を取り、それをFlAsH-EDT2溶液に添加し、よく混ぜる。
4.混合液をFalconチューブに添加し、溶液の均一を確保する。
5.各培養皿に1mlの溶液を添加し、皿をゆっくり揺すって、最初の混合を確保する。
6.37°C（加湿環境、適切なCO₂）で1時間培養する。標識プロセスの間に、システムでの濃度は、500nM FlAsH-EDT2, 12.5µM EDT (1,2-ethanedithiol)、0.1% (v/v) DMSOであった。
過剰と非特異性の結合色素の除去：
7.洗浄溶液の調製：DMSOで500mM EDT溶液を調製する。
8.細胞を、250µM EDTを含有するHBSS/グルコース溶液で10分間洗浄する。
9.HBSS/グルコース溶液（EDTなし）で細胞を2-3回洗浄し、EDT残基を減らす。
10.洗浄のステップを1または2回繰り返し、バックグラウンドの蛍光を更に減らす。
11.共焦点顕微鏡：514nmのアルゴンレーザーでFlAsHを直接励起し、その蛍光発光を記録する。
References:
[1] Hoffmann C, Gaietta G, Zürn A, et al. Fluorescent labeling of tetracysteine-tagged proteins in intact cells. Nat Protoc. 2010 Sep;5(10):1666-77.
| Cas No. | 212118-77-9 | SDF | |
| 同義語 | Fluorescein Arsenical Helix Binder, Lumio Green | ||
| Chemical Name | 4',5'-bis(1,3,2-dithiarsolan-2-yl)-3',6'-dihydroxy-spiro[isobenzofuran-1(3H),9'-[9H]xanthen]-3-one | ||
| Canonical SMILES | OC1=C([As]2SCCS2)C3=C(C4(C(C=CC=C5)=C5C(O4)=O)C6=CC=C(O)C([As]7SCCS7)=C6O3)C=C1 | ||
| Formula | C24H18As2O5S4 | M.Wt | 664.5 |
| 溶解度 | DMF: 15 mg/ml,DMSO: 20 mg/ml,DMSO:PBS (pH 7.2) (1:10): 0.09 mg/ml | Storage | Store at -20°C,protect from light |
| General tips | Please select the appropriate solvent to prepare the stock solution according to the
solubility of the product in different solvents; once the solution is prepared, please store it in
separate packages to avoid product failure caused by repeated freezing and thawing.Storage method
and period of the stock solution: When stored at -80°C, please use it within 6 months; when stored
at -20°C, please use it within 1 month. To increase solubility, heat the tube to 37°C and then oscillate in an ultrasonic bath for some time. |
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| Shipping Condition | Evaluation sample solution: shipped with blue ice. All other sizes available: with RT, or with Blue Ice upon request. | ||
| Prepare stock solution | |||
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1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 1.5049 mL | 7.5245 mL | 15.0489 mL |
| 5 mM | 301 μL | 1.5049 mL | 3.0098 mL |
| 10 mM | 150.5 μL | 752.4 μL | 1.5049 mL |
Step 1: Enter information below (Recommended: An additional animal making an allowance for loss during the experiment)
g
μL
Step 2: Enter the in vivo formulation (This is only the calculator, not formulation. Please contact us first if there is no in vivo formulation at the solubility Section.)
Calculation results:
Working concentration: mg/ml;
Method for preparing DMSO master liquid: mg drug pre-dissolved in μL DMSO ( Master liquid concentration mg/mL, Please contact us first if the concentration exceeds the DMSO solubility of the batch of drug. )
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next addμL PEG300, mix and clarify, next addμL Tween 80, mix and clarify, next add μL saline, mix and clarify.
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next add μL Corn oil, mix and clarify.
Note: 1. Please make sure the liquid is clear before adding the next solvent.
2. Be sure to add the solvent(s) in order. You must ensure that the solution obtained, in the previous addition, is a clear solution before proceeding to add the next solvent. Physical methods such as vortex, ultrasound or hot water bath can be used to aid dissolving.
3. All of the above co-solvents are available for purchase on the GlpBio website.
Quality Control & SDS
- View current batch:
- Purity: >98.00% Appearance: A solid
- COA (Certificate of Analysis)
- SDS (Safety Data Sheet)
- Datasheet
Average Rating: 5 (Based on Reviews and 29 reference(s) in Google Scholar.)