Leupeptin, Microbial (Synonyms: Acetyl-L-leucyl-L-leucyl-L-argininal) |
Katalog-Nr.GC10027
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Leupeptin, Microbial ist ein Breitband-Serin- und Cystein-Protease-Hemmer.
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Cas No.: 103476-89-7
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
Leupeptin, Microbial ist ein Breitband-Serin- und Cystein-Protease-Hemmer[1]. Leupeptin, Microbial ist ein reversibler Protease-Hemmer. Es wirkt auf Rinder-Trypsin, humane Plasminase, Rindermilz-Cathepsin B und rekombinantes humanes Caltrypsin mit Ki-Werten von 35 nM, 3.4 μM, 6 nM und 72 nM[7].
Der Protease-Hemmer Leupeptin, Microbial verhinderte die Vermehrung von dem humanen Coronavirus-Stamm 229E in Kulturen von MRC-C-Zellen[3]. Die durch Leupeptin, Microbial vermittelte Hemmung trypsinähnlicher Proteasen erhält die Entwicklung des Substrat-Mycels aufrecht, während der proteolytische Abbau von Leupeptin, Microbial in stationären Phasenkulturen die trypsinähnlichen Proteasen dereprimiert. Das führt zur Verdauung des Substrat-Mycels und zur Förderung der Bildung von Luft-Mycel[2]. Als Calpain-Inhibitor schützte Leupeptin, Microbial vor allem Haarzellen vor Neomycin[5]. Die Expression von HBsAg durch Leupeptin wurden in der Zellsuspensionskultur um bis zu 50% wiederhergestellt.
Mäuse vertrugen Leupeptin, Microbial gut. Leupeptin, Microbial erhöhte dosisabhängig den LC3b-II-Spiegel im Gesamtgewebe-Extrakt und im lysosomalen Anreicherungsanteil(LE-Anteil). Elektronen-Mikroskopisch(EM) induzierte Leupeptin, Microbial die Akkumulation elektronendichter Vesikelstrukturen[4].
References:
[1]. Aoyagi T, Miyata S, et,al. Biological activities of leupeptins. J Antibiot (Tokyo). 1969 Nov;22(11):558-68. doi: 10.7164/antibiotics.22.558. PMID: 4243683.
[2]. Kim IS, Kim YB, et,al. Characterization of the leupeptin-inactivating enzyme from Streptomyces exfoliatus SMF13 which produces leupeptin. Biochem J. 1998 Apr 15;331 ( Pt 2)(Pt 2):539-45. doi: 10.1042/bj3310539. PMID: 9531495; PMCID: PMC1219386.
[3]. Appleyard G, Tisdale M. Inhibition of the growth of human coronavirus 229E by leupeptin. J Gen Virol. 1985 Feb;66 ( Pt 2):363-6. doi: 10.1099/0022-1317-66-2-363. PMID: 3968542.
[4]. Haspel J, Shaik RS, et,al. Characterization of macroautophagic flux in vivo using a leupeptin-based assay. Autophagy. 2011 Jun;7(6):629-42. doi: 10.4161/auto.7.6.15100. Epub 2011 Jun 1. PMID: 21460622; PMCID: PMC3127049.
[5]. Aoyagi T, Miyata S, et,al. Biological activities of leupeptins. J Antibiot (Tokyo). 1969 Nov;22(11):558-68. doi: 10.7164/antibiotics.22.558. PMID: 4243683.
[6]. Coffin AB, Williamson KL, et,al. Profiling drug-induced cell death pathways in the zebrafish lateral line. Apoptosis. 2013 Apr;18(4):393-408. doi: 10.1007/s10495-013-0816-8. PMID: 23413197; PMCID: PMC3627356.
[7]. Ganapathi TR, Sunil Kumar GB, et,al. Analysis of the limitations of hepatitis B surface antigen expression in soybean cell suspension cultures. Plant Cell Rep. 2007 Sep;26(9):1575-84. doi: 10.1007/s00299-007-0379-7. Epub 2007 May 30. PMID: 17534624.
| Leupeptin-Analyse [1]: | |
Vorbereitungsmethode | Die Konzentration von Leupeptin, Microbial wurde durch einen Enzym-Hemmungstest berechnet, wobei 50 pg Papain und 0.2 mM N-benzoylL-arginine-Ethylester als Zielprotease bzw. Papain-Substrat verwendet wurden. Die Enzymreaktionen wurden bei 25 ℃ und einem pH-Wert von 6.2 durchgeführt. |
Anwendungen | Leupeptin, Microbial ist eine Leucin-spezifische Protease und eine Metallprotease. |
| Zellexperiment [2]: | |
Zelllinien | MRC-C-Zelle |
Vorbereitungsmethode | Um die Wirkung von Leupeptin, Microbial auf die Virusausbeute zu untersuchen, wurden MRC-C-Kulturen in 35 mm Schalen durch Adsorption des Virus aus 0T ml konzentrierter Suspension von HCV 229E eine Stunde lang bei 36 ℃ infiziert. Die Kulturen wurden zweimal gewaschen und mit 2 ml Eagle's MEM plus 0.2% Bovines Serumalbumin und 20 mm-HEPES-Puffer pH 7.4 überschichtet. Leupeptin, Microbial wurde in verschiedenen Konzentrationen dem Virus-Inokulum, dem Erhaltungsmedium und auch dem Erhaltungsmedium hinzugefügt, mit dem die Kulturen 1 Stunde vor der Infektion behandelt wurden. Nach 24 Stunden bei 36 ℃ an der Luft wurden die Zellen in das Medium geschabt und durch Ultraschall-Behandlung aufgebrochen. |
Reaktionsbedingungen | 0.4 bis l00 µg/ml für 25 Stunden（1 Stunde vor der Infektion bis 24 Stunden nach der Infektion） |
Anwendungen | Der Protease-Hemmer Leupeptin, Microbial verhinderte die Vermehrung des humannen Coronavirus-Stamms 229E in Kulturen von MRC-C-Zellen. |
| Tierversuch [3]: | |
Tiermodelle | Männliche C57BL/6NCrl-Maus |
Vorbereitungsmethode | Mäuse erhielten intraperitoneale Injektionen von 0.5 ml steriler phosphatgepufferter Kochsalzlösung oder 0.5 ml PBS mit 9-40 mg/kg Leupeptin, Microbial hemisulfate. |
Dosierungsform | 0, 9, 18 36 und 40 mg/kg Leupeptin, Microbial; Intraperitoneale Injektion |
Anwendungen | Die Rate der LC3b-Akkumulation nach der Behandlung mit Leupeptin, Microbial war in der Leber am höchsten und in der Milz am niedrigsten. |
References: | |
| Cas No. | 103476-89-7 | SDF | |
| Überlieferungen | Acetyl-L-leucyl-L-leucyl-L-argininal | ||
| Chemical Name | 2-acetamido-N-(1-((5-((diaminomethylene)amino)-1-oxopentan-2-yl)amino)-4-methyl-1-oxopentan-2-yl)-4-methylpentanamide | ||
| Canonical SMILES | O=C(C(C([H])([H])C(C([H])([H])[H])([H])C([H])([H])[H])([H])N([H])C(C([H])([H])[H])=O)N([H])C(C(N([H])C(C([H])=O)([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])/N=C(N([H])[H])/N([H])[H])=O)([H])C([H])([H])C(C([H])([H])[H])([H])C([H])([H])[H] | ||
| Formula | C20H38N6O4.1/2H2SO4 | M.Wt | 493.6 |
| Löslichkeit | ≥ 24.7mg/mL in DMSO， ≥ 20mg/mL in Water | Storage | Store at -20°C |
| General tips | Please select the appropriate solvent to prepare the stock solution according to the
solubility of the product in different solvents; once the solution is prepared, please store it in
separate packages to avoid product failure caused by repeated freezing and thawing.Storage method
and period of the stock solution: When stored at -80°C, please use it within 6 months; when stored
at -20°C, please use it within 1 month. To increase solubility, heat the tube to 37°C and then oscillate in an ultrasonic bath for some time. |
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| Shipping Condition | Evaluation sample solution: shipped with blue ice. All other sizes available: with RT, or with Blue Ice upon request. | ||
| Prepare stock solution | |||
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1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 2.0259 mL | 10.1297 mL | 20.2593 mL |
| 5 mM | 405.2 μL | 2.0259 mL | 4.0519 mL |
| 10 mM | 202.6 μL | 1.013 mL | 2.0259 mL |
Step 1: Enter information below (Recommended: An additional animal making an allowance for loss during the experiment)
g
μL
Step 2: Enter the in vivo formulation (This is only the calculator, not formulation. Please contact us first if there is no in vivo formulation at the solubility Section.)
Calculation results:
Working concentration: mg/ml;
Method for preparing DMSO master liquid: mg drug pre-dissolved in μL DMSO ( Master liquid concentration mg/mL, Please contact us first if the concentration exceeds the DMSO solubility of the batch of drug. )
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next addμL PEG300, mix and clarify, next addμL Tween 80, mix and clarify, next add μL saline, mix and clarify.
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next add μL Corn oil, mix and clarify.
Note: 1. Please make sure the liquid is clear before adding the next solvent.
2. Be sure to add the solvent(s) in order. You must ensure that the solution obtained, in the previous addition, is a clear solution before proceeding to add the next solvent. Physical methods such as vortex, ultrasound or hot water bath can be used to aid dissolving.
3. All of the above co-solvents are available for purchase on the GlpBio website.
Quality Control & SDS
- View current batch:
- Purity: >98.00% Appearance: A solid
- COA (Certificate of Analysis)
- SDS (Safety Data Sheet)
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